一种水稻Wx基因突变的鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN110343781B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201910718870.5

    申请日:2019-08-05

    Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法,包括:提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池,同时提取对照水稻植株的基因组DNA;针对Wx基因设计4对巢式PCR引物;以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR;对PCR产物进行HRM分析,确定疑似突变混合池;分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA,将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR,扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株,以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选,为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。

    一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法

    公开(公告)号:CN104131092B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410349635.2

    申请日:2014-07-22

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体公开一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本发明针对目前SNP鉴定的局限性,将多重PCR、巢式PCR、等位特异性PCR相结合,提出基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本方法利用多重PCR实现2~4个基因片段扩增,提高实验效率,降低实验成本;利用巢式PCR提高扩增片段特异性,获得高质量、浓度均一的DNA模板,提高HRM技术稳定性;利用等位特异性PCR,实现SNP位点判别,避免荧光标记的设定或繁琐的电泳及酶切操作;通过上述方法的综合运用,实现多个SNP的批量鉴定、降低实验成本。

    一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789655A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126951.8

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pik-O-F、Pik-O-R和一对内引物Pik-T-F、Pik-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pik基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pik基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789654A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126909.6

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pita-O-F、Pita-O-R和一对内引物Pita-T-F、Pita-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示。利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pita基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pita基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

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