公开(公告)号：CN110343781A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910718870.5

申请日：2019-08-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭涛 ,  陈淳 ,  周丹华 ,  黄翠红 ,  严贤诚 ,  孙凯 ,  王慧 ,  陈志强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6848

Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法，包括：提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池，同时提取对照水稻植株的基因组DNA；针对Wx基因设计4对巢式PCR引物；以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR；对PCR产物进行HRM分析，确定疑似突变混合池；分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA，将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR，扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株，以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选，为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。

公开(公告)号：CN110343781B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910718870.5

申请日：2019-08-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭涛 ,  陈淳 ,  周丹华 ,  黄翠红 ,  严贤诚 ,  孙凯 ,  王慧 ,  陈志强

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6848

Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法，包括：提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池，同时提取对照水稻植株的基因组DNA；针对Wx基因设计4对巢式PCR引物；以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR；对PCR产物进行HRM分析，确定疑似突变混合池；分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA，将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR，扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株，以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选，为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。