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公开(公告)号:CN114990013A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210574762.7
申请日:2022-05-24
申请人: 江南大学
IPC分类号: C12N1/20 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12P13/08 , C12R1/19
摘要: 本发明公开了一株固定CO2产L‑苏氨酸的大肠杆菌工程菌及应用,属于发酵领域。本发明筛选获得了一株具有L‑苏氨酸生产能力的大肠杆菌FMME‑AA5,在此基础上通过游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶和亚磷酸脱氢酶,获得菌株大肠杆菌E.coli FMME‑AA5‑A。将构建的大肠杆菌工程菌用于发酵生产L‑苏氨酸,以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵42h,L‑苏氨酸产量可达145.0g/L,葡萄糖得率相比原始菌株的0.58g/g可提高至0.65g/g。
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公开(公告)号:CN114214293A
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202111599580.7
申请日:2021-12-24
申请人: 无锡阿科力科技股份有限公司 , 江南大学
摘要: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于恶臭假单胞菌的细胞色素P450环氧酶进行改造,克服了之前野生型的酶因为过氧化氢逸散和酸醇对质子转化率低而导致的催化效率低的局限,最终得到最佳突变体Q6(PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N),以此突变体为催化剂,以降冰片烯为底物,转化后10mL规模摇瓶产量为72.05g/L,摩尔产率为61.59%,单位菌体生产环氧降冰片烷的能力为3.6g/g,几乎不产生羟基化副产物。因此大大降低了之前的高菌体量以及繁复的后期分离纯化过程,为环氧降冰片烷的工业化生产和绿色生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111876349B
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202010698081.2
申请日:2020-07-20
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了一株产聚赖氨酸的白色链霉菌及其应用,属于微生物领域。白色链霉菌菌株(Streptomyces ghanaensis),保藏编号CCTCC NO:M 2020214。本发明的白色链霉菌FMME‑545具有较好的传代稳定性,在传代12代之后,其ε‑聚赖氨酸的生产能力均能够稳定在一定水平;在摇瓶水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达2.5~3.0g/L,在发酵罐水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达35~40g/L。本发明的发酵生产ε‑聚赖氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉,适用于工业化生产。
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公开(公告)号:CN111100865B
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202010013244.9
申请日:2020-01-07
申请人: 江南大学
摘要: 本发明提供了一种提高酿酒酵母丁醇耐受能力的方法,本发明提供的工程菌pY26‑CERT不影响菌株的正常生产,并且可以耐受1%丁醇,能够使得在该浓度下的生物量较野生型菌株显著增加19.7%,并且使IPC、MIPC、M(IP)2C这三种主要的鞘脂组分分别较野生型提高了20%、65%、和56%,另外细胞膜的完整性较野生型菌株提高了27.8%。能够提高在生产过程中对高浓度丁醇的抗压能力,有利于提高发酵产品的产量,也能够节约丁醇在工业化生产中的生产成本,有利于丁醇工业化生产发展。
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公开(公告)号:CN114107156A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111433195.5
申请日:2021-11-29
申请人: 江南大学
IPC分类号: C12N1/21 , C12N9/06 , C12N9/02 , C12N9/88 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/70 , C12P7/44 , C12R1/19
摘要: 本发明公开了一种高效生产戊二酸的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明通过分子生物学手段构建了一株双质粒重组菌,共表达芳香醛合酶基因AAS、胺氧化酶基因Mao以及醛脱氢酶基因Glox,将构建好的表达质粒导入大肠杆菌中构建得到重组细胞。再通过氨苄青霉素抗性和卡那霉素抗性组合平板筛选获得高效生产戊二酸的重组菌株。并通过优化底物浓度、菌体浓度,以及转化温度,实现了戊二酸的高效生产。在菌体浓度为30g/L、pH为8,并额外添加6mM NAD+的转化条件下反应30h,可将30g/L的L‑赖氨酸转化为19.65g的戊二酸,转化率可达到65.3%。
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公开(公告)号:CN114107153A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111423759.7
申请日:2021-11-26
申请人: 江南大学
摘要: 本发明涉及一种生产己二酸的重组菌,表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控己二酸生产的靶点基因,在此基础上,通过RBS序列调控不同基因片段的表达强度,实现定制化微生物群落,并且改善了己二酸生产性能。本发明的重组菌实现了从头合成己二酸,底物为脂肪酸,且该菌株在7.5L发酵罐发酵后,己二酸最高产量为5.2g/L。
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公开(公告)号:CN113957029A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202111257582.8
申请日:2021-10-27
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了一种调控生物被膜杂合系统改善苹果酸生产性能的策略,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段,利用生物被膜,结合苯酚功能化修饰CdS纳米材料,达到提高电子传输。通过引入靶向生物被膜杂合系统,构建得到含有CdS‑生物杂合系统的菌株,显著提高了CdS纳米材料与大肠杆菌的接触面积,提高了NADH浓度,进而改善苹果酸生产。在光照条件下,L‑苹果酸浓度和生产强度分别提高到9.84g/L和0.14g/L/h。5L发酵罐发酵生产该菌株,苹果酸产量达到45.93g/L,具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN113913478A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111425367.4
申请日:2021-11-26
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了一种发酵黄色短杆菌产L‑缬氨酸的方法。本发明将gapA和ilvBNC基因通过表达载体导入黄色短杆菌中,筛选获得高产L‑缬氨酸菌株的黄色短杆菌工程菌;利用该工程菌进行有氧‑厌氧分段发酵,并在厌氧发酵中后期添加VB3以及采用流加葡萄糖的方式,将发酵时间缩短到72h,L‑缬氨酸产率达到了95.00±1.50g/L,转化率达到33%,生产强度为1.32g/L/h,优化了L‑缬氨酸的发酵工艺,极大地提高了菌株的生产力和产酸效率。本发明所得高产L‑缬氨酸菌株,后续改造潜力巨大,且发酵工艺简单易行,成本低廉,适用于工业化生产。
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公开(公告)号:CN110643585B
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN201911088054.7
申请日:2019-11-08
申请人: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
摘要: 本发明公开了一种利用氨基酸脱氨酶生产α‑酮‑β‑甲基正戊酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明是在氨基酸脱氨酶突变体Pm‑LAAD*的基础上,利用构象动力学的方法进行蛋白质工程改造,获得新的突变体Pm‑LAAD*(V411A/T414A),其稳定性显著提高,50℃下半衰期从8h增加至10h,4℃冷藏保存的半衰期从150h上升至240h。该酶经过改造后,转化体系中不添加任何缓冲剂,转化通气量仅为0.2vvm,转化体系中添加湿细胞添加量15g/L,转化12h,L‑异亮氨酸摩尔转化率达到95%以上,产量达到98.0g/L,下游纯化简易,极大地降低了生产成本,能够满足工业化需求。
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公开(公告)号:CN110734936B
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN201911128392.9
申请日:2019-11-18
申请人: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
IPC分类号: C12P7/42
摘要: 本发明公开了一种多酶级联生产(R/S)‑羟基蛋氨酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(R)‑HMTBA,通过分批补料解除底物抑制,转化周期由23h缩短至15h,(R)‑HMTBA产量可达到97.0g/L,ee>99%,蛋氨酸摩尔转化率达到96.3%;利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(S)‑HMTBA,通过分批补料解除底物抑制,转化周期由23h缩短至18h,(S)‑HMTBA产量可达到98.0g/L,ee>99%,蛋氨酸摩尔转化率达到98.6%。
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