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公开(公告)号:CN113337495B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202110620019.6
申请日:2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高唾液酸产量的方法与应用,属于酶工程、微生物工程领域。本发明对N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑差向异构酶的酶催化活性关键氨基酸位点Gly371进行饱和突变,筛选提高催化效率的酶突变体。通过过量表达催化效率提高的N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑差向异构酶突变体和N‑乙酰神经氨酸醛缩酶,提高重组大肠杆菌催化生产唾液酸的生产效率;采用本发明构建的含有G371C的重组大肠杆菌和含有G371A的重组大肠杆菌全细胞催化制备得到Neu5Ac产量分别为352.0和353.6mmol·L‑1,显著高于野生型重组菌,同时,含有突变体的重组菌株催化GlcNAc转化生成Neu5Ac的转化效率,显著高于对照菌株。
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公开(公告)号:CN112759665B
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202110212545.9
申请日:2021-02-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种采用虎奶菇超支化多糖制备纳米硒多糖的方法。本发明通过超支化多糖的特殊结构,在酸性溶液中为纳米硒合成提供软模板,进而通过Vc的原位还原获得稳定的超支化多糖纳米硒产物,纳米硒含量高,达到16.35%,并且稳定性好。该方法制备条件温和、操纵简便,在化学合成硒纳米材料领域具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号:CN113493758B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202110598376.7
申请日:2021-05-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株缩短发酵周期的产酪醇重组大肠杆菌及其应用,属于发酵工程技术领域。其公开了一株缩短发酵周期的产酪醇重组大肠杆菌YC166,已保藏于中国典型培养物保藏中心,分类命名为大肠杆菌YC166(Escherichia coli YC166),保藏日期2021年4月12日,保藏编号CCTCC NO:M2021358。将该菌株应用于酪醇的摇瓶发酵或发酵罐发酵获取。本发明提供的菌株发酵水平与现有技术公开的产酪醇菌株相当,但发酵速度显著高于现有技术的同类型菌株。
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公开(公告)号:CN114686506A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202210258118.9
申请日:2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法及应用,属于基因工程与发酵工程领域。本发明中构建的色氨酸操纵子结合温敏阻遏系统(TAT)共表达系统可实现大肠杆菌生长前期稳定正常生长,并通过控制发酵温度,调节结构基因的表达水平,以达到调控D,D‑羧肽酶实时表达量、有效促进重组蛋白胞外分泌的效果。本发明构建的共表达系统可提高重组大肠杆菌外膜的渗透性,提高了重组蛋白胞外分泌水平,对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号:CN114686414A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202210258249.7
申请日:2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准定量调控大肠杆菌全细胞催化的方法及应用,属于基因工程与生物催化领域。本发明通过构建色氨酸操纵子及温敏阻遏系统,可实现大肠杆菌生长前期稳定、正常生长,稳定期促进目的蛋白的表达;该系统还通过控制发酵温度,调节结构基因的表达水平,调控D,D‑羧肽酶实时表达量,增加了胞内可溶性肽聚糖,提高了重组大肠杆菌外膜的透性,有助于催化反应的底物及产物自由穿梭于细胞内外,更加有效的促进全细胞的高效催化。
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公开(公告)号:CN114214208A
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202111524579.8
申请日:2021-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高耐硒灵芝突变体菌株及其应用,属于真菌育种技术领域。其在富硒地区采集灵芝菌子实体,获得菌丝体培养物,收集其孢子后进行诱变育种,在高硒浓度培养基中进行富集培养,获得耐硒能力提高的灵芝菌丝体。所获得的耐硒能力提高的灵芝突变体命名为Ganoderma sp.ML2613,该突变体的菌丝体培养物已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M20211217。与原菌株菌丝体培养物相比,突变体Ganoderma sp.ML2613可以在硒含量为1600mg/L的培养液中维持正常生长,而原菌株的菌丝体在同样的发酵培养液中生长极其缓慢。突变体Ganoderma sp.ML2613更适合在高硒含量环境中培养,具有获得富硒菌丝体的潜力,也有利于在高硒环境中进行灵芝的野外栽培。
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公开(公告)号:CN113416662A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110621208.5
申请日:2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用,属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过将关键酶西柏三烯醇合成酶基因、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶基因、法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)基因整合至酿酒酵母菌株基因组上,并利用启动子Phxt1替换角鲨烯合成酶(ERG9)原来的启动子来敲低竞争途径麦角固醇途径,还将含有关键酶基因ggpp基因和cbts基因的游离质粒转入该酿酒酵母中,进一步提高了西柏三烯一醇产量。本发明还采用线粒体区室化方法,将GGPP合酶和西柏三烯醇合成酶定位到线粒体中,使西柏三烯一醇产量提高至283.98μg/L,在5L发酵罐发酵水平,西柏三烯一醇产量可达15mg/L。
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公开(公告)号:CN113388536A
公开(公告)日:2021-09-14
申请号:CN202110621179.2
申请日:2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了产西柏三烯一醇的酿酒酵母的构建方法及应用,属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过在酿酒酵母W303‑1A中异源表达西柏三烯一醇合成的2个关键酶香叶基香叶基焦磷酸合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts,实现了西柏三烯一醇在酿酒酵母中的从头生产,并进一步通过与西柏三烯醇合酶基因cbts的串连过表达关键酶法尼基焦磷酸合成酶(ERG20),获得的重组菌株的西柏三烯一醇产量显著提高。将上述途径构建至酿酒酵母BY4741中,其西柏三烯一醇的产量提高至对照菌株的3倍。在关键酶法尼基焦磷酸合成酶基因前添加启动子,进一步提高重组酿酒酵母的西柏三烯一醇产量。
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公开(公告)号:CN112813013A
公开(公告)日:2021-05-18
申请号:CN202110176003.0
申请日:2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产羟基酪醇的重组大肠杆菌及其应用,属于生物技术领域。本发明采用E.coli YMGR5A作为宿主菌株,表达了大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中4‑羟苯基乙酸羟化酶基因HpaBC(GenBank登录号:CP053601.1),即在宿主菌株基因组中,删除poxB基因并在该位点整合HpaBC基因,获得羟基酪醇高产菌株E.coli YMGRD1H1。采用本发明提供的重组大肠杆菌E.coli YMGRD1H1在葡萄糖的培养基中发酵生产羟基酪醇的产量可高达2.95g/L。
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公开(公告)号:CN112409464A
公开(公告)日:2021-02-26
申请号:CN202011322536.7
申请日:2020-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌重组蛋白胞外生产水平的信号肽突变体及应用,属于基因工程技术领域。本发明通过对信号肽M1(MSDEQKKPE QIHRRDILKWGAMAGAAVA)的N端区域进行定向进化,筛选获得具有高效胞外分泌水平的信号肽突变体文库,通过该突变体文库构建获得系列重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组枯草芽孢杆菌菌株。将获得的正向信号肽突变体进行排列组合复合突变,获得具有高效重组蛋白表达分泌水平的信号肽复合突变体,利用其构建获得具有高效胞外蛋白胞外分泌水平的枯草杆菌杆菌突变株。本发明所筛选获得的信号肽突变体,对于重组蛋白在枯草芽孢杆菌中具有高效的胞外蛋白分泌水平,重组蛋白胞外分泌水平提高了15倍以上。本发明方法对信号肽改造及重组蛋白在宿主中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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