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公开(公告)号：CN101504339A
公开(公告)日：2009-08-12
申请号：CN200910025120.6
申请日：2009-02-24
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N1/30 , G01N33/483
Abstract: 本发明公开了一种检测鹌鹑早期原始生殖细胞的方法，该方法是将取样所得的胚盘固定，透明，复水后，滴加封闭液，去除后加一抗，4℃过夜反应，去除后，PBS漂洗，再加二抗，4℃过夜反应，与一抗结合并显色。待PBS漂洗后，再进行脱水和二甲苯处理，自然干燥并封片。用本方法检测PGCs，能够得到各期PGCs的分布和增殖情况。使用本发明可鉴定早至未孵化期的鹌鹑原始生殖细胞，通过本发明可获得鹌鹑早期原始生殖细胞的迁移和聚集规律。
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公开(公告)号：CN100463963C
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200610096971.6
申请日：2006-10-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明公开了一种家猪耳皮肤组织冷冻保存方法，其特征是将家猪耳皮肤组织置于冷冻保护液中，先在环境温度为18～24℃条件下平衡20～30分钟，然后用液氮蒸汽熏蒸至冷冻保护液结冻后，再将家猪耳皮肤组织置于液氮面上8～20小时后，投入液氮中保存。通过本发明可获得对家猪耳皮肤组织冷冻保存，解冻后，皮肤组织生长能力。本发明操作简单，无需特殊冷冻仪器，样本收集非常方便，适合于珍稀动物体细胞的长期保存。
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公开(公告)号：CN1821393A
公开(公告)日：2006-08-23
申请号：CN200610038612.5
申请日：2006-03-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 鸡胚原始生殖细胞的玻璃化冷冻方法，涉及对发育至第19期(孵化约3天)和第28期(孵化约5.5天)鸡胚性腺原始生殖细胞进行玻璃化冷冻保存的方法。将鸡胚原始生殖细胞加入玻璃化冷冻液后，移入冷冻管，于4℃±1℃下平衡5min±0.5min，液氮面上静置1min±0.5min，最后，直接投入液氮。本发明操作简单、快捷，克服了常规慢速冷冻保存方法中需长时间平衡和逐步降温的特点，保存效果稳定、可靠，可以作为传统的禽类遗传资源保存方式的拓展。
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公开(公告)号：CN1821390A
公开(公告)日：2006-08-23
申请号：CN200610038608.9
申请日：2006-03-02
Applicant: 扬州大学
Inventor： 李碧春
IPC: C12N5/06
Abstract: 奶牛皮肤冷冻保存方法，涉及种质资源保存、转基因、低温冷冻保存、组织工程等领域。将奶牛皮肤组织置于冷冻保护液中，用干冰熏蒸法冷冻至保护液冻结后，转移置－80℃的冷冻器中。本发明研究了冷冻剂对奶牛皮肤生长能力的毒性和保护性，通过研究建立冷冻保存体细胞的新方法。通过以上述方法，可获得解冻后成活率较高的奶牛皮肤冷冻组织。解冻后，皮肤组织能生长出成纤维细胞。本发明无需特殊的冷冻仪器要求，简单容易操作，体细胞组织样本的收集非常方便，用于奶牛种质资源保存、克隆动物等，还适合于珍稀动物或珍贵细胞的长期保存。
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公开(公告)号：CN119875997A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411857778.4
申请日：2024-12-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , A61K38/30 , A61P15/08
Abstract: 本发明公开了IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中的应用。本发明通过IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中发挥作用，可以明确PI3K‑AKT信号通路是PGCs增殖所必需的，为其他信号通路小分子研究提供理论基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119307442A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411576221.3
申请日：2024-11-06
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了一种促进鸡原始生殖细胞增殖的无鸡血清培养基及其应用，所述培养基中采用卵转铁蛋白代替鸡血清。本发明公开了一种采用卵转铁蛋白代替PGCs培养体系中鸡血清的作用，可以保持PGCs自我更新，从而为探究稳定的培养体系提供依据；本发明培养基可以避免鸡血清成分不明确造成的不良影响，对各种生长因子的精确使用可提供更佳的培养条件，且降低了培养成本。
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公开(公告)号：CN113671194B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202110965416.7
申请日：2021-08-23
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种筛选鸡目的蛋白互作转录因子的方法，本方法适用于建立4.5d鸡胚生殖嵴的cDNA文库，筛选已知基因的互作蛋白。可大量捕捉获得和PGCs形成相关的转录因子，完善相应的信号通路，绘制PGCs的形成调控网络，为大量体外诱导获取PGCs奠定实验数据和理论基础。该方法成本低、易操作、高通量、可达到全基因组水平，弥补了其他探讨蛋白互作方式的不准确性和不全面性，为后期深入探究新蛋白的功能、研究蛋白与蛋白的互作依赖关系等进行铺垫。适用于建立4.5d鸡胚生殖嵴的cDNA文库，筛选已知基因的互作蛋白。采用本方法，可大量捕捉获得和PGCs形成相关的转录因子，完善相应的信号通路，绘制PGCs的形成调控网络，为大量体外诱导获取PGCs奠定实验数据和理论基础。
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公开(公告)号：CN119020269A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202410927512.6
申请日：2024-07-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开一种研究类泛素化修饰调节鸡原始生殖细胞特性的方法，包括：采用VII‑31和MLN4924处理PGCs；PGCs生物学特性的检测。本发明方法简便高效、特异性强，填补了类泛素化修饰对鸡PGCs特性调节作用研究的空白，为体外长期维持鸡PGCs的生物学特性提供理论基础，以期在体外培养扩增解决体外获取数量不足的问题进而更好地实现鸡PGCs的高效利用；解决缺乏研究类泛素化修饰调节鸡PGCs特性的问题，为制定鸡PGCs体外长期培养扩增方案提供研究基础；采用本方法，可研究类泛素化修饰对鸡PGCs特性的调节作用，便于深入研究鸡PGCs生物学特性维持机制，为PGCs的发生机制研究和具体应用作铺垫。
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公开(公告)号：CN118892113A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202410933465.6
申请日：2024-07-12
Applicant: 扬州大学
IPC: A01N1/02 , C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了鸡胚胎期性腺的冷冻保护液、冻存及原始生殖细胞分离培养方法，涉及畜牧学和生物技术领域。冷冻保护液包括A液和B液；其中，A液包括：胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX，且胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX的体积比为80～90:10～20:1；B液包括：A液和二甲基亚砜，且A液和二甲基亚砜的体积比为4～6:1。冻存及原始生殖细胞分离培养方法包括：鸡胚性腺的获取；鸡胚性腺的冻存；鸡胚性腺的复苏；原始生殖细胞的分离培养。本发明可以将鸡胚胎期性腺冻存后，在合适的时间和地点再进行复苏，对性腺中的PGCs进行培养建系，且冻存、复苏和PGCs建系的效率高，获得的PGCs细胞系依然保持PGCs的生物学特性。
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公开(公告)号：CN117683813A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311701086.6
申请日：2023-12-12
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
Abstract: 本发明提供了DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体和NC_006127.4位点敲除载体，属于基因编辑技术领域。本发明通过设计靶向EE0.6序列的sgRNA和靶向NC_006127.4位点的sgRNA，设计oligo引物，将双链oligo与PX458质粒、PX461连接，获得不同的重组质粒，本发明还制备了双sgRNA敲除载体，并将不同的重组质粒导入DF‑1细胞中，获得了不同的EE0.6位点和NC_006127.4的敲除载体，并进行了敲除效率验证。结果表明，DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体以及NC_006127.4位点敲除载体构建成功，为DF‑1细胞外源靶基因高效整合奠定了基础。
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