公开(公告)号：CN119875997A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202411857778.4

申请日：2024-12-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘欣 ,  左其生 ,  李碧春 ,  龚威 ,  吴骏 ,  吕晓倩 ,  牛英杰 ,  靳锴

IPC: C12N5/0735 ,  A61K38/30 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开了IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中的应用。本发明通过IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中发挥作用，可以明确PI3K‑AKT信号通路是PGCs增殖所必需的，为其他信号通路小分子研究提供理论基础。

公开(公告)号：CN119307442A

公开(公告)日：2025-01-14

申请号：CN202411576221.3

申请日：2024-11-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 左其生 ,  刘欣 ,  李碧春 ,  龚威 ,  吕晓倩 ,  牛英杰 ,  靳锴

IPC: C12N5/0735

Abstract: 本发明公开了一种促进鸡原始生殖细胞增殖的无鸡血清培养基及其应用，所述培养基中采用卵转铁蛋白代替鸡血清。本发明公开了一种采用卵转铁蛋白代替PGCs培养体系中鸡血清的作用，可以保持PGCs自我更新，从而为探究稳定的培养体系提供依据；本发明培养基可以避免鸡血清成分不明确造成的不良影响，对各种生长因子的精确使用可提供更佳的培养条件，且降低了培养成本。

公开(公告)号：CN119020269A

公开(公告)日：2024-11-26

申请号：CN202410927512.6

申请日：2024-07-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 左其生 ,  王梓羽 ,  龚威 ,  张亚妮 ,  靳锴 ,  牛英杰 ,  姚泽令 ,  李碧春

IPC: C12N5/0735 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开一种研究类泛素化修饰调节鸡原始生殖细胞特性的方法，包括：采用VII‑31和MLN4924处理PGCs；PGCs生物学特性的检测。本发明方法简便高效、特异性强，填补了类泛素化修饰对鸡PGCs特性调节作用研究的空白，为体外长期维持鸡PGCs的生物学特性提供理论基础，以期在体外培养扩增解决体外获取数量不足的问题进而更好地实现鸡PGCs的高效利用；解决缺乏研究类泛素化修饰调节鸡PGCs特性的问题，为制定鸡PGCs体外长期培养扩增方案提供研究基础；采用本方法，可研究类泛素化修饰对鸡PGCs特性的调节作用，便于深入研究鸡PGCs生物学特性维持机制，为PGCs的发生机制研究和具体应用作铺垫。

公开(公告)号：CN115896175A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211650762.7

申请日：2022-12-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 左其生 ,  龚威 ,  张亚妮 ,  王挺 ,  孙红艳 ,  李碧春

IPC: C12N15/85 ,  C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/12 ,  C07K14/465

Abstract: 本发明属于禽类生殖技术领域，特别是涉及基因C2EIP在促进PGCs形成中的应用和C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体。本发明提供了基因C2EIP在促进鸡原始生殖细胞形成中的应用，基因C2EIP表达得到的蛋白以及C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体在调控鸡原始生殖细胞形成过程中的应用。本发明提供的应用能够有效的提高体外鸡原始生殖细胞的形成效率，扩大鸡原始生殖细胞的形成数量，解决原始生殖细胞数量不足的问题，为进一步实现鸡原始生殖细胞在物种资源保护领域的应用提供细胞材料。

公开(公告)号：CN118979088A

公开(公告)日：2024-11-19

申请号：CN202410927510.7

申请日：2024-07-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 左其生 ,  龚威 ,  王梓羽 ,  张亚妮 ,  靳锴 ,  牛英杰 ,  姚泽令 ,  李碧春

IPC: C12P21/06 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  G01N30/02 ,  G01N30/60 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明公开了一种筛选鸡原始生殖细胞发生过程中泛素化修饰靶蛋白的方法，包括以下步骤：提取蛋白并进行胰酶消化；对胰酶消化中得到的肽段进行亲和富集；通过LC‑MS/MS分析亲和富集得到的修饰肽段并进行数据库搜索；样品重复性检验和蛋白差异修饰分析；泛素化功能及泛素化修饰靶点分析。本发明能够高效筛选鸡PGCs发生过程中泛素化修饰靶蛋白；方法简便高效，成本低廉；为研究鸡PGCs发生过程中泛素化的调控机制提供研究思路和理论基础，以解决体外获取鸡PGCs数量不足的问题，为家禽PGCs高效应用作铺垫；具有推广生产潜能和经济效益。

公开(公告)号：CN115785261A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211263277.4

申请日：2022-10-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 龚威 ,  左其生 ,  李碧春

IPC: C07K16/06 ,  C07K16/18 ,  C12N15/70 ,  C12N15/113 ,  G16B30/00

Abstract: 本发明涉及一种高效制备lncRNA编码小肽的多克隆抗体的方法，包括以下步骤：（1）对小肽EPC5进行了生物学分析；（2）化学合成EPC5的核苷酸序列并设计引物，PCR扩增后连入载体构建EPC5原核融合表达载体；（3）测序鉴定构建成功的重组质粒转化BL菌种IPTG诱导表达重组蛋白并纯化，SDS‑PAGE检测抗原纯度；（4）以纯化的重组蛋白与佐剂混合后免疫日本大耳兔并在免疫后获取抗血清并通过ELISA检测抗血清效价；（5）纯化抗体，SDS‑PAGE测定抗体纯化浓度，ELISA联合Western Blot探究成品抗体效价，稀释比例和特异性。通过本发明，能够高效制备lncRNA编码小肽的多克隆抗体；为家禽种质资源保护等工作提供新思路。