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公开(公告)号：CN102363043A
公开(公告)日：2012-02-29
申请号：CN201110303309.4
申请日：2011-10-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , C12N15/21 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种猪用C型口蹄疫基因工程疫苗佐剂及制备方法，特别是一种用于由C型口蹄疫的VP1和VP3蛋白混合物构成的C型口蹄疫亚单位疫苗的佐剂，以及其制备方法。本发明的猪用C型口蹄疫基因工程疫苗佐剂是重组猪α-干扰素，特别是剔除掉了干扰素的前端8个信号肽的重组猪α-干扰素，其核苷酸序列为SEQ ID No3。
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公开(公告)号：CN102140538A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201110025289.9
申请日：2011-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种用于检测其待检血样是否带有丙型肝炎病毒的试剂盒，该试剂盒中有四条特异性引物。本发明的试剂盒使用方法是以从被检试样中提取的RNA为模板，在其中加入特异性引物、聚合酶、缓冲液及水后进行LAMP反应，反应产物或者加入溴化乙锭后在紫外灯下观察，根据反应产物有在紫外光下是否产生荧光确定被检样品是否带有丙型肝炎病毒；或者将反应产物进行琼脂凝胶电泳，根据反应产物是否在特定泳道出现条带确定被检样品是否带有丙型肝炎病毒。
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公开(公告)号：CN119955944A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510030997.3
申请日：2025-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定口蹄疫病毒持续感染牛的分子标志物组合及其应用。所述的分子标志物组合由IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因组成。在口蹄疫病毒持续感染牛中，IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因的表达水平均在攻毒后7天显著低于康复牛，而在攻毒后14天显著高于康复牛。对这三个基因进行诊断的敏感性和特异性分析。结果显示，在7dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性均达到了100％。在14dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性也均达到了100％。该结果说明IL‑10、IL‑1β、CXCL8可作为一个分子标志物组合，在口蹄疫病毒感染早期(
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公开(公告)号：CN119162247A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411485227.X
申请日：2024-10-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系的构建方法。本发明构建了表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系。在细胞稳定传代试验中证实，当HEK‑E2细胞系能够稳定传10代时，培养上清中E2蛋白的表达量稳定，产量稳定保持在1.0‑1.2 mg/ml，亲和层析纯化获得的E2蛋白纯度达到95%，双抗体夹心ELISA确定其具有很好的反应原性，206佐剂乳化E2蛋白免疫猪能够诱导高水平的血清抗体，攻击强毒后能够得到完全保护。本发明构建的HEK‑293细胞系能够稳定分泌表达的CSFV E2蛋白的具备开发为重组E2基因工程疫苗的应用前景。
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公开(公告)号：CN117625551A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311591386.3
申请日：2023-11-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程学和免疫学技术领域，具体涉及一种能够表达口蹄疫病毒颗粒样的细胞池构建与应用。本发明通过构建含有口蹄疫病毒的重组质粒，并进一步转染至宿主细胞之后筛选得到了一种稳健表达口蹄疫病毒样颗粒的重组多克隆细胞池，为进一步防范口蹄疫病毒，以及制备口蹄疫病毒疫苗提供新策略。本发明获得的重组中国卵巢细胞池不仅稳健表达口蹄疫病毒样颗粒，而且通过该重组中国卵巢细胞池制备的口蹄疫病毒样颗粒具有良好的免疫原性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114540393B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202210236002.5
申请日：2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用，属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒，所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体，插入优化好的Cap全长基因，所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足，使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能，且得到的病毒样颗粒免疫原性高，成本低。
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公开(公告)号：CN114540393A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210236002.5
申请日：2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用，属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒，所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体，插入优化好的Cap全长基因，所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足，使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能，且得到的病毒样颗粒免疫原性高，成本低。
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公开(公告)号：CN111793650A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010651532.7
申请日：2020-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/866 , C12N15/62 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61K39/23 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明根据计算机软件模拟结果，在猪细小病毒PPV VP2蛋白Loop2区和Loop4区后嵌入SAT2FMDV B细胞表位(VYTKAAAAIRGDRAALAAKYADTNHTLPPTFNFGYVTVDK)，N端嵌入两个T细胞表位(NVQEGRRKHTDVAFLLDRST)串联。根据昆虫细胞嗜性优化合成嵌合基因GS1927OP，克隆到载体pFastBacTMDual上，转化感受态细胞DH10Bac，获得重组杆粒rBacmidN(T1)2L2B4B，转染sf9细胞收获重组杆状病毒rBacN(T1)2L2B4B，用其感染HF细胞，使用间接免疫荧光IFA针对嵌合表位和VP2蛋白进行检测，具有特异性荧光。Western-blot针对B、T细胞表位和VP2蛋白进行检测，在72KDa出现一条特异性条带。透射电镜TEM观察，重组蛋白N(T1)2L2B4B能够自我组装成病毒样颗粒。本发明旨在为南非2型口蹄疫制备储备疫苗，并能在此基础上达到同时预防南非2型口蹄疫和猪细小病的目的。
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公开(公告)号：CN111020059A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911309233.9
申请日：2019-12-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型的PCR检测方法，根据猪圆环病毒3型(PCV3)的保守基因区段筛选出特异性引物，建立PCR检测方法，所得目的基因扩增片段大小为457bp。建立的PCV3 PCR不与猪圆环病毒2型、1型和2型猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪乙脑病毒、古典猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒发生交叉反应，可用以了解样品采集地猪群PCV3的感染情况，经敏感性和特异性检测分析表明建立的PCV3 PCR检测方法具有良好的特异性和敏感性，可用于田间样品的常规检测。采用本发明建立的PCR方法检测了我国2017-2018年11个不同省份不同猪场的总共1402份田间样品，PCV3的阳性检出率为29.48％，具有一定临床应用价值，可用于临床PCV3的检测。
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公开(公告)号：CN110305984A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910511586.0
申请日：2019-06-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种非洲猪瘟病毒的可视化LAMP检测试剂盒。该试剂盒包含有6条LAMP引物的LAMP反应液构成的检测体系。本发明的试剂盒以中性红染料替代了传统钙黄素，不仅使可视化直观效果更加鲜明，将反应时间缩短至45分钟，而且还实现了由试剂盒直接提供反应预混缓冲液的需求，这样进一步简化了操作程序，更加有效避免污染发生。应用本发明的试剂盒进行检测，能够肉眼直接直观判断，具有良好的特异性、敏感性和稳定性。
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