一种界面自组装羰基还原酶及在(R)-3-羟基-3-苯基丙酸乙酯合成中的应用

    公开(公告)号:CN108998430B

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN201810696272.8

    申请日:2018-06-29

    Abstract: 本发明公开了一种界面自组装羰基还原酶及在(R)‑3‑羟基‑3‑苯基丙酸乙酯合成中的应用,将羰基还原酶加入Tirs‑HCl缓冲液中,再加入聚苯乙烯的甲苯溶液,在黑暗、40~100r/min、20~40℃条件下,于摇床中震荡反应1~4小时,离心,获得上层为有机相、中间层为界面自组装羰基还原酶、下层为水相的反应体系,取出中间层用甲苯和Tris‑HCl缓冲液洗涤,获得界面自组装羰基还原酶;本发明构建的界面自组装羰基还原酶在有机相和水两相界面具有较好的催化功能,能够将3‑羰基‑3‑苯基丙酸乙酯转化为(R)‑3‑羟基‑3‑苯基丙酸乙酯,(R)‑3‑羟基‑3‑苯基丙酸乙酯的对映体过剩值大于99%。

    磁性固定化酵母细胞及其在制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用

    公开(公告)号:CN111218441A

    公开(公告)日:2020-06-02

    申请号:CN202010114397.2

    申请日:2020-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种磁性固定化酵母细胞及其在制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯中的应用,所述磁性固定化酵母细胞是将赖氨酸修饰磁性纳米粒子与酵母细胞溶液混匀,20℃-40℃、130-170r/min摇床震荡中固定2-6h,反应结束后,磁分离,沉淀用去离子水洗涤,冻干,获得磁性固定化酵母细胞。本发明固定化方法有效提高了酵母细胞的稳定性,增强了细胞对底物溶液的耐受性。在外加磁场的作用下磁性固定化细胞更易于从反应体系分离,有利于产物的分离提取,简化了工艺流程。在交变磁场反应器中合适的磁场频率和磁场强度能有效增强反应体系的传质过程,显著缩短还原反应时间,进而提高生物转化效率。

    一种脂肪酶催化在线合成S-硫代乙酸苄酯的方法

    公开(公告)号:CN108060184A

    公开(公告)日:2018-05-22

    申请号:CN201711393242.1

    申请日:2017-12-21

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶催化在线合成S‑硫代乙酸苄酯的方法:以二甲亚砜为反应溶剂,以物质的量之比为1:0.5~6的苄基硫醇与乙酸乙烯酯为原料,以脂肪酶Lipozyme TL IM为催化剂,将原料和反应溶剂置于注射器中,将脂肪酶Lipozyme TL IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道器中进行酰化反应,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;控制酰化反应温度为20~60℃,酰化反应时间为20~40min,通过产物收集器在线收集反应液,反应液经常规后处理得到S‑硫代乙酸苄酯。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。

    一种两步微生物转化法制备R‑扁桃酸的方法

    公开(公告)号:CN106086090A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610576427.5

    申请日:2016-07-19

    Inventor: 欧志敏 马兰

    CPC classification number: C12P7/42

    Abstract: 本发明公开了一种两步微生物转化法制备R‑扁桃酸的方法,所述方法为:以苯甲酰甲酸乙酯为底物,以酿酒酵母经发酵培养获得的菌体为催化剂,以pH值6‑8的缓冲液为反应介质,在20‑45℃、100‑200rpm条件下进行转化反应,获得R‑扁桃酸乙酯;以R‑扁桃酸乙酯为底物,以蜡样芽孢杆菌经发酵培养获得的菌体为催化剂,以有机溶剂为助溶剂,以pH值7‑9的缓冲液为反应介质,在20‑40℃、100‑200rpm条件下进行反应,获得R‑扁桃酸。本发明方法成本低廉,环境友好,反应条件温和;易于大规模工业化生产;操作简便,摩尔转化率较高;可将产率提高到99.8%,ee值提高到100%。

    一种微生物转化苯甲酰甲酸乙酯制备(S)-(+)-扁桃酸乙酯的方法

    公开(公告)号:CN102719496B

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201210211536.9

    申请日:2012-06-21

    CPC classification number: Y02P20/584 Y02P20/588

    Abstract: 本发明提供了一种以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2266为生物催化剂,生物催化苯甲酰甲酸乙酯制备(S)-(+)-扁桃酸乙酯的方法。所述方法包括:以苯甲酰甲酸乙酯为底物,以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2266发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂,在水和正己烷两相体系中,于20~35℃下进行转化反应8~120小时,转化液经分离纯化得到所述(S)-(+)-扁桃酸乙酯;该微生物转化方法反应条件温和,环境友好,产物光学纯度高,底物转化率高,分离纯化过程简单,催化剂可重复利用,适于工业化生产。

    一种微生物转化制备S-(+)-3-羟基四氢呋喃的方法

    公开(公告)号:CN102071231B

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201010567804.1

    申请日:2010-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种微生物转化制备S-(+)-3-羟基四氢呋喃的方法:在pH 5.0~8.0的磷酸盐缓冲液中,以3-酮基四氢呋喃为底物、以酿酒酵母CGMCC No.2266发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂,于25~45℃下转化反应8~40小时,反应结束后,转化液经分离纯化得到所述S-(+)-3-羟基四氢呋喃;本发明有益效果主要体现在:(1)生产菌株安全无毒,易于大规模培养,成本低廉;(2)操作简便,反应过程中不需要添加价格昂贵的辅酶,收率高;(3)易于实现大规模工业化生产;(4)反应条件温和,环境友好。

    一种微生物转化制备(S)-3-羟基-3-(2-噻吩基)-丙酸乙酯的方法

    公开(公告)号:CN102191293A

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN201110066174.4

    申请日:2011-03-18

    CPC classification number: Y02P20/588

    Abstract: 本发明公开了一种微生物转化制备(S)-3-羟基-3-(2-噻吩基)-丙酸乙酯的方法,所述的方法为:以3-羰基-3-(2-噻吩基)-丙酸乙酯为底物,以酿酒酵母菌株CGMCC No.2266发酵获得的发酵液再制得的固定化细胞颗粒为生物催化剂,以邻苯二甲酸二丁酯为溶剂组成生物转化体系,于20~40℃下,转化反应时间为8~72小时,转化液经分离纯化得到产物(S)-3-羟基-3-(2-噻吩基)-丙酸乙酯;该微生物转化方法反应条件温和,环境友好,产物光学纯度高,底物转化率较高,分离纯化过程简单,催化剂可重复利用,适于工业化生产。

    一种微生物转化制备S-(+)-3-羟基丁酸甲酯的方法

    公开(公告)号:CN102071227A

    公开(公告)日:2011-05-25

    申请号:CN201010567729.9

    申请日:2010-11-30

    Abstract: 本发明提供了一种微生物转化制备S-(+)-3-羟基丁酸甲酯的方法:在pH 5.0~8.0的磷酸盐缓冲液中,以乙酰乙酸甲酯为底物、以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2266发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂,于25~45℃下转化反应8~40h,反应结束后,转化液经分离纯化得到所述S-(+)-3-羟基丁酸甲酯;本发明的有益效果主要体现在:(1)生产菌株安全无毒,易于大规模培养;(2)可以获得大量的生物催化剂,成本低廉;(3)反应条件温和,环境友好;(4)操作简便,反应过程中不需要添加价格昂贵的辅酶;(5)易于实现大规模工业化生产,摩尔转化率高。

    乙酰乙酸乙酯微生物转化制备(S)-3-羟基丁酸乙酯的方法

    公开(公告)号:CN101824438A

    公开(公告)日:2010-09-08

    申请号:CN201010108617.7

    申请日:2010-02-09

    Abstract: 本发明提供了一种乙酰乙酸乙酯微生物转化制备(S)-3-羟基丁酸乙酯的方法,其特征在于所述方法是以乙酰乙酸乙酯为底物,以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2266发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂,进行转化反应制得所述(S)-3-羟基丁酸乙酯。本发明的有益效果主要体现在:①生物催化剂为微生物菌体,比化学催化剂成本低廉;②环境友好,反应条件温和,常温常压下即可顺利进行转化;③生产所用的菌株安全无毒;④不受季节影响,易于实现大规模工业化生产;⑤生产操作简便,生物转化率较高;⑥整个反应过程中不需要添加辅酶。

    酿酒酵母及在微生物转化制备(R)-(+)-β-羟基苯丙酸乙酯中的应用

    公开(公告)号:CN101709271A

    公开(公告)日:2010-05-19

    申请号:CN200910154777.2

    申请日:2009-12-07

    Abstract: 本发明提供了一株新菌株——酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC NO.3361,及其在微生物转化制备(R)-(+)-β-羟基苯丙酸乙酯中的应用。所述酿酒酵母保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区大屯路中科院微生物研究所,100101,保藏日期2009年10月23日,保藏编号CGMCC NO.3361。本发明微生物转化法制备(R)-(+)-β-羟基苯丙酸乙酯的有益效果主要体现在:①生物催化剂为微生物菌体,比化学催化剂成本低廉;②环境友好,反应条件温和,常温常压下即可顺利进行转化;③生产所用的菌株安全无毒;④不受季节影响,易于实现大规模工业化生产;⑤生产操作简便,生物转化率较高;⑥整个反应过程中不需要添加辅酶。

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