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公开(公告)号：CN102517294A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110402670.2
申请日：2011-12-07
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种基于Ipr1基因构建的巨噬细胞异性打靶载体和重组细胞，通过在Ipr1基因5′端连接MSR1启动子使Ipr1基因在牛的巨噬细胞中特异的高效表达；并进一步构建重组基因LA-MSR1-Ipr1-SA，使目的基因定点整合在牛28号染色体SP-A与MAT1A基因之间。构建了Ipr1巨噬细胞特异性打靶载体pLMIS，将其转染到新生牛耳成纤维细胞，通过G418和GCV正负筛选，构建转基因的新生牛耳成纤维细胞系，作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚；胚胎移植后，生产出定点插入Ipr1基因的转基因牛5头，其中4头存活，转基因牛对M.bovis有抗性。
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公开(公告)号：CN102321655A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110259942.8
申请日：2011-09-05
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种基于假attP位点整合的通用型表达载体及其构建方法和应用，该表达载体包括attB序列、pUC ori和多克隆位点MCS，CMV组成型启动子与attB序列相连接，CMV组成型启动子下游插入两个同向的LoxP元件，在LoxP元件下游设有第一荧光指示蛋白开放阅读框及其终止子，在两个LoxP元件之间设有第二荧光指示蛋白开放阅读框及其终止子和抗生素表达元件。该载体可应用于筛选稳定表达荧光标记蛋白的无抗生素筛选标记的重组细胞。
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公开(公告)号：CN101591672A
公开(公告)日：2009-12-02
申请号：CN200910022664.7
申请日：2009-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种包含hBD3乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞，包括一种hBD3乳腺特异性表达载体，包含目的基因hBD3，分别在hBD3基因的5′端和3′端插入调控元件；所述的hBD3乳腺特异性表达载体为pEBB表达载体。一种包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞，其宿主细胞为牛胎儿成纤维细胞，通过转染外源性表达载体pEBB，将目的基因hBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组。以包含目的基因hBD3的牛胎儿成纤维细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞，通过SCNT获得转基因克隆胚，将这些胚胎移入受体牛的子宫有望生产出转hBD3基因的奶牛。
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公开(公告)号：CN119157664A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411139275.3
申请日：2024-08-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/04
Abstract: 本申请涉及胚胎移植领域，尤其涉及一种胚胎移植管。包括管体，在所述管体的远端设置有针头部，所述针头部与管体可拆卸连接，所述针头部为能够进行穿刺的尖端；在所述管体的近端位置设置有注射部，所述注射部与管体可拆卸连接，在所述管体内部设置有棉芯部，所述棉芯部能够将管体内部的液体推顶到针头部；所述注射部用于推动棉芯部运动。增加了克隆胚胎附着的效率以及出生率。这样就提高了动物胚胎移植的效率，对于动物的保存以及优质资源的保护起到了很重要的作用。
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公开(公告)号：CN118995579A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411258111.2
申请日：2024-09-09
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种提高奶牛体外OPU性控胚胎生产效率的ICSI操作方法：用BO上浮法进行冻存性控精子的处理，并将上浮精子经离心后用IVF稀释；将处理好的性控精子注射到OPU供体卵母细胞中，先用5nM离子霉素激活处理2次，再用2nM6‑DMAP激活处理1次，然后进行胚胎培养。本发明使ICSI卵经激活后所产生胚胎的囊胚率明显提高，可以用于稳定生产高质量奶牛OPU性控胚胎。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118680722A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410739083.X
申请日：2024-06-07
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/04
Abstract: 本发明提出了一种奶牛的精细化卵巢刺激方法，该方法为：抽吸供体奶牛直径大于5mm的卵泡，抽吸卵泡24小时后，若供体奶牛的卵巢中存在黄体，则肌肉注射单剂量PGF2α，若不存在黄体，则不注射；然后再等待12小时后肌肉注射第1针FSH，随后每间隔12小时注射一次的FSH，共注射3次，注射剂量均为167国际单位；最后一次FSH注射完成后，等待24小时后实施活体采卵。同时，本发明精细化卵巢刺激方法的用时更短，获得的卵母细胞大小更为合适，有利于进行体外受精成功培养优质的胚胎，精细化卵巢刺激方法适用于奶牛产后主动停配期内实施活体采卵时，不妨碍供体奶牛的产奶，也不影响其繁殖计划，能带来更高的经济价值。
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公开(公告)号：CN114703293B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202210283316.0
申请日：2022-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛CRY1基因的InDel标记在繁殖性状早期选择中的应用。以待测奶牛全基因组DNA为模板，通过PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳，鉴定CRY1基因NC_037332.1:g.70335656‑70335661位InDel位点的基因型。根据CRY1基因InDel位点的不同基因型与卵巢相关性状的关联分析结果，确定了CRY1基因InDel位点的基因型可作为提高奶牛繁殖力的DNA标记。本发明通过快速、精准的检测与繁殖力密切相关的InDel标记，可快速建立奶牛优势遗传资源群体，从而加快奶牛繁殖性状的标记辅助选择育种进程。
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公开(公告)号：CN112941203B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202110304073.X
申请日：2021-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛ITGβ5基因插入/缺失突变的检测方法及其应用。以牛全基因组DNA为模板，通过PCR技术扩增牛ITGβ5基因部分片段，应用琼脂糖凝胶电泳鉴定个体ITGβ5基因13‑bp InDel多态性位点的基因型。根据性状关联分析结果，ITGβ5基因13‑bpInDel多态性位点的基因型与母牛的繁殖性状显著相关。因此，ITGβ5基因13‑bp InDel多态性位点可用于母牛繁殖性状的早期标记辅助选择，以加快建立遗传资源优良的牛群体。
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公开(公告)号：CN110042123B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN201910307633.X
申请日：2019-04-17
Abstract: 本发明公开了一种提高牛体细胞克隆效率的方法，通过诱导表达zfp57基因使牛克隆胚胎发育过程中的印迹基因甲基化恢复正常水平，从而提高牛体细胞克隆效率。本发明提供的一种提高牛体细胞克隆效率的方法，利用zfp57纠正牛克隆胚胎上异常的印迹基因低甲基化，使其甲基化水平到达和体外受精胚胎接近的水平，从而提高牛克隆胚胎的胚胎质量，促进牛克隆胚胎的发育；为阐明体细胞克隆胚胎重编程过程中甲基化印迹异常的机理以及体细胞克隆效率低下的原因提供理论依据。
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公开(公告)号：CN112941202B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202110304062.1
申请日：2021-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛SEPT7基因插入/缺失突变的检测方法及其应用。以牛全基因组DNA为模板，通过PCR扩增牛SEPT7基因部分片段，应用琼脂糖凝胶电泳鉴定个体SEPT7基因9‑bp插入突变的基因型。根据性状关联分析结果，SEPT7基因9‑bp插入突变位点的基因型与母牛的繁殖性状显著相关。因此，SEPT7基因9‑bp插入突变位点可用于母牛繁殖性状的早期标记辅助选择，以加快建立遗传资源优良的牛群体。
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