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公开(公告)号：CN116814691A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310808237.1
申请日：2023-07-04
Applicant: 西北农林科技大学 , 西宁市动物疫病预防控制中心(挂西宁市畜牧兽医站牌子)
Abstract: 本发明公开了提高epi‑BE4max介导GDF9基因靶位点编辑效率的方法。涉及细胞编辑技术领域。包括使用小分子化合物：NexturastatA与SB‑505124。本发明发现NexturastatA与SB‑505124小分子对GDF9基因G1与G4靶位点编辑效率具有促进作用，NexturastatA与SB‑505124小分子可提高藏绵羊成纤维细胞GDF9基因G1靶位点的编辑效率，其替换频率分别提高了48％与34％。NexturastatA与SB‑505124小分子可提高藏绵羊成纤维细胞GDF9基因G4靶位点的编辑效率，其替换频率分别提高了37％与36％。
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公开(公告)号：CN110042123A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910307633.X
申请日：2019-04-17
Abstract: 本发明公开了一种提高牛体细胞克隆效率的方法，通过诱导表达zfp57基因使牛克隆胚胎发育过程中的印迹基因甲基化恢复正常水平，从而提高牛体细胞克隆效率。本发明提供的一种提高牛体细胞克隆效率的方法，利用zfp57纠正牛克隆胚胎上异常的印迹基因低甲基化，使其甲基化水平到达和体外受精胚胎接近的水平，从而提高牛克隆胚胎的胚胎质量，促进牛克隆胚胎的发育；为阐明体细胞克隆胚胎重编程过程中甲基化印迹异常的机理以及体细胞克隆效率低下的原因提供理论依据。
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公开(公告)号：CN107988257B
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201711322629.8
申请日：2017-12-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12N13/00
Abstract: 本发明公开了一种基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞和方法。本发明提供的载体包括阻遏蛋白TetR表达载体和含有操纵基因TetO的双向表达载体，在融合前将两者共转染到供体细胞中。筛选阳性转染的细胞，药物诱导表达山羊TET3，将TET3诱导表达的阳性细胞作为最终供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的山羊体细胞克隆胚培养。本发明可以有效的降低供体细胞的甲基化水平，纠正克隆胚胎中的异常高甲基化现象，从而显著提高后期山羊体细胞克隆胚胎的发育率和质量，可以高效地体外生产山羊体细胞克隆胚胎，胚胎移植后的克隆山羊的出生率也显著提高。
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公开(公告)号：CN108611371A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810457000.2
申请日：2018-05-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N15/873 , C12N15/62 , A01K67/027 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/85 , A01K67/0278 , A01K2217/072 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61P31/14 , C07K14/005 , C07K2319/00 , C07K2319/21 , C12N9/22 , C12N15/62 , C12N15/65 , C12N15/873 , C12N15/907 , C12N2770/10022 , C12N2770/10034 , C12N2800/107 , C12N2800/30 , C12N2830/50
Abstract: 本发明公开了乳汁中表达GP5-M融合蛋白的羊乳腺生物反应器的制备方法，制备GP5-M融合表达的基因打靶载体，敲入奶山羊β-乳球蛋白第一外显子上，筛选中靶细胞，利用体细胞核移植技术制备转基因奶山羊，通过乳腺生物反应器生产含有GP5-M融合蛋白的乳汁，从乳汁中分离纯化GP5-M融合蛋白，添加佐剂制备基因工程亚单位疫苗，达到防控PRRS的目的。
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公开(公告)号：CN105524940A
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201511025413.6
申请日：2015-12-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
CPC classification number: C12N15/8509 , C12N15/8771
Abstract: 本发明公开了一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体、细胞及方法。本发明提供的载体包括阻遏物表达载体和含有阻遏操纵子的表达载体，在转染时将两者共转染到供体细胞中；所述的含有阻遏操纵子的表达载体中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。将阳性转染的细胞作为供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚培养至36h时，诱导表达牛KDM4B和KDM4C。本发明可以有效减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平，从而显著提高后期牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也显著提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103305551B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310232306.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法，将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后，在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平，选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞，可显著提高牛体细胞克隆效率。
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公开(公告)号：CN103305551A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310232306.5
申请日：2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法，将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后，在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平，选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞，可显著提高牛体细胞克隆效率。
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公开(公告)号：CN116814692A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310809894.8
申请日：2023-07-04
Applicant: 西北农林科技大学 , 西宁市动物疫病预防控制中心(挂西宁市畜牧兽医站牌子)
Abstract: 本发明公开了一种提高单碱基编辑器运用在藏绵羊成纤维细胞中的编辑效率的方法。属于细胞编辑技术领域。包括使用NexturastatA与RS‑1。本发明发现不同小分子对于编辑器蛋白表达水平与染色质状态的影响是复杂的，且小分子不同的作用特性会导致靶位点编辑效果存在差异，以及作用于不同细胞时这些小分子在编辑编辑过程中发挥的作用也大相径庭，具体的，NexturastatA与RS‑1小分子化合物可提高藏绵羊成纤维细胞FecB基因靶位点的编辑效率，其编辑效率分别提高了61％与39％。
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公开(公告)号：CN105524940B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201511025413.6
申请日：2015-12-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体、细胞及方法。本发明提供的载体包括阻遏物表达载体和含有阻遏操纵子的表达载体，在转染时将两者共转染到供体细胞中；所述的含有阻遏操纵子的表达载体中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。将阳性转染的细胞作为供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚培养至36h时，诱导表达牛KDM4B和KDM4C。本发明可以有效减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平，从而显著提高后期牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也显著提高。
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公开(公告)号：CN114196703B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202111581923.7
申请日：2021-12-22
Applicant: 西北农林科技大学 , 西宁市动物疫病预防控制中心(挂西宁市畜牧兽医站牌子)
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高牦牛克隆胚胎发育率的载体、细胞和方法，属于牦牛克隆胚胎技术领域。该载体为shRNA的真核表达载体，shRNA靶向CBX3基因，靶序列如SEQ ID NO.1所示：GGTCTTGATCCAGAACGAATA。通过该载体转染牦牛体细胞，获得阳性单克隆；利用阳性单克隆作为供体，进行核移植，构建克隆胚，可纠正牦牛克隆胚胎异常重编程，显著提高牦牛克隆胚胎体外发育率，为阐明牦牛克隆胚胎重编程机理提供材料基础及理论依据。
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