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公开(公告)号:CN103421782B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201210489304.X
申请日:2012-11-27
申请人: 华中农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85
摘要: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及到绵羊毛囊特异性表达启动子片段的分离克隆及表达模式鉴定。从绵羊基因组中分离克隆并鉴定出一个具有毛囊组织表达特异性的启动子,其核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP11.1p-GFP真核表达载体,并在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因。将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中,在个体水平上验证了该启动子的在哺乳动物体中具有表达活性和且表现为毛囊组织特异性,该启动子可用于进行动物产毛及毛发性能改良。
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公开(公告)号:CN103981267A
公开(公告)日:2014-08-13
申请号:CN201410218807.2
申请日:2014-05-21
申请人: 华中农业大学
CPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/158 , C12Q2600/166 , C12Q2600/178
摘要: 本发明属于本发明属于家畜分子标记制备与应用技术领域,具体涉及一种与猪肌内脂肪相关miRNA标志物及其特异引物的应用,所述的miRNA标志物基因是基于猪的microRNA-133a3p基因,利用该基因作为内参基因通过实时荧光定量PCR方法检测microRNA在猪肌内脂肪中的表达量的差异,结果显示本发明克隆制备的Ssc-miR133a3p基因的标志物的表达量高,稳定性强,重复性优于U6和18S rRNA基因的引物。
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公开(公告)号:CN103289993B
公开(公告)日:2014-07-02
申请号:CN201210051534.8
申请日:2012-03-01
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与初生重性状相关的分子标记及应用。所述的分子标记由AP3D1基因克隆得到,它的DNA序列如序列表SEQ?ID?NO:1和图2所述。在序列表SEQ?ID?NO:1的第234bp处有一个A234-G234的碱基突变,导致BsrBI-RFLP多态性。本发明还公开了扩增AP3D1基因第17内含子部分序列所用的引物以及用于多态性检测方法,为猪的标记辅助选择提供了一个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN102796738A
公开(公告)日:2012-11-28
申请号:CN201110137374.4
申请日:2011-05-21
申请人: 华中农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/66
摘要: 本发明属于动物基因工程应用领域。具体涉及猪雌激素诱导启动子及应用。从梅山猪中克隆Hoxa10基因DNA片段(其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示)及其上游4个不同启动子缺失片段,它们分别为HPro-1、HPro-2、HPro-3和HPro-4。将这些片段构建至pGL3-Basic载体中,经过雌激素(17Beta-estradiol)后确定HPro-3活性相对较强(其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:5所示)。将HPro-3片段与包含猪Hoxa10基因完整CDS区域的DNA片段插入pcDNA3.1(+)质粒,构建猪Hoxa10基因雌激素诱导启动子质粒pc3.1-Pro-DNA,在人子宫内膜癌细胞系中验证该启动子经雌激素诱导后可以增强猪Hoxa10基因表的表达。本发明同时公开了四个不同缺失启动子片段的获得、相应重组表达载体的制备方法,从而为雌激素诱导外源基因在子宫内膜组织中高效表达提供了新的遗传资源。
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公开(公告)号:CN101570789B
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN200910062622.6
申请日:2009-06-12
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择的与猪免疫性状相关的分子标记制备与应用。所述的分子标记以猪MHCIITA基因mRNA序列为模板设计引物,PCR扩增、PCR产物纯化测序,获得如序列表SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,在SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列中发现了9个单链核苷酸多态位点(SNP),并开发了PCR-PvuII-RFLP方法检测其位于第188bp处的分子标记即碱基突变C188-T188。本发明公开了扩增的猪MHCIITA基因部分编码区和非翻译区的序列以及PCR扩增所用的引物和用于分子标记的检测方法。
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公开(公告)号:CN101418298B
公开(公告)日:2011-05-04
申请号:CN200810197444.3
申请日:2008-10-30
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪分子标记的与猪胴体性状相关的MuRF2基因片段的克隆及应用。所述的分子标记由猪MuRF2基因克隆得到,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示,在序列表SEQ ID NO:1的第112位碱基处有一个A112-G112的碱基突变,导致HinfI-RFLP多态性。本发明还公开了获得上述分子标记的制备方法和多态性检测的应用,为猪的标记辅助选择的关联分析提供了一个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN101570789A
公开(公告)日:2009-11-04
申请号:CN200910062622.6
申请日:2009-06-12
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择的与猪免疫性状相关的分子标记制备与应用。所述的分子标记以猪MHCIITA基因mRNA序列为模板设计引物,PCR扩增、PCR产物纯化测序,获得如序列表SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,在SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列中发现了9个单链核苷酸多态位点(SNP),并开发了PCR-PvuII-RFLP方法检测其位于第188bp处的分子标记即碱基突变C188-T188。本发明公开了扩增的猪MHCIITA基因部分编码区和非翻译区的序列以及PCR扩增所用的引物和用于分子标记的检测方法。
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公开(公告)号:CN101434998A
公开(公告)日:2009-05-20
申请号:CN200810236962.1
申请日:2008-12-23
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜基因工程技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与免疫和繁殖性状相关的分子标记及应用。所述的分子标记由ISG15基因克隆得到,它的cDNA序列如序列表SEQ ID NO:1所述。在序列表SEQ ID NO:1的第390bp处有一个A390-G390的碱基突变,导致HindIII-RFLP多态性。本发明还公开了HindIII-RFLP多态性所用的引物以及用于多态性检测方法,为猪的标记辅助选择提供了一个新的分子标记。
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公开(公告)号:CN101215565A
公开(公告)日:2008-07-09
申请号:CN200810046675.4
申请日:2008-01-11
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于家畜基因工程技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与免疫性状相关的分子标记及应用。所述的分子标记由BCL10基因克隆得到,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。序列表SEQ ID NO:2所示序列的第144位碱基处有一个C144-T144的碱基突变,导致RFLP-HinP1I多态性。本发明还公开了获得上述分子标记的制备方法和多态性检测方法的应用,为猪的标记辅助选择提供了一个新的分子标记。
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