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公开(公告)号：CN103642806A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310637747.3
申请日：2013-12-02
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/63 , C12Q1/68
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及到绵羊毛囊特异表达基因的启动子的分离及鉴定。从绵羊基因组中分离并鉴定出一段具有毛囊组织表达特异性基因的上游调控序列，即启动子区片段，该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP13.1p-GFP真核表达载体，在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因，并将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中。在分子水平和个体水平上对该启动子在毛囊表达的特异性进行了鉴定，为验证启动子的特异性提供了可靠的方法，也为应用基因工程技术改良羊毛品质提供了重要的功能元件。
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公开(公告)号：CN103421782B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201210489304.X
申请日：2012-11-27
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及到绵羊毛囊特异性表达启动子片段的分离克隆及表达模式鉴定。从绵羊基因组中分离克隆并鉴定出一个具有毛囊组织表达特异性的启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP11.1p-GFP真核表达载体，并在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因。将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中，在个体水平上验证了该启动子的在哺乳动物体中具有表达活性和且表现为毛囊组织特异性，该启动子可用于进行动物产毛及毛发性能改良。
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公开(公告)号：CN103642806B
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201310637747.3
申请日：2013-12-02
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/63 , C12Q1/68
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及到绵羊毛囊特异表达基因的启动子的分离及鉴定。从绵羊基因组中分离并鉴定出一段具有毛囊组织表达特异性基因的上游调控序列，即启动子区片段，该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP13.1p-GFP真核表达载体，在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因，并将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中。在分子水平和个体水平上对该启动子在毛囊表达的特异性进行了鉴定，为验证启动子的特异性提供了可靠的方法，也为应用基因工程技术改良羊毛品质提供了重要的功能元件。
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公开(公告)号：CN103421782A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210489304.X
申请日：2012-11-27
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85
摘要： 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及到绵羊毛囊特异性表达启动子片段的分离克隆及表达模式鉴定。从绵羊基因组中分离克隆并鉴定出一个具有毛囊组织表达特异性的启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP11.1p-GFP真核表达载体，并在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因。将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中，在个体水平上验证了该启动子的在哺乳动物体中具有表达活性和且表现为毛囊组织特异性，该启动子可用于进行动物产毛及毛发性能改良。
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公开(公告)号：CN103243085A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201210023764.3
申请日：2012-02-03
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 本发明属于RNA制备技术领域，具体涉及一种从绵羊毛囊组织提取总RNA的方法。其特征包括，从野外现场采集绵羊毛囊，样品低温运输、保存和RNA提取步骤得到毛囊总RNA。本发明提取毛囊总RNA，不会被外源或内源RNA酶降解到最低限度，能最大限度地保持被提取的总RNA的纯度，以利于后续试验的利用。本发明操作简单方便，成本低，无需液氮和RNA样品保护液。本发明获得的毛囊组织总RNA纯度高、完整度好，可用于反转录cDNA、PCR、QPCR等下游操作及mRNA与microRNA的检测应用。
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