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公开(公告)号:CN115747113B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202211503873.5
申请日:2022-11-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种分离培养羊种布鲁氏菌的方法。该方法涉及选择性双相培养瓶或选择性需氧血培养瓶,组分包括酪蛋白胰酶消化物、大豆木瓜蛋白酶水解物、氯化钠、葡萄糖、磷酸氢二钾、聚茴香脑磺酸钠、盐酸吡哆醇、复合维生素、琼脂、红霉素、氨苄青霉素钠等。本发明通过选择性双相培养瓶和选择性需氧血培养瓶,选择性培养疑似布鲁氏菌菌落的羊种布鲁氏菌,能够肉眼鉴别我国常见的布鲁氏菌菌种,操作简单,无需较高的专业技能,通过观察菌落的有无即可判断是否为羊种布鲁氏菌感染,可应用于布鲁氏菌种型初步鉴定及相关研究等。
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公开(公告)号:CN117482219A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311651974.1
申请日:2023-12-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了一种球虫病基因工程活疫苗及其构建方法与应用。其中构建方法为将孢子生殖阶段的特异性基因、转录调控基因、高表达基因进行分析与挖掘,构建基因缺失虫株,分析其孢子生殖的效率,筛选相关靶基因及组合;将靶基因利用CRISPR/Cas9技术通过加标签的方式将DDD序列插入至靶基因的3’端,孢子生殖过程中加入DDD功能域的稳定剂,通过传代筛选,获得基因编辑的球虫卵囊,即为基因工程活疫苗虫株。本发明提供的基因工程活疫苗可以减少或杜绝疫苗子代卵囊对动物产生的副作用,具有极高的安全性与免疫效力,具备良好的经济效益、社会效益和广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN115737795B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202211650862.X
申请日:2022-12-21
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 , 北京马克泰维生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡滑液囊支原体活疫苗及其效力检验方法。其中鸡滑液囊支原体活疫苗使用鸡滑液囊支原体弱毒菌株BOR21株经培养后,加入冻干保护剂后分装冻干而成,用于预防鸡滑液囊支原体感染。本发明生产用菌种为鸡滑液囊支原体弱毒疫苗BOR21株,检验用菌种为鸡滑液囊支原体强毒BHQ03株,免疫方法采用的是颈部皮下或肌肉注射的接种途径,效力检验方法中包含了一种本动物翅下静脉注射的攻毒方式及发病评价方法,试验结果一致性更好,并能以最直接的方式测定该疫苗免疫保护效力。本发明提供的鸡滑液囊支原体活疫苗国内尚没有同类活疫苗的注册和生产,产品的市场需求巨大,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN115541887A
公开(公告)日:2022-12-30
申请号:CN202210919546.1
申请日:2022-08-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种检测牛布鲁氏菌病特异性IgG和IgM含量的方法及应用。所述该检测方法由布病间接ELISA(iELISA)和竞争ELISA(cELISA)方法组成。采用布病阳性血清国家标准品(牛源,含量1000IU/mL)对布病iELISA和cELISA方法的检测灵敏度进行定量,使两种方法的检测灵敏度与布病补体结合试验(CFT)检测灵敏度一致,并最终以血清中牛布鲁氏菌病特异性抗体IgG和IgM含量不低于50IU/mL作为阳性临界值判定标准。该方法对同一份牛血清分别用布病iELISA和cELISA检测,可准确将待检牛分为布病阴性牛、布病可疑牛和布病阳性牛,为实施布病净化提供便捷有效的方法。
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公开(公告)号:CN115327100A
公开(公告)日:2022-11-11
申请号:CN202210969928.5
申请日:2022-08-12
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/531 , C12N1/20 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/35
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体平板凝集抗原及其制备方法与应用。牛支原体平板凝集抗原使用牛支原体XBY01株制成,制备方法为将牛支原体XBY01株传代后制成种子菌液,再接种牛支原体培养基中扩大培养,收获,经活菌计数后,离心收获菌泥,加入1/10倍体积的含0.01%硫柳汞的PBS重悬灭活,按活菌计数结果调整抗原体积,加入终浓度0.03%的结晶紫溶液染色和菌液体积10%的甘油,混匀后分装保存。本发明制备的牛支原体平板凝集抗原,具有较高的敏感性和特异性,操作简单,结果易观察等优点,适合于牧场的牛支原体感染的快速筛查和检测。发明的工艺简单、成本低、稳定性好,适合于规模化生产和应用。
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公开(公告)号:CN115166239A
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202210920913.X
申请日:2022-08-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/58 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种牛布鲁氏菌病初筛和确诊一体化抗体检测试纸条。所述该试纸条由初筛试纸条(试纸条1)和确诊试纸条(试纸条2)组成,均分别由PVC底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。所述初筛试纸条和确诊试纸条的样品垫相连接,连接处设置有加样孔。使用时,取待检血清滴入加样孔,根据初筛试纸条和确诊试纸条呈现的结果,可现场快速对待检样本做出布病阴性、阳性或可疑的判定。
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公开(公告)号:CN119162115B
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202411373701.X
申请日:2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/12 , C07K14/32 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌的LF蛋白单克隆抗体细胞株制备、单抗筛选、抗体检测试剂盒及其应用,所述LF蛋白的核酸序列如SEQ ID No.1所示,氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,所述LF蛋白单克隆细胞株LF‑mAb于2024年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC No.45833。本发明采用枯草芽孢杆菌表达系统制备了具有生物学活性的可溶性rLF蛋白,通过免疫小鼠、克隆筛选,获得了特异性单克隆抗体LF‑mAb并进行HRP标记,以rLF蛋白为包被抗原,HRP标记特异性单克隆抗体为检测抗体,建立了炭疽阻断ELISA抗体检测方法。
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公开(公告)号:CN118841184A
公开(公告)日:2024-10-25
申请号:CN202410955114.5
申请日:2024-07-17
Applicant: 广东南星数字科技有限公司 , 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基于SIR模型的动物布鲁氏菌病免疫效果评价方法、存储介质及装置,根据全国、辖区或者养殖场内客观的临床等参数量化评估布病免疫的效果,该方法能客观、量化地评价动物布病免疫疫苗后防控效果,为地方政府制定布病防控策略和防控措施提供有益的重要参考。避免了对传播效果评价的主观性,结合疾病传播模型与微分方程模型,丰富了评估布病传播的研究方法,具有很强的实用性。
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公开(公告)号:CN118580997A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410683199.6
申请日:2024-05-30
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌LT毒素制备方法及应用,通过将炭疽杆菌PA基因克隆入pColdTF,构建了pCold‑TF‑rPA质粒,转化至大肠杆菌表达株BL21得到rPA蛋白;通过将炭疽杆菌LF基因克隆入pColdII,构建了pColdⅡ‑rLF质粒,转化至大肠杆菌表达株BL21得到rLF蛋白,将rPA蛋白与胰蛋白酶在室温下孵育30min得到rPA(T)蛋白;将rPA(T)蛋白与rLF蛋白按照浓度比1:3(100ng:300ng)混合得到炭疽杆菌LT毒素。本发明采用冷表达系统对全长PA和全长LF进行制备后得到高活性LT毒素,通过加入免疫后血清,通过抑制LT毒性的方式,评价疫苗免疫后的效价。
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公开(公告)号:CN117467781B
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202311499883.0
申请日:2023-11-13
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于细菌检测技术领域,具体涉及一种与布鲁氏菌复方新诺明耐药性相关的SNP标记、PCR引物对和探针对、试剂盒及其应用。与布鲁氏菌复方新诺明耐药性相关的SNP标记,该SNP标记为碱基多态性位点A/G,所述SNP标记位于布鲁氏菌染色体1的2014308位点(以公布的基因组GCF_000022625.1为参考基因组)。基于检测该SNP标记的PCR引物对和MGB探针,可以快速、直观的鉴别临床样品中是否含有耐复方新诺明的布鲁氏菌,有利于快速检测布病临床检测、流调过程中耐药菌,有助于推进我国布病防控,甚至净化的进程,且稳定性好。
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