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公开(公告)号：CN119162115B
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202411373701.X
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/12 , C07K14/32 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌的LF蛋白单克隆抗体细胞株制备、单抗筛选、抗体检测试剂盒及其应用，所述LF蛋白的核酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述LF蛋白单克隆细胞株LF‑mAb于2024年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45833。本发明采用枯草芽孢杆菌表达系统制备了具有生物学活性的可溶性rLF蛋白，通过免疫小鼠、克隆筛选，获得了特异性单克隆抗体LF‑mAb并进行HRP标记，以rLF蛋白为包被抗原，HRP标记特异性单克隆抗体为检测抗体，建立了炭疽阻断ELISA抗体检测方法。
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公开(公告)号：CN118580997A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410683199.6
申请日：2024-05-30
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌LT毒素制备方法及应用，通过将炭疽杆菌PA基因克隆入pColdTF，构建了pCold‑TF‑rPA质粒，转化至大肠杆菌表达株BL21得到rPA蛋白；通过将炭疽杆菌LF基因克隆入pColdII，构建了pColdⅡ‑rLF质粒，转化至大肠杆菌表达株BL21得到rLF蛋白，将rPA蛋白与胰蛋白酶在室温下孵育30min得到rPA(T)蛋白；将rPA(T)蛋白与rLF蛋白按照浓度比1：3（100ng：300ng）混合得到炭疽杆菌LT毒素。本发明采用冷表达系统对全长PA和全长LF进行制备后得到高活性LT毒素，通过加入免疫后血清，通过抑制LT毒性的方式，评价疫苗免疫后的效价。
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公开(公告)号：CN119570705A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411783908.4
申请日：2024-12-06
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/535 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于rCD46和rE2单抗的BVDV抗原捕获ELISA的方法及其试剂盒，表达菌种于2024年7月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO：31440；所述单抗杂交瘤细胞株E2mAb株于2024年10月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.46055。本发明以BVDV受体rCD46蛋白为包被抗原，HRP标记特异性rE2单抗为检测抗体，通过条件优化，建立了BVDV抗原捕获ELISA检测方法，国内率先组装了基于受体rCD46和BVDV rE2单抗的BVDV抗原捕获ELISA检测试剂盒。
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公开(公告)号：CN119162115A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411373701.X
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/12 , C07K14/32 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种炭疽杆菌的LF蛋白单克隆抗体细胞株制备、单抗筛选、抗体检测试剂盒及其应用，所述LF蛋白的核酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述LF蛋白单克隆细胞株LF‑mAb于2024年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45833。本发明采用枯草芽孢杆菌表达系统制备了具有生物学活性的可溶性rLF蛋白，通过免疫小鼠、克隆筛选，获得了特异性单克隆抗体LF‑mAb并进行HRP标记，以rLF蛋白为包被抗原，HRP标记特异性单克隆抗体为检测抗体，建立了炭疽阻断ELISA抗体检测方法。
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