一种罗丹明BELISA检测方法

    公开(公告)号:CN103197061A

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201310077177.7

    申请日:2013-03-12

    Abstract: 本发明公开了一种罗丹明BELISA检测方法。所述方法是采用新合成的人工抗原和抗体组合建立的。所述的罗丹明B人工抗原是将罗丹明B或罗丹明B异硫氰酸酯与BSA或OVA偶联获得特异性、灵敏性较好的人工抗原,免疫获得抗体,基于获得的人工抗原和抗体筛选灵敏性和特异性最优的组合建立罗丹明BELISA检测方法,通过该组合建立的ELISA检测方法可更好地应用于快速检测食品中非法添加的罗丹明B,具有广阔的应用前景。

    一种亲和力成熟的抗对硫磷纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN119431595A

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202411460335.1

    申请日:2024-10-18

    Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗对硫磷纳米抗体及其应用。本发明在抗对硫磷纳米抗体Nb9的基础上进行突变,获得一种对对硫磷亲和力更高的纳米抗体突变体H6,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,该纳米抗体能够特异性识别对硫磷农药,相比纳米抗体Nb9灵敏度提高2.9倍,最低检测限降低2.6倍;同时也比鉴定得到的其他阳性突变体的灵敏度更好,其热稳定性及对有机溶剂的耐受性得到了提升。进一步将其用于检测对硫磷农药,其检测的IC50为3.55ng/mL,最低检测限为1.30ng/mL,线性范围为1.89‑6.67ng/mL,其检测结果准确、稳定性好,可以更加广泛的应用于农产品中对硫磷农药残留的检测。

    一种基于纳米抗体的对硫磷农药胶体金标记物及其应用

    公开(公告)号:CN114675015B

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202210357010.5

    申请日:2022-04-06

    Abstract: 本发提供一种基于纳米抗体的对硫磷农药胶体金标记物及其应用。本发明首次开发采用对硫磷纳米抗体与胶体金进行结合,制备对硫磷纳米抗体‑胶体金标记物,用于对硫磷农药的检测。采用对硫磷纳米抗体‑胶体金标记物进行检测稳定性好,灵敏度高;用其制备成对硫磷农药的纳米抗体胶体金试纸条,具有灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、易于储存、保质期长的优点。本发明提供的试纸条对对硫磷农药残留检测的灵敏度达到0.0013~0.085mg/kg,检测限为0.00069mg/kg,能用于蔬菜、水果等农产品中的对硫磷农药的快速检测,该方法简便、快速、直观、准确、适用范围广、成本低、易推广使用。

    CRISPR-免疫联合小分子检测探针制备及检测方法

    公开(公告)号:CN119199128A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411207221.6

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明具体涉及了一种CRISPR‑免疫联合小分子检测探针制备及其相关检测方法和用途。探针制备主要采用一种化学生物偶联方法,用双功能交联剂4‑(N‑马来酰亚胺甲基)环己烷‑1‑羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(Sulfo‑SMCC)和N‑琥珀酰亚胺基‑S‑乙酰硫基乙酸酯(SATA),将5’端修饰‑NH2的dsDNA和单克隆抗体共价偶联制备成dsDNA‑抗体探针。其次,本检测方法以dsDNA‑抗体探针作为桥梁将免疫系统和CRISPR/Cas12a系统结合,利用抗体对小分子的特异性识别能力,并借助RPA核酸扩增进行信号放大及CRISPR/Cas12a的顺式切割活性和/或反式单链DNA切割活性产生荧光信号,实现免疫反应信号向高强度荧光信号的转变,建立了CRISPR‑免疫联合小分子检测体系。所述检测方法操作简单、特异性强、灵敏度极高且信号稳定等优点。

    一种基于RPA-CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性靶标、引物和检测体系及方法

    公开(公告)号:CN118957112A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411143529.9

    申请日:2024-08-20

    Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性毒力基因靶标、引物和检测体系及方法。本发明所述靶标序列、RPA引物和crRNA具有良好的特异性,所构建的检测方法对其它亚种无特异性识别反应,检测结果准确可靠。此外,本发明所述检测方法结合煮沸法或试剂盒提取样品DNA,在不进行菌体富集的前提下,对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)基因组DNA的检测灵敏度为10‑4 ng/μL,菌液灵敏度为1.52 CFU/mL。对于椰汁、大米粉和糯米粉进行添标检测,样本检出限均达到100 CFU/mL,样本前处理简单,操作便捷,灵敏度高,可靠性高,适用于相关监管部门对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的现场快速检测。

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