公开(公告)号：CN119555926A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411494102.3

申请日：2024-10-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  杨湧 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  徐振林

IPC: G01N33/53 ,  B01J20/281 ,  B01J20/30 ,  B01D15/22 ,  B01D15/38 ,  G01N33/531 ,  G01N33/543 ,  C07K16/14

Abstract: 本发明公开了一种抗异细交链孢菌酮酸纳米抗体免疫吸附剂和免疫亲和柱的制备与应用。本发明提供的免疫吸附剂包括含有蛋白质交联剂的固相载体，以及与固相载体进行定向偶联的、在C端带有半胱氨酸标签的抗异细交链孢菌酮酸纳米抗体。将纳米抗体与半胱氨酸标签进行融合表达，实现与固相载体的定向偶联，克服了传统偶联存在的抗原结合位点占用问题，提高其吸附能力，所制备的免疫亲和柱的柱含量达905.06ng，较非定向偶联的免疫亲和柱的柱吸附量提高202.40ng，重复使用次数也有提高。同时，将其与质谱联用检测异细交链孢菌酮酸具有良好的准确度和精密度，其检测限和定量限更低，不仅简化样品前处理过程，还降低了检测成本。

公开(公告)号：CN114507288B

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202210271305.0

申请日：2022-03-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李家冬 ,  吴广培 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  肖治理 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟，获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药，相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18％，最低检测限降低了25％；将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中，其IC50为18.62ng/mL，最低检测限为1.93ng/mL，线性范围为5.14‑67.45ng/mL，该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好，可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

公开(公告)号：CN114563563A

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN202210225703.9

申请日：2022-03-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  龚馨梦 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  毛志成 ,  李露

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种金刚烷胺免疫磁珠及其制备方法与应用。本发明的免疫磁珠能特异性富集金刚烷胺，在短时间内迅速、有选择地将样品中的金刚烷胺富集与纯化；并且可以避免有机溶剂的大量使用，绿色环保；还能有效地减少样品中其他杂质的干扰，提高了检测的准确性和精准性；与胶体金结合检测金刚烷胺的过程中，检测的灵敏度高，精密性好，大大降低了最低检测限，且操作简便，成本低，可广泛应用于饲料、肉制品、动物组织中金刚烷胺的纯化、富集与分离，符合市场需求，对食品中金刚烷胺的安全检测和初筛具有重要的意义。

公开(公告)号：CN114539171A

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202111679806.4

申请日：2021-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  沈玉栋 ,  贺颖 ,  王弘 ,  徐振林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D241/44 ,  C07K14/79 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K1/107 ,  C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种含有3‑甲基‑喹恶啉‑2‑羧酸(MQCA)、金刚烷胺(AMD)及氯霉素胺(CAPA)特征骨架结构的MAC型多簇串联线性半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。该半抗原是将3‑甲基‑喹恶啉‑2‑羧酸、金刚烷胺和氯霉素胺3种药物骨架结构分别采用不同长短的氨基烷基羧酸和烷基二酸依次连接形成多簇串联线性半抗原，并将该半抗原偶联载体蛋白制备获得人工抗原。采用该人工抗原获得的多抗血清效价在8～16K之间，对半抗原MAC‑4C和MAC‑6C抑制率在51～85％之间，表明本发明制备的多簇串联线性半抗原及其人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于后续制备单克隆抗体、单链抗体和纳米抗体。

公开(公告)号：CN112500490B

公开(公告)日：2022-05-03

申请号：CN202011097526.8

申请日：2020-10-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈兴 ,  鲍虹蕾 ,  雷红涛 ,  甘庆庆 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C07K1/22 ,  C07K1/16 ,  C07K1/14 ,  C12P21/06 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段，所述F(ab)2片段具有通过二硫键连接在一起的两个Fab部分，每个Fab部分包含轻链和重链Fd部分，所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述重链Fd部分如SEQ ID NO:4所示。本发明通过胃蛋白酶酶解，采用两步纯化法纯化酶解产物，首次获得抗左旋氧氟沙星抗体F(ab)2。本发明方法流程简洁，操作简单，高产出，所述抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.33ng/mL，检测限为0.04ng/mL，检测范围为0.05～2.15ng/mL，具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN114315835A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111452370.5

申请日：2021-11-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  全琦琪 ,  潘康亮 ,  关甜 ,  王锦 ,  方亚琳 ,  李向梅 ,  沈兴 ,  徐振林 ,  杨金易

IPC: C07D473/34 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K14/795 ,  C07K16/06 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明提供了一种6‑苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备和应用，本发明制备得到了一种6‑苯甲基腺嘌半抗原6‑BA‑2C，应用半抗原6‑BA‑2C偶联载体蛋白BSA得到人工抗原6‑BA‑2C‑BSA，并进一步制备得到用于检测6‑苯甲基腺嘌呤的特异性抗体，应用人工抗原6‑BA‑2C‑OVA作为包被原，该抗体对6‑苯甲基腺嘌呤具有良好的灵敏度和特异性，半抑制浓度为1.18μg/Kg，最低检测限为0.056μg/Kg，定量检测范围为0.17～61.04μg/Kg，对玉米素、反玉米素、N6‑苯甲酰基腺嘌呤均无交叉反应，利用本发明的抗体建立了特异性和灵敏度更高的6‑苯甲基腺嘌呤的免疫分析方法。

公开(公告)号：CN113354600A

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110236737.3

申请日：2021-03-03

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  陈浩宇 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D295/185 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K14/795 ,  C07K14/42 ,  C07K1/107 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种烯酰吗啉半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。所述烯酰吗啉半抗原的结构式如式I所示；再以此为基础制备烯酰吗啉人工抗原和抗体，并建立了一种基于抗体的检测烯酰吗啉的免疫分析方法，对烯酰吗啉的最低检测限为1.43ng/mL，IC50为4.34ng/mL，线性范围为2.17～8.69ng/mL，表明本发明制备的人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于后续制备烯酰吗啉多克隆抗体、单链抗体和纳米抗体并建立相对应免疫分析法，在烯酰吗啉检测中具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN108218992B

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN201711482207.7

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  陈子键 ,  王弘 ,  沈玉栋 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  杨金易 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/70 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种直接识别3‑氨基‑5‑吗啉甲基‑2‑恶唑烷酮（AMOZ）的单链抗体（scFv）及其制备方法和应用。所述单链抗体包括重链可变区和轻链可变区，其序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，或与所示序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸但与所示序列具有相同功能的氨基酸序列。本发明提供的单链抗体scFv与抗原的结合可被游离的半抗原竞争性抑制，IC50为72.93ng/mL，检测限为13.35ng/mL，具有很好的抗原结合活性；通过标准曲线可知线性检测范围分别在24.98～212.92ng/mL之间。该基因工程抗体在AMOZ的免疫检测和大量样品的快速检测筛选方面具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN110407732B

公开(公告)日：2021-05-25

申请号：CN201910616806.6

申请日：2019-07-09

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  王锋 ,  沈玉栋 ,  肖治理 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D207/38 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/64 ,  G01N33/535 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种直接针对异细交链孢菌酮酸的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用，一种异细交链孢菌酮酸的半抗原，具有如式(I)所示的结构：其中n＝1～6。本发明进一步通过将半抗原偶联到载体蛋白上，成功制备得到2种人工抗原，将其中一种异细交链孢菌酮酸人工抗原作为免疫原，免疫动物获得直接针对异细交链孢菌酮酸的高特异性抗体，效价为1:128000；建立了一种能够直接检测异细交链孢菌酮酸的酶联免疫分析方法；该方法具有简便快速、特异性强、灵敏度较高的特点，对异细交链孢菌酮酸的检测限为0.3ng/mL，半数抑制浓度为8.3ng/mL，线性范围为0.9～73.1ng/mL。

公开(公告)号：CN112666325A

公开(公告)日：2021-04-16

申请号：CN202011322207.2

申请日：2020-11-23

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李盛楠 ,  孙琳媛 ,  陈元佳 ,  孙远明 ,  雷红涛 ,  杨金易 ,  吴青

IPC: G01N33/12 ,  G01N33/00 ,  G06F40/216 ,  G06K9/62

Abstract: 一种鸡肉品质感官评价模型的构建方法，包括以下步骤：S1、建立多项反映鸡肉感官属性的鸡肉感官指标及感官指标评分体系；S2、对条件不同组别鸡进行感官指标的评分，并筛选随条件变化而差异显著的感官指标作为主要感官指标；S3、基于步骤S2中的评分对主要感官指标进行主成分分析，确认主成分并筛选主成分下基本反映对应主成分整体所代表感官属性的指标作为感官核心因子指标，将感官核心因子指标用于建立感官评价模型；S4、利用层次分析法进行感官核心因子指标的权重分配，并获得用于获取鸡肉食用品质的感官评价模型。从感官方面分析鸡肉品质，能实现系统的鸡肉品质的定性评价，便于提高鸡肉品质，提高鸡肉食用感官体验。