一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法

    公开(公告)号:CN114702592B

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202210271306.5

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库,并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对喹硫磷农药的纳米抗体,该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够识别喹硫磷农药,对其他有机磷类农药交叉反应率低;具有较高的热稳定性、有机耐受性。本发明提供的酶联免疫分析方法,最低检测限为2.57ng/mL,线性范围为5.84‑88.34ng/mL,检测结果准确、稳定性好,可以广泛的应用于农产品中喹硫磷农药残留的检测。

    一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法

    公开(公告)号:CN114702592A

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202210271306.5

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种识别喹硫磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库,并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对喹硫磷农药的纳米抗体,该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够识别喹硫磷农药,对其他有机磷类农药交叉反应率低;具有较高的热稳定性、有机耐受性。本发明提供的酶联免疫分析方法,最低检测限为2.57ng/mL,线性范围为5.84‑88.34ng/mL,检测结果准确、稳定性好,可以广泛的应用于农产品中喹硫磷农药残留的检测。

    一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN114507288A

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN202210271305.0

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟,获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药,相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18%,最低检测限降低了25%;将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中,其IC50为18.62ng/mL,最低检测限为1.93ng/mL,线性范围为5.14‑67.45ng/mL,该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好,可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

    明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶保护剂的应用

    公开(公告)号:CN111593041B

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN202010152073.8

    申请日:2020-03-06

    Abstract: 本发明公开了明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶保护剂的应用,本发明利用明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶的保护剂,其能够很好的保持重组家蚕乙酰胆碱酯酶的酶活,利用其制备了纯高稳定性的重组家蚕乙酰胆碱酯酶液体制剂和冻干粉制剂,其储存稳定性显著优于无保护剂的酶制剂。该两种含有保护剂的酶制剂对于重组家蚕乙酰胆碱酯酶在酶法检测农药残留的实际应用具有重大意义和推广价值。

    一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN114507288B

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202210271305.0

    申请日:2022-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟,获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药,相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18%,最低检测限降低了25%;将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中,其IC50为18.62ng/mL,最低检测限为1.93ng/mL,线性范围为5.14‑67.45ng/mL,该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好,可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。

    明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶保护剂的应用

    公开(公告)号:CN111593041A

    公开(公告)日:2020-08-28

    申请号:CN202010152073.8

    申请日:2020-03-06

    Abstract: 本发明公开了明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶保护剂的应用,本发明利用明胶作为重组家蚕乙酰胆碱酯酶的保护剂,其能够很好的保持重组家蚕乙酰胆碱酯酶的酶活,利用其制备了纯高稳定性的重组家蚕乙酰胆碱酯酶液体制剂和冻干粉制剂,其储存稳定性显著优于无保护剂的酶制剂。该两种含有保护剂的酶制剂对于重组家蚕乙酰胆碱酯酶在酶法检测农药残留的实际应用具有重大意义和推广价值。

    一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN111381032A

    公开(公告)日:2020-07-07

    申请号:CN202010152062.X

    申请日:2020-03-06

    Abstract: 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒。本发明将编码COE蛋白的基因克隆至真核表达载体pPIC9K中后,转化入毕赤酵母GS115感受态细胞进行诱导表达,成功表达得到了重组猪流行性腹泻病毒COE蛋白。该COE蛋白的纯化生产工艺较原核表达包涵体抗原简便易行,且COE蛋白的表达量高、纯度高,更接近病毒蛋白天然结构;利用该COE蛋白作为包被抗原,成功构建了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒,该方法及其试剂盒的检测结果准确度高、特异性强、敏感性高、重复性好,且该试剂盒所需要的样品量少,操作简便快捷,成本低;因此,该方法及其试剂盒在检测猪流行性腹泻病毒抗体中具有广泛的应用前景。

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