公开(公告)号：CN111381032A

公开(公告)日：2020-07-07

申请号：CN202010152062.X

申请日：2020-03-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  李莉萍 ,  杨金易 ,  肖治理 ,  苏晓娜 ,  李家冬

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/50 ,  C12N15/81 ,  C07K14/165

Abstract: 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒。本发明将编码COE蛋白的基因克隆至真核表达载体pPIC9K中后，转化入毕赤酵母GS115感受态细胞进行诱导表达，成功表达得到了重组猪流行性腹泻病毒COE蛋白。该COE蛋白的纯化生产工艺较原核表达包涵体抗原简便易行，且COE蛋白的表达量高、纯度高，更接近病毒蛋白天然结构；利用该COE蛋白作为包被抗原，成功构建了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒，该方法及其试剂盒的检测结果准确度高、特异性强、敏感性高、重复性好，且该试剂盒所需要的样品量少，操作简便快捷，成本低；因此，该方法及其试剂盒在检测猪流行性腹泻病毒抗体中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN111825759B

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN202010462243.2

申请日：2020-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖治理 ,  李莉萍 ,  田巍 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  罗林 ,  柳心梅 ,  谢波

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种间接检测甲基嘧啶磷的酶联免疫吸附分析方法，以牛血清白蛋白偶联2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇的人工抗原为免疫原，以鸡卵清白蛋白偶联2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇的人工抗原为包被原。以人工免疫原免疫试验动物，使其机体产生特异性针对甲基嘧啶磷水解产物的抗体，所述抗体可以特异性识别甲基嘧啶磷水解产物‑‑2‑二乙基氨基‑6‑甲基‑4‑嘧啶醇，用于农药原药水解后间接检测食品中甲基嘧啶磷的含量。该方法检测限为3.2ng/mL，半抑制浓度(IC50)为23.42ng/mL，线性检测范围为6.09～90.07ng/mL，曲线相关系数为0.9996。本发明方法特异性强，灵敏度高，简便快捷，在食品中甲基嘧啶磷残留检测方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN111825759A

公开(公告)日：2020-10-27

申请号：CN202010462243.2

申请日：2020-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖治理 ,  李莉萍 ,  田巍 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  罗林 ,  柳心梅 ,  谢波

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种间接检测甲基嘧啶磷的酶联免疫吸附分析方法，以牛血清白蛋白偶联2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇的人工抗原为免疫原，以鸡卵清白蛋白偶联2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇的人工抗原为包被原。以人工免疫原免疫试验动物，使其机体产生特异性针对甲基嘧啶磷水解产物的抗体，所述抗体可以特异性识别甲基嘧啶磷水解产物--2-二乙基氨基-6-甲基-4-嘧啶醇，用于农药原药水解后间接检测食品中甲基嘧啶磷的含量。该方法检测限为3.2ng/mL，半抑制浓度(IC50)为23.42ng/mL，线性检测范围为6.09～90.07ng/mL，曲线相关系数为0.9996。本发明方法特异性强，灵敏度高，简便快捷，在食品中甲基嘧啶磷残留检测方面具有广泛的应用前景。