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公开(公告)号:CN112500490A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011097526.8
申请日:2020-10-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段,所述F(ab)2片段具有通过二硫键连接在一起的两个Fab部分,每个Fab部分包含轻链和重链Fd部分,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述重链Fd部分如SEQ ID NO:4所示。本发明通过胃蛋白酶酶解,采用两步纯化法纯化酶解产物,首次获得抗左旋氧氟沙星抗体F(ab)2。本发明方法流程简洁,操作简单,高产出,所述抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.33ng/mL,检测限为0.04ng/mL,检测范围为0.05~2.15ng/mL,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN111234025B
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202010082736.3
申请日:2020-02-07
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种抗右旋氧氟沙星抗体的Fab片段及其制备与应用,Fab片段包含重链,所述重链含有如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列或与SEQ ID NO:2具有至少80%同源性的氨基酸序列,或者所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的Fab片段纯化流程简洁,操作简单,高产出,制得的抗右旋氧氟沙星Fab片段用于Elisa检测时,灵敏度高。
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公开(公告)号:CN111234025A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010082736.3
申请日:2020-02-07
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种抗右旋氧氟沙星抗体的Fab片段及其制备与应用,Fab片段包含重链,所述重链含有如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列或与SEQ ID NO:2具有至少80%同源性的氨基酸序列,或者所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的Fab片段纯化流程简洁,操作简单,高产出,制得的抗右旋氧氟沙星Fab片段用于Elisa检测时,灵敏度高。
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公开(公告)号:CN112500490B
公开(公告)日:2022-05-03
申请号:CN202011097526.8
申请日:2020-10-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段,所述F(ab)2片段具有通过二硫键连接在一起的两个Fab部分,每个Fab部分包含轻链和重链Fd部分,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述重链Fd部分如SEQ ID NO:4所示。本发明通过胃蛋白酶酶解,采用两步纯化法纯化酶解产物,首次获得抗左旋氧氟沙星抗体F(ab)2。本发明方法流程简洁,操作简单,高产出,所述抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.33ng/mL,检测限为0.04ng/mL,检测范围为0.05~2.15ng/mL,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN108727502A
公开(公告)日:2018-11-02
申请号:CN201810411301.1
申请日:2018-05-02
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种左旋氧氟沙星抗体Fab片段的制备方法。所述方法包括以下步骤:制备左氧氟沙星的单克隆抗体;用蛋白酶酶切获得的单克隆抗体;去除蛋白酶,终止酶切反应;采用两步纯化法纯化目的Fab片段。本发明设计了一种蛋白酶酶切制备左旋氧氟沙星抗体Fab片段的方法,所述操作简便,转化率高;本发明设计了一种新型抗体纯化工艺制备左旋氧氟沙星抗体Fab片段,所述纯化工艺简单,仅需两步纯化得到纯度达95%以上的抗体Fab片段;本发明运用所制备的左旋氧氟沙星抗体Fab片段建立的ELISA方法灵敏度高,对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.13 ng/mL,线性检测范围为0.02-0.8 ng/mL,检测限为0.007 ng/mL。
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