公开(公告)号：CN118957112A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411143529.9

申请日：2024-08-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈兴 ,  谢宇 ,  雷红涛 ,  徐振林 ,  刘艳 ,  朱宇赫

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/38

Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性毒力基因靶标、引物和检测体系及方法。本发明所述靶标序列、RPA引物和crRNA具有良好的特异性，所构建的检测方法对其它亚种无特异性识别反应，检测结果准确可靠。此外，本发明所述检测方法结合煮沸法或试剂盒提取样品DNA，在不进行菌体富集的前提下，对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)基因组DNA的检测灵敏度为10‑4 ng/μL，菌液灵敏度为1.52 CFU/mL。对于椰汁、大米粉和糯米粉进行添标检测，样本检出限均达到100 CFU/mL，样本前处理简单，操作便捷，灵敏度高，可靠性高，适用于相关监管部门对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的现场快速检测。