奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列及其检测方法

    公开(公告)号:CN102533774A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201110460091.3

    申请日:2011-12-19

    Abstract: 本发明奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列及其检测方法,属于基因工程技术领域,所述奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列包括:奶牛FGF2基因第一内含子第11646位为A或G的单核苷酸多态性序列。所述检测方法为以奶牛基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增奶牛FGF2基因;对纯化的PCR产物进行测序,确定奶牛FGF2单核苷酸多态性位点为第11646位A或G。本发明的奶牛FGF2基因的SNP位点与乳脂量和乳脂率、体细胞计数、繁殖力有关;通过对体外受精胚胎的基因型分析,发现该SNP位点与胚胎成活率有关,通过对该基因多态性与性状的关联分析研究,可将该标记位点用于奶牛分子标记辅助育种以及提高体外受精胚胎成活率。

    可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统

    公开(公告)号:CN111876422B

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202010778704.7

    申请日:2020-08-05

    Abstract: 本发明公开了一种可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统,包括精确NHEJ修复筛选报告载体以及与该筛选报告载体共转染于目标编辑细胞的细胞基因组长片段打靶载体,精确NHEJ修复筛选报告载体包括筛选报告基因表达盒及两个sgRNA表达盒,所述筛选报告基因表达盒的转录区包括用于插入在药物筛选基因序列选定隔断位置的双sgRNA靶位点构建序列,双sgRNA靶位点分别以两个sgRNA表达盒转录的sgRNA作为打靶筛选报告基因表达盒的导引序列。本发明的筛选报告系统通过共转染并进行药物筛选,可以高效的富集目的基因长片段精确删除的阳性细胞克隆。

    一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法

    公开(公告)号:CN111925980A

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN202010861528.3

    申请日:2020-08-25

    Abstract: 本发明属于细胞培养领域,具体涉及一种鸡卵泡颗粒的体外培养方法。具体技术方案为:一种细胞培养基,在M199基础培养基中,添加1wt%的双抗,1wt%的复合维生素、1wt%的非必需氨基酸、5wt%的鸡血清。本发明提供了一种新的、针对鸡卵颗粒细胞的培养基,并进一步提供了培养方法。使用该培养基和培养方法,可有效增强鸡颗粒细胞在体外培养下的贴壁能力和增殖能力。

    一种T7RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法

    公开(公告)号:CN105861552A

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201610261461.3

    申请日:2016-04-25

    Abstract: 本发明主要属于高等生物体基因组编辑技术领域,具体涉及一种T7 RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法。所述方法基于T7 RNA聚合酶和T7启动子的高度特异性识别原理,首先构建T7启动子?sgRNA,将T7启动子?sgRNA、Cas9表达质粒以及T7 RNA聚合酶表达质粒共同转入细胞,T7 RNA聚合酶催化T7启动子启动sgRNA的转录,从而引导Cas9在靶位点处,进行切割,完成基因编辑过程。本发明所述方法利用T7启动子表达sgRNA,简化了CRISPR/Cas9系统的设计步骤,使得更多的人能够快速简便使用CRISPR/Cas9这一基因编辑工具研究感兴趣的基因位点。

Patent Agency Ranking