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公开(公告)号:CN103695327B
公开(公告)日:2016-04-13
申请号:CN201310647359.3
申请日:2013-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用,以酵母菌株作为宿主细胞,宿主细胞中转染有shRNA干扰载体,该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿过活体生物的胃肠道环境,靶向肠道DC细胞传递shRNA新方法,该方法可以有效的解决现有技术中向DC呈递时存在的弊端,能够广泛应用于基因治疗。
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公开(公告)号:CN103520713A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310485936.3
申请日:2013-10-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种ApoB100酵母重组疫苗及其制备方法和应用,该酵母重组疫苗以酵母作为宿主细胞,转染包含ApoB100基因片段的真核表达载体;所述的ApoB100基因片段的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,所述的真核表达载体为JMB88-HA-OVA-hApoB100。该酵母重组疫苗通过口服的方式饲喂,能够在酵母中被硫酸铜诱导下表达OVA-hApoB融合蛋白,并在体内被裂解释放,经过抗原呈递引起集体的体液和细胞免疫反应,达到缓解和治疗动脉粥样硬化的目的,可应用于动脉粥样硬化的药物的制备。
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公开(公告)号:CN102533774A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201110460091.3
申请日:2011-12-19
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列及其检测方法,属于基因工程技术领域,所述奶牛FGF2基因的单核苷酸多态性序列包括:奶牛FGF2基因第一内含子第11646位为A或G的单核苷酸多态性序列。所述检测方法为以奶牛基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增奶牛FGF2基因;对纯化的PCR产物进行测序,确定奶牛FGF2单核苷酸多态性位点为第11646位A或G。本发明的奶牛FGF2基因的SNP位点与乳脂量和乳脂率、体细胞计数、繁殖力有关;通过对体外受精胚胎的基因型分析,发现该SNP位点与胚胎成活率有关,通过对该基因多态性与性状的关联分析研究,可将该标记位点用于奶牛分子标记辅助育种以及提高体外受精胚胎成活率。
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公开(公告)号:CN102367450A
公开(公告)日:2012-03-07
申请号:CN201110193102.6
申请日:2011-07-11
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用,属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP,是通过下述方法构建:LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建;将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接,构建基本转基因载体PB-NIT;含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建;含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。
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公开(公告)号:CN111961686B
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202010888329.1
申请日:2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体,通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组,造成DNA双链断裂,使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复,再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除,从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑,可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号:CN112941107B
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202110365085.3
申请日:2021-04-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种原核Argonaute蛋白的基因编辑应用,通过构建源于细菌的Argonaute蛋白的原核表达载体,以及在转化宿主细胞后对该Argonaute蛋白的表达载体和共转化载体的降解的检测以及基因组位点的检测,发现了其具有被特异性转录本激活并靶向特定DNA靶序列的能力,并且在真核细胞中转录的导向RNA的参与下,实现了对基因组靶序列进行inDel频率为3%的基因编辑。实验结果表明原核Argonaute蛋白可以用于细胞内基因编辑工具的开发。
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公开(公告)号:CN111876422B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202010778704.7
申请日:2020-08-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统,包括精确NHEJ修复筛选报告载体以及与该筛选报告载体共转染于目标编辑细胞的细胞基因组长片段打靶载体,精确NHEJ修复筛选报告载体包括筛选报告基因表达盒及两个sgRNA表达盒,所述筛选报告基因表达盒的转录区包括用于插入在药物筛选基因序列选定隔断位置的双sgRNA靶位点构建序列,双sgRNA靶位点分别以两个sgRNA表达盒转录的sgRNA作为打靶筛选报告基因表达盒的导引序列。本发明的筛选报告系统通过共转染并进行药物筛选,可以高效的富集目的基因长片段精确删除的阳性细胞克隆。
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公开(公告)号:CN105861552A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610261461.3
申请日:2016-04-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明主要属于高等生物体基因组编辑技术领域,具体涉及一种T7 RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法。所述方法基于T7 RNA聚合酶和T7启动子的高度特异性识别原理,首先构建T7启动子?sgRNA,将T7启动子?sgRNA、Cas9表达质粒以及T7 RNA聚合酶表达质粒共同转入细胞,T7 RNA聚合酶催化T7启动子启动sgRNA的转录,从而引导Cas9在靶位点处,进行切割,完成基因编辑过程。本发明所述方法利用T7启动子表达sgRNA,简化了CRISPR/Cas9系统的设计步骤,使得更多的人能够快速简便使用CRISPR/Cas9这一基因编辑工具研究感兴趣的基因位点。
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公开(公告)号:CN104857507A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510266475.X
申请日:2015-05-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K39/00 , A61K48/00 , A61K38/38 , A61K39/39 , A61K47/46 , A61P37/04 , C12N1/19 , C12N15/85 , C12N15/12
Abstract: 本发明一种由口服酵母携带DNA片段活体靶向水产动物肠道免疫细胞,诱导水产动物产生免疫反应的制备方法。该疫苗生产成本低,使用方法简单,适合大规模生产,而且与传统减毒疫苗相比对动物无毒力威胁。可用在鱼类贝类等水产动物的多种细菌性、病毒性和寄生虫等口服DNA疫苗的开发应用上,使水产动物健康生长,减少水产业在疾病方面的损失,同时避免目前DNA疫苗所存在的弊端。
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