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公开(公告)号：CN102766207A
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201210249621.4
申请日：2012-07-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型的双峰驼单域重链抗体及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明首次利用PCV2灭活疫苗免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立PCV 2免疫VHH抗体库，筛选与PCV特别是PCV 2型病毒抗原具有良好亲和力的高特异性单域重链抗体（VHH），本发明所述的抗体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO.1所示的序列同源性在95%以上的氨基酸序列。本发明的PCV 2单域重链抗体对于研究猪圆环病毒，特别是对于研究猪圆环病毒2型的感染机理和建立高度敏感和特异的抗原快速检测或诊断试剂具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106148568B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610536974.0
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠试剂盒及其在检测小反刍兽疫病毒抗原中的用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV N蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN110373501A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910712611.1
申请日：2019-08-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于免疫磁球的猪流行性腹泻病毒快速检测试剂盒，属于生物领域，该试剂盒包括有：免疫磁球，洗涤液，无菌无核酶水，标准阳性对照样品，检测引物，Real time RT-PCR反应液；其中的免疫磁球表面具有PEDV膜蛋白特异性多克隆抗体。本发明利用表面（羧基化）修饰的磁球和抗PEDV膜蛋白M特异性兔源多克隆抗体制备了免疫磁球，能够特异性结合粪便、组织等多种样品中的PEDV病原，以免疫磁球-病原复合物直接作为模板，进行Real time RT-PCR检测，简化了实验操作步骤并节省了检测时间。
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公开(公告)号：CN107064488B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201710303456.9
申请日：2017-05-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/531 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟病毒血清总抗体固相阻断ELISA试剂盒所用抗原的制备方法，属于生物领域，方法是将CSFV疫苗株C‑株细胞培养抗原灭活、浓缩、不同截留分子量层析柱纯化全抗原，稳定包被酶标板作为检测抗原，结合辣根过氧化物酶标记羊抗CSFV高免血清抗体作为阻断抗体，TMB底物和终止液的联合使用，使用完整CSFV粒子作为抗原用于检测抗猪瘟病毒血清总抗体的固相阻断ELISA检测方法。可以系统、真实、完整描述猪瘟疫苗免疫过程中抗体产生的特征规律，对猪瘟疫苗接种和防疫具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109438573A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811341154.1
申请日：2015-12-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.8。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变区抗M蛋白VHH抗体基因编码序列，对其进行可溶性表达和ELISA实验证明其均可以同M蛋白相结合，吸光度OD405值的不同表明其同M蛋白结合能力各有差异。8株VHH抗体可通过E.coli的表达，而制备体外重组的基因工程抗体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103667297B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201310752351.3
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N15/10
Abstract: 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的1010shRNA，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞（绿猴肾细胞）以及抑制PRRSV复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对PRRSV体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向PRRSV基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪繁殖与呼吸综合征的防治积累了实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号：CN103602636B
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201310499644.5
申请日：2013-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗羊口疮病毒（Orf virus，ORFV）B2L蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明采用原核表达系统，用大肠杆菌表达的ORFV B2L蛋白作为免疫原，免疫小鼠，经细胞融合，筛选得到一株稳定分泌抗B2L蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CCTCC NO:C2013136。单克隆抗体的特异性试验结果表明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体只与ORFV株发生反应，而与羊的其它相关病原，例如FMDV、POXV、JSRV、羊衣原体等不发生交叉反应。因此，本发明单克隆抗体可用于检测ORFV，并且本发明的提出为建立一种快速、简易、特异的ORFV诊断方法及其免疫机制研究、免疫功能检测等提供了物质基础。
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公开(公告)号：CN103255234B
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201310199211.8
申请日：2013-05-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的检测方法，通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测，本发明还提供了利用上述检测方法检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒。本发明针对ORFV的保守区域H2L基因建立的实时定量方法特异性高，稳定性好；本发明用来检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒，操作简便，用户只需将待检样品的DNA加入反应管中，根据扩增曲线即可得出检测结果，省时省力，成本较低，时间由原来的3-4小时缩短到1-2小时；并且比普通PCR的灵敏度高，可用于检测低微含量的羊传染性脓包皮炎病毒，可适用于我国各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN102660545B
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201210180401.0
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N7/04 , C12N5/07 , C12N15/10
Abstract: 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的RNAi及其制备方法，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞（绿猴肾细胞）以及抑制PRRSV复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号：CN103667298A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201410001353.3
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867
Abstract: 一种用于抑制猪瘟病毒复制的Npro207shRNA，所述包含siRNA序列，shRNA慢病毒表达载体构建，复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为shRNA应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
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