-
公开(公告)号：CN113336845B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202110598030.7
申请日：2021-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的猪源单个B细胞抗体及竞争ELISA抗体检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。本发明提供了PRRSVN蛋白的猪源单个B细胞抗体C8。试验表明以FMDV的3A表位单抗3A24作为包被抗体，捕获3AN融合蛋白后形成包被酶标板，以C8单抗作为检测抗体，采用竞争ELISA反应模式检测猪血清PRRSV抗体，制备的PRRSV抗体检测试剂盒，具有很好的敏感性和特异性，为PRRSV血清流行病学调查提供了一种新工具。
-
公开(公告)号：CN113174407A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110506452.7
申请日：2021-05-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法，主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因，并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中，构建重组表达质粒pcDNA3.4‑ShmEs。利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHO‑K1细胞，并使用抗生素G418进行筛选。试验结果表明，ShmEs基因在CHO‑K1细胞中得到了表达且能够稳定传代表达，并且利用该稳定细胞系生产的抗原免疫兔体能够刺激兔体产生猪瘟特异性抗体，并且能够至少维持42天。ShmEs基因的成功表达及其稳定细胞系的建立为猪瘟新型基因重组疫苗的开发奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN112725293A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110196505.X
申请日：2021-02-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/02 , G01N33/569 , G01N21/84 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒双水相萃取技术领域，公开了一种双水相萃取浓缩纯化猪塞内卡病毒(SenecavirusA,SVA)粒子的方法，SVA繁殖；SVA的间接免疫荧光鉴定；三步双水相萃取方法的建立；SVA含量的测定；蛋白印迹试验；SVA的电子显微镜鉴定。本发明在SVA培养液中加入低浓度的聚乙二醇和无机盐后，除去细胞碎片，再加入聚乙二醇形成双水相体系即能够快速的获得浓缩纯化的猪SVA病毒粒子；通过双水相萃取技术可实现病毒粒子的快速分离，且病毒粒子回收率和纯度均较高，工艺简单、成本低；通过三步双水相萃取的方法，实现了从细胞培养液中浓缩纯化猪SVA病毒粒子的目的，并可在实验室和规模化生产中同时应用。
-
公开(公告)号：CN112358544A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011285447.X
申请日：2020-11-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了FMDV A型牛源广谱中和单抗W145及其制备的中和抗体竞争ELISA检测试剂盒，属于病毒抗体检测技术领域。FMDV A型牛源广谱中和单克隆抗体W145，包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示轻链可变区。单克隆抗体W145在制备中和FMDV A型病毒的试剂中的应用。FMDV A型牛源广谱中和单克隆抗体组合物，包括单克隆抗体W145和单克隆抗体E32，在制备基于直接竞争法检测FMDV A型中和抗体的免疫试剂盒中的应用。该试剂盒的检测结果与病毒微量中和试验结果显著相关，说明该试剂盒可用于血清中和抗体的检测。
-
公开(公告)号：CN105622762B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201610120102.6
申请日：2016-03-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种牛趋化因子介导的O型口蹄疫靶向性复合表位蛋白，所述靶向性复合表位蛋白的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供含有上述牛趋化因子介导的O型口蹄疫靶向性复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫牛，牛能够产生较高的体液免疫，以及较好的保护性免疫效果，是一种安全的口蹄疫新型疫苗。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110372790A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910694339.9
申请日：2019-07-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种跨口蹄疫病毒血清型单克隆抗体的筛选方法，属于单克隆抗体筛选技术领域。本发明利用不同荧光素标记不同的血清型抗原，借助多色流式细胞仪直接分选获得结合不同抗原的特异性B细胞，设计出一种快速获得能与不同血清型抗原反应的单克隆抗体筛选方法，能够得到可以快速产生跨血清单克隆抗体，获得该类型单克隆抗体可用于鉴定不同病毒血清型间保守抗原位点，可以为血清非依赖性ELISA检测方法的建立前提必要工具。
-
公开(公告)号：CN108997493B
公开(公告)日：2019-07-09
申请号：CN201810929067.1
申请日：2018-08-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体的制备方法，属于抗体制备技术领域。本发明所述制备方法包括以下步骤：1)采用O型口蹄疫病毒，对牛进行第一、第二和第三次免疫；2)筛选O型口蹄疫病毒抗原特异性单个B细胞；3)扩增牛抗体重链和轻链的可变区基因；4)牛抗体重链和轻链的恒定区序列的获取；5)制备全牛源单抗的全长重链载体和全牛源单抗的全长轻链载体；6)将全牛源单抗的全长重链载体和全牛源单抗的全长轻链载体共转染细胞，取细胞培养上清，纯化得到全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体。本发明所述制备方法利用不同口蹄疫毒株感染牛，筛选得到能中和三个谱系O型FMDV的中和抗体，能够获得全牛源广谱中和单克隆抗体。
-
公开(公告)号：CN108997493A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810929067.1
申请日：2018-08-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C07K16/1009 , C07K2317/76 , C12N15/85
Abstract: 本发明涉及一种全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体的制备方法，属于抗体制备技术领域。本发明所述制备方法包括以下步骤：1)采用O型口蹄疫病毒，对牛进行第一、第二和第三次免疫；2)筛选O型口蹄疫病毒抗原特异性单个B细胞；3)扩增牛抗体重链和轻链的可变区基因；4)牛抗体重链和轻链的恒定区序列的获取；5)制备全牛源单抗的全长重链载体和全牛源单抗的全长轻链载体；6)将全牛源单抗的全长重链载体和全牛源单抗的全长轻链载体共转染细胞，取细胞培养上清，纯化得到全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体。本发明所述制备方法利用不同口蹄疫毒株感染牛，筛选得到能中和三个谱系O型FMDV的中和抗体，能够获得全牛源广谱中和单克隆抗体。
-
公开(公告)号：CN105777909A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610120101.1
申请日：2016-03-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/135 , A61K47/48 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白，其氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供包含上述猪A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫动物，一周后均可检测到FMDV特异性抗体，抗体效价不断升高，免疫四周时抗体效价最高。用1000个猪半数感染量（PID50）的A/SEA/97系HNXX株猪体适应毒攻击后，本发明的疫苗免疫组猪均可完全抵抗强毒攻击，攻毒后10天内无一头猪表现出临床症状。说明将A8抗原通过XCL1靶向XCR1受体，再用CpG激活树突状细胞能显著提高抗原的体液免疫和细胞免疫水平，因而，是一种有效的猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白疫苗。
-
公开(公告)号：CN119684444A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411966019.1
申请日：2024-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了塞内卡病毒A猪源Fab抗体及其竞争ELISA检测方法。中和性的Fab基因工程抗体重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No .4和SEQ ID No .7所示，抗体与SVA之间有较高的亲和力，建立了竞争ELISA检测方法，确定ELISA检测方法的SVA粒子最佳包被浓度为1 μg/mL、竞争抗体最适工作浓度为0.5 μg/mL、待检血清样本最佳稀释比例为1:10、酶标亲和素最佳稀释比为1:30 000；确定抑制百分率PI为47%时，敏感性和特异性最高，分别为96.88%和100%，且与常见的主要猪病毒病阳性血清不发生反应；批内变异系数范围为1.12%~7.34%、批间变异系数范围为1.19%~11.72%，表明重复性较好；利用该方法和VNT检测同时检测了224份临床猪血清样本，符合率为93.75%。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
81
records
(took 0.041 seconds)
