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公开(公告)号:CN105854023A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201510023486.5
申请日:2015-01-19
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
IPC: A61K47/48 , A61K31/585 , A61P35/00
Abstract: 本发明属肿瘤靶向递送与缓释给药系统技术领域。涉及一种基于聚乙二醇的水溶性蟾毒灵大分子前药PEGS-bufalin的制备方法,本发明中,以PEG为水溶性基元,以蟾毒灵为模型药,通过易降解的酯键将PEG和蟾毒灵共价连接,制得基于聚乙二醇的水溶性蟾毒灵大分子前药(简称PEGS-bufalin);经试验显示,制得的水溶性蟾毒灵大分子前药能有效降低蟾毒灵的毒副作用、提高水溶性和肿瘤靶向性。本发明制备方法简便,适于大规模生产,特别适应于制备具有长循环、可生物降解、缓控释、被动靶向、抗肿瘤的肿瘤靶向递送与缓释给药系统,尤其是制备抗肠癌的药物。
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公开(公告)号:CN105709231A
公开(公告)日:2016-06-29
申请号:CN201410726213.2
申请日:2014-12-04
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明属于肿瘤靶向递送与缓释给药系统技术领域。涉及一种附载蟾毒灵的缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽(cRGD)修饰的聚甲基丙烯酸寡聚乙二醇酯-聚己内酯纳米粒及其制备方法。本发明中以Ph-PCL-b-P(OEGMA-co- GMA)为基础材料经cRGD修饰成Ph-PCL-b-P(OEGMA-co-RGD)后,将bufalin包裹在Ph-PCL-b- P(OEGMA-co-RGD)形成的胶束中,制得附载蟾毒灵的cRGD修饰的聚甲基丙烯酸寡聚乙二醇酯-聚己内酯纳米粒。本发明的纳米药物能有效降低蟾毒灵的毒副作用、提高水溶性和肿瘤靶向性;其中的药物bufalin随材料的降解被缓慢释放,能达到较长时间的治疗效果。
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公开(公告)号:CN101748095B
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN200810203814.X
申请日:2008-11-28
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明属生物技术领域。涉及一种定向诱导软骨细胞的方法,具体涉及一种采用人类羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的方法。本发明依据组织工程基因学原理,通过体外培养人羊膜上皮细胞,进行羊膜上皮细胞的原代、传代培养,观察调整羊膜上皮细胞基因型,利用细胞因子(转化生长因子β,TGF-β)和BMP-7诱导和调控其定向诱导分化成软骨细胞,通过分子生物学方法检测诱导分化的细胞的软骨细胞特性及软骨细胞活性,明确人羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的调控机制,结果表明人羊膜上皮细胞可以作为软骨细胞诱导分化的种子源。本方法取材方便,具有较广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN101624599B
公开(公告)日:2013-03-27
申请号:CN200810040524.8
申请日:2008-07-11
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种含有COX-2基因启动子和报告基因的重组质粒及其构建方法和应用。本发明通过提取人COX-2基因启动子,以含萤火虫荧光素酶报告基因的pGL3-Basic的质粒为载体,插入COX-2基因启动子,构建一种含COX-2基因启动子和萤火虫荧光素酶报告基因的pGL3-Basic-COX-2 promoter重组质粒。将构建的重组质粒与海肾荧光素酶报告基因质粒共转染到肿瘤细胞中,使其稳定表达。通过检测荧光素酶的活性反映COX-2基因启动子启动转录的活性,用于靶向筛选抗肿瘤药物。本发明具有靶向性强、高效快速、反应灵敏等优点,适用于以COX-2基因为靶点的抗肿瘤药物大批量筛选。
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公开(公告)号:CN102899344A
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201210461114.7
申请日:2012-11-16
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒,其中,该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。该重组质粒的制备方法包含:步骤1,对载体质粒进行扩增和抽提;步骤2,对VEGFA基因的3′UTR序列进行克隆、酶切及纯化;步骤3,进行所述的VEGFA基因的3′UTR序列与所述的载体质粒的连接;步骤4,筛选重组子。本发明提供的含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒,在筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等方面就有极佳的应用前景。
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公开(公告)号:CN101748095A
公开(公告)日:2010-06-23
申请号:CN200810203814.X
申请日:2008-11-28
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明属生物技术领域。涉及一种定向诱导软骨细胞的方法,具体涉及一种采用人类羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的方法。本发明依据组织工程基因学原理,通过体外培养人羊膜上皮细胞,进行羊膜上皮细胞的原代、传代培养,观察调整羊膜上皮细胞基因型,利用细胞因子(转化生长因子β,TGF-β)和BMP-7诱导和调控其定向诱导分化成软骨细胞,通过分子生物学方法检测诱导分化的细胞的软骨细胞特性及软骨细胞活性,明确人羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的调控机制,结果表明人羊膜上皮细胞可以作为软骨细胞诱导分化的种子源。本方法取材方便,具有较广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103083250B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201310022754.2
申请日:2013-01-22
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球及其制备方法,该微球采用水包油型乳化-液中干燥法制备,其油相为聚乳酸-羟基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液,水相为聚乙烯醇的水溶液;微球中丹参酮ⅡA的载药量为1%~10%,包封率为60%~90%,微球粒径范围为30~200mm。本发明提供的丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球,适用于肝癌的介入治疗,具有良好的肝肿瘤末梢血管栓塞作用,有效栓塞时间为7~60天。能够靶向分布在肿瘤组织,缓释药物,提高药物局部浓度,延长药物代谢时间,明显抑制动物肝肿瘤生长,延长动物的生存期。微球栓塞后可抑制人低氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达,减少肿瘤组织微血管密度。
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公开(公告)号:CN102899421A
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201210461112.8
申请日:2012-11-16
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因筛选血管生成相关microRNA的方法,其中,该方法包含:步骤1,进行目标细胞的培养和铺板;步骤2,配置microRNA/DNA/脂质体的混合物,对步骤1所述的细胞进行共转染;步骤3,进行荧光素酶活性检测;该步骤3包含:将步骤2所得的共转染后的细胞,用一种含有VEGFA基因3′UTR与报告基因的重组质粒,以及一种海肾荧光素酶载体分别进行转染;然后将得到的细胞经过培养后,进行收集;将所收集的细胞进行裂解;取15-20μl细胞裂解液于离心管中,加入工作液,然后用发光仪进行测读。该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。本发明提供的方法,可用来筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等。
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公开(公告)号:CN102277383A
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN201110217195.1
申请日:2011-08-01
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院 , 上海市普陀区中心医院
Abstract: 本发明涉及一种含HIPK2基因的重组质粒,该重组质粒包含HIPK2基因的编码序列以及载体质粒DNA序列。其中载体质粒DNA序列包含与HIPK2基因可操作地连接的调节序列,该载体质粒是可以在宿主中复制和生存的真核表达质粒。该重组质粒的构建包括引物设计、PCR扩增、NheI和KpnI双酶切及纯化、目的片段和载体质粒的连接、连接产物转化大肠杆菌感受态细胞以及重组质粒酶切鉴定阳性克隆并测序等步骤。该重组质粒可用于HIPK2基因在肿瘤血管新生、增殖凋亡、侵袭转移中的作用机理的研究,以及基于HIPK2基因的抗肿瘤药物的开发和生产,从而提供预防和治疗肝癌、胃癌、结直肠癌等恶性肿瘤的新途径。
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公开(公告)号:CN101310717A
公开(公告)日:2008-11-26
申请号:CN200710041027.5
申请日:2007-05-22
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
IPC: A61K31/343 , A61K9/19 , A61K47/34 , A61P35/00
Abstract: 本发明属制药领域,涉及一种丹参酮IIA聚乳酸载药纳米粒制剂以及该制剂的制备方法。本发明的载药纳米粒的活性组分为丹参酮IIA,所用载药纳米材料为聚乳酸,纳米粒粒径范围为50nm~300nm,纳米粒载药量为1%~30%,纳米粒包封率为70%~90%。所述的载药纳米粒制成冻干粉针剂。本发明能提高药物在载体材料中的分散程度,改善药物的溶出,提高生物利用度,而且可以改变药物的体内过程,增加肝靶向性,于丹参酮的注射给药具有重要意义。同时能较好地解决脂质体、微乳等制剂中药物易泄露的问题。
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