-
公开(公告)号：CN103173481A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310065889.7
申请日：2013-03-01
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种质粒载体，所述的质粒载体是在pmirGLODual-Luciferase-promoter质粒载体的第6832-7349bp区段内插入了人ABCB1基因的3′UTR序列。本发明还涉及含有上述载体的宿主细胞、上述载体的构建方法及其在筛选多药耐药相关microRNA中的用途。本发明为准确预测调控人ABCB1基因表达的microRNA提供了一种快速、高效、简单易行的方法，进而为提高microRNA检测的灵敏度和特异性，以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
-
公开(公告)号：CN102899421A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201210461112.8
申请日：2012-11-16
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因筛选血管生成相关microRNA的方法，其中，该方法包含：步骤1，进行目标细胞的培养和铺板；步骤2，配置microRNA/DNA/脂质体的混合物，对步骤1所述的细胞进行共转染；步骤3，进行荧光素酶活性检测；该步骤3包含：将步骤2所得的共转染后的细胞，用一种含有VEGFA基因3′UTR与报告基因的重组质粒，以及一种海肾荧光素酶载体分别进行转染；然后将得到的细胞经过培养后，进行收集；将所收集的细胞进行裂解；取15-20μl细胞裂解液于离心管中，加入工作液，然后用发光仪进行测读。该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。本发明提供的方法，可用来筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等。
-
公开(公告)号：CN102899344A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201210461114.7
申请日：2012-11-16
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒，其中，该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。该重组质粒的制备方法包含：步骤1，对载体质粒进行扩增和抽提；步骤2，对VEGFA基因的3′UTR序列进行克隆、酶切及纯化；步骤3，进行所述的VEGFA基因的3′UTR序列与所述的载体质粒的连接；步骤4，筛选重组子。本发明提供的含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒，在筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等方面就有极佳的应用前景。
-
公开(公告)号：CN103173480A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310065888.2
申请日：2013-03-01
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明涉及一种质粒载体，所述的质粒载体包含人ABCB1基因的3′UTR序列和双荧光素酶基因。本发明还涉及一种筛选多药耐药相关microRNA的方法，它是将待测试microRNA和如上所述的质粒载体共转染多药耐药宿主细胞，以转染microRNA的多药耐药宿主细胞为对照，观测双荧光素酶活性的变化，确定待测试microRNA是否为多药耐药相关microRNA。本发明还涉及一种microRNA在制备逆转多药耐药的药物中的用途。使用本发明的方法筛选多药耐药相关microRNA具有快速、高效、简单易行的优点，为提高microRNA检测的灵敏度和特异性，以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
-
-
-
Search Results
4
records
(took 0.021 seconds)
