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公开(公告)号：CN111826389B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202010455589.X
申请日：2020-05-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/57 , C12N1/21 , C12N9/04 , C12N9/08 , C12N9/10 , C12N9/16 , C12N9/26 , C12N9/48 , C07K14/78 , C07K14/435 , C12P21/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，通过同源重组的方法将包含1‑4个SD序列的基因片段整合至编码D‑丙氨酰‑D‑丙氨酸羧肽酶DacA的启动子与DacA编码基因之间。本发明通过整合不同的SD序列至大肠杆菌DacA基因的启动子与DacA编码基因之间，提高了D,D‑羧肽酶DacA的表达，从而提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN114410631A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210091687.9
申请日：2022-01-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P7/02 , C12R1/74
Abstract: 本发明公开了一种高效合成西柏三烯一醇菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。所述构建方法为将西柏三烯一醇合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到西柏三烯一醇合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株西柏三烯一醇产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后西柏三烯一醇产量可达1391.3mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成西柏三烯一醇，并且生产性能稳定，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112409464B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202011322536.7
申请日：2020-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌重组蛋白胞外生产水平的信号肽突变体及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对信号肽M1(MSDEQKKPE QIHRRDILKWGAMAGAAVA)的N端区域进行定向进化，筛选获得具有高效胞外分泌水平的信号肽突变体文库，通过该突变体文库构建获得系列重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组枯草芽孢杆菌菌株。将获得的正向信号肽突变体进行排列组合复合突变，获得具有高效重组蛋白表达分泌水平的信号肽复合突变体，利用其构建获得具有高效胞外蛋白胞外分泌水平的枯草杆菌杆菌突变株。本发明所筛选获得的信号肽突变体，对于重组蛋白在枯草芽孢杆菌中具有高效的胞外蛋白分泌水平，重组蛋白胞外分泌水平提高了15倍以上。本发明方法对信号肽改造及重组蛋白在宿主中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN114277040A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111597793.6
申请日：2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑胡萝卜素菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。所述构建方法为将β‑胡萝卜素合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到β‑胡萝卜素合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株β‑胡萝卜素产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后发酵液中菌体干重可达213g/L，β‑胡萝卜素产量可达6.5g·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成β‑胡萝卜素，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113897325A
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN202111307645.6
申请日：2021-11-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种重组大肠杆菌，以大肠杆菌CCTCC NO：M2019390为宿主细胞，表达来源于拟南芥的糖基转移酶基因UGT85A1，获得一株红景天苷的高产菌株E.coli YMGRS。本发明的重组大肠杆菌实现了从头合成红景天苷，底物为葡萄糖，价格低廉，且该菌株在装有2.5L M9Y培养基的5L发酵罐发酵后，红景天苷最高产量为9.3g/L，单位菌体浓度的产量为0.31g/(L·OD600)，生产强度高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113881735A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202111287399.2
申请日：2021-11-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种麦芽糖浆的制备方法及其应用，属于酶工程和发酵工程技术领域。其以一种酵母来源的淀粉酶SfA在特定条件下水解玉米淀粉获得的糖浆用于YCC166的发酵；发酵液中酪醇的水平与采用麦芽糖为原料得到的产量相当而发酵时间则进一步缩短。本发明提供的大肠杆菌YC166发酵产酪醇的原料主要是玉米淀粉，价格相对低廉，获得的酪醇发酵水平较高，发酵周期短于已见报道，具有良好的工业化应用前景，具备产业化价值。
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公开(公告)号：CN113337495A
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN202110620019.6
申请日：2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高唾液酸产量的方法与应用，属于酶工程、微生物工程领域。本发明对N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑差向异构酶的酶催化活性关键氨基酸位点Gly371进行饱和突变，筛选提高催化效率的酶突变体。通过过量表达催化效率提高的N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑差向异构酶突变体和N‑乙酰神经氨酸醛缩酶，提高重组大肠杆菌催化生产唾液酸的生产效率；采用本发明构建的含有G371C的重组大肠杆菌和含有G371A的重组大肠杆菌全细胞催化制备得到Neu5Ac产量分别为352.0和353.6mmol·L‑1，显著高于野生型重组菌，同时，含有突变体的重组菌株催化GlcNAc转化生成Neu5Ac的转化效率，显著高于对照菌株。
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公开(公告)号：CN112899208A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110177960.5
申请日：2021-02-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N9/10 , C12N9/88 , C12N9/90 , C12P7/02 , C12R1/19 , C12R1/125
Abstract: 本发明涉及一种提高重组菌西柏三烯一醇产量的方法，本发明通过系统调控西柏三烯一醇合成关键酶基因ggpps、cbts、dxs和idi的表达，在E.coli中实现植物来源的西柏三烯一醇的高产。进一步同时过量表达法尼基焦磷酸合成酶基因ispA及ggpps、cbts、dxs和idi基因，提高其西柏三烯一醇产量。基于发酵优化确定的最适葡萄糖与酵母粉添加方式及发酵周期，显著提高了西柏三烯一醇产量。本发明还提供了上述方法在制备含西柏三烯一醇的产品中的应用。采用本发明获得的西柏三烯一醇高产量菌株及方法可高效生产西柏三烯一醇，可促进其在农业及烟草等领域中的应用。
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公开(公告)号：CN110452865B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910754497.9
申请日：2019-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产酪醇的重组大肠杆菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。所述的大肠杆菌异源表达了密码子优化后的酿酒酵母丙酮酸脱羧酶基因ARO10*。该重组大肠杆菌是在大肠杆菌基因组的lacI位点，trpE位点，pabB位点，pabA位点，pykF位点的五个位点进行删除的同时整合上ARO10*基因，得到了含多个拷贝的ARO10*基因的菌株。在上述重组菌的基础上，随机在多个位点进行了ARO10*基因的整合，发现在yccX位点插入ARO10*基因，能获得高产酪醇的菌株。利用该菌株发酵不需要诱导剂和抗生素。发酵48h，酪醇产量可达到28mM。
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公开(公告)号：CN112759665A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN202110212545.9
申请日：2021-02-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种采用虎奶菇超支化多糖制备纳米硒多糖的方法。本发明通过超支化多糖的特殊结构，在酸性溶液中为纳米硒合成提供软模板，进而通过Vc的原位还原获得稳定的超支化多糖纳米硒产物，纳米硒含量高，达到16.35％，并且稳定性好。该方法制备条件温和、操纵简便，在化学合成硒纳米材料领域具有潜在的应用价值。
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