检测食品中沙门菌的环介导等温扩增方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN102424861B

    公开(公告)日:2013-07-31

    申请号:CN201210003674.8

    申请日:2012-01-06

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种食品中病原菌的快速检测方法,特别是一种以HisJ为靶基因的环介导等温扩增检测食品中沙门菌的方法及试剂盒。所述的检测方法是以沙门菌HisJ基因为靶基因,使用四条环介导等温扩增特异性引物检测沙门菌,所述四条环介导等温扩增特异性引物序列如SEQIDNO1-4所示。本发明具有操作简单,检测时间短,特异性强,灵敏度高;适用范围广等优点,可替代传统的食品中沙门菌的检测方法。

    鸡白痢沙门菌分泌性蛋白SpiC的用途

    公开(公告)号:CN103197078A

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201310104622.4

    申请日:2013-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了鸡白痢沙门菌分泌性蛋白SpiC的用途,它能够作为沙门菌感染宿主时的诊断生物学标志物,用于制备鸡白痢免疫检测用材料或诊断用材料。本发明进一步利用该蛋白建立了检测宿主体内产生的SpiC抗体的鸡白痢ELISA检测用材料,并给出了对应的鸡白痢ELISA检测方法。基于该蛋白建立了检测宿主体内产生的SpiC抗体ELISA方法特异性好,灵敏度高,可作机体免疫状态的评价及感染性疾病诊断相关的研究。

    镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法

    公开(公告)号:CN100510058C

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200710021820.9

    申请日:2007-04-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体是涉及一种镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因破壁方法。所说的镁离子调控下的表达噬菌体裂解基因的破壁方法,其特征是,将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,再转化进宿主菌,然后通过控制Mg2+的浓度使裂解基因在宿主菌内表达。本发明将噬菌体裂解基因克隆进受镁离子调控的表达载体pYS,通过控制Mg2+的浓度可使裂解基因在大肠杆菌内表达,获得了在温和条件下宿主菌的有效自我裂解。

    新城疫病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101225447A

    公开(公告)日:2008-07-23

    申请号:CN200710192278.3

    申请日:2007-12-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测新城疫病毒的试剂盒及检测方法。本发明含有10×等温反应缓冲液、AMV 8U/μl、Rnasin 40U/μl、Bst DNA聚合酶8U/μl、10mM dNTP、100mM硫酸镁、20μM内引物1、20μM内引物2、10μM外引物1、10μM外引物2和5M甜菜碱的反应液A和反应液B:1000×的荧光染料SYBR GreenI。通过对组织样品中RNA、家禽咽喉及泄殖腔棉拭子样品中RNA提取、新城疫病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出新城疫病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。

    双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株及其构建方法

    公开(公告)号:CN101139567A

    公开(公告)日:2008-03-12

    申请号:CN200710025604.1

    申请日:2007-08-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种将野生型产单核细胞李斯特菌毒力基因缺失的构建方法。本发明将扩增出待删除基因两翼的同源片段actA、plcB后,利用SOEing PCR方法将其拼接,插入穿梭载体pKSV7中,经电转化导入产单核细胞李斯特菌,得到actA、pclB双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株(Listeriamonocytogenes yzu LM1-2),保藏号CCTCC NO:M206107。解决了产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称LM)人兽共患病的病原,死亡率高及对食品的污染与危害等。本发明删除了actA和plcB基因,从而实现对野生型菌株yzuLM4的减毒。

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