-
公开(公告)号:CN101864427A
公开(公告)日:2010-10-20
申请号:CN201010187618.5
申请日:2010-05-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种徐淮山羊体外重组过氧化氢酶体激活增殖受体的细胞定位方法。该方法是先构建含过氧化氢酶体激活增殖受体基因的载体pMD19-T-PPAR,再构建含有增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C1-PPAR:最后通过聚乙烯亚胺介导pEGFP-C1-PPAR转染NIH-3T3细胞,48h后于荧光倒置显微镜下观察细胞的发荧光部位,以确定过氧化氢酶体激活增殖受体蛋白的细胞亚定位情况。
-
公开(公告)号:CN101838704A
公开(公告)日:2010-09-22
申请号:CN201010205364.5
申请日:2010-06-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鸡肉质多基因聚合检测试剂盒,该试剂盒包括PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶、A-FABP-3基因引物、Ex-FABP基因引物和GARS-AIRS-GART基因引物。本发明试剂盒通过直接测定多个管家基因的核苷酸序列来发现基因变异的分型方法,是在普通PCR的基础上加以改进,具有节省时间、降低成本、提高效率的优点,特别是节省珍贵的实验样品,从肌苷酸含量的候选基因和影响肌内脂肪含量的候选基因中选择了相关基因,用本试剂盒进行多基因聚合检测研究。
-
公开(公告)号:CN118892113A
公开(公告)日:2024-11-05
申请号:CN202410933465.6
申请日:2024-07-12
Applicant: 扬州大学
IPC: A01N1/02 , C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了鸡胚胎期性腺的冷冻保护液、冻存及原始生殖细胞分离培养方法,涉及畜牧学和生物技术领域。冷冻保护液包括A液和B液;其中,A液包括:胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX,且胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX的体积比为80~90:10~20:1;B液包括:A液和二甲基亚砜,且A液和二甲基亚砜的体积比为4~6:1。冻存及原始生殖细胞分离培养方法包括:鸡胚性腺的获取;鸡胚性腺的冻存;鸡胚性腺的复苏;原始生殖细胞的分离培养。本发明可以将鸡胚胎期性腺冻存后,在合适的时间和地点再进行复苏,对性腺中的PGCs进行培养建系,且冻存、复苏和PGCs建系的效率高,获得的PGCs细胞系依然保持PGCs的生物学特性。
-
公开(公告)号:CN118531019A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410602068.0
申请日:2024-05-15
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,涉及一种鸡TRIM39.2基因、重组载体、截短体重组蛋白或其多克隆抗体在制备与鸡TRIM39.2相关疾病中的应用,编码鸡TRIM39.2截短体重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建的鸡TRIM39.2截短体重组蛋白,避免了全长表达稳定性的缺点,同时免疫效果更加稳定且抗体水平较高。同时本发明制备的多克隆抗体可应用于鸡TRIM39.2对IBDV和ALV‑J等禽类RNA病毒复制调控的机制研究,具有深远意义,弥补了鸡TRIM39.2抗体制备及研究的空白;为鸡抗IBDV和ALV‑J等禽类RNA病毒感染和免疫调节的机制研究提供新思路。
-
公开(公告)号:CN118185973A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410398537.1
申请日:2024-04-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/70 , C07K16/06 , C07K16/40 , C12N9/10 , G01N33/573 , G01N33/68 , A61K39/395 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,尤其涉一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白及制备方法及应用、多克隆抗体及制备方法及应用,包括以下步骤:以鸡巨噬细胞系HD11总RNA反转录后的cDNA为模版,进行PCR扩增获得编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;将扩增获得的编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因插入到pColdI载体的酶切位点之间获得重组载体;将所述原核表达载体转入到感受态细胞中,得到重组菌;将所述重组菌进行培养,当培养液的OD_600值为0.6~0.8时,加入IPTG进行诱导表达,经分离、纯化、复性,得到鸡TRIM27.2截短体重组蛋白。本发明构建的鸡TRIM27.2截短体重组蛋白,避免全长表达不稳定的缺点,同时免疫效果更加稳定且产生的抗体水平较高,制备的鸡TRIM27.2的多克隆抗体能用于验证TRIM27.2对IBDV等病毒复制调控的机制。
-
公开(公告)号:CN117683813A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311701086.6
申请日:2023-12-12
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
Abstract: 本发明提供了DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体和NC_006127.4位点敲除载体,属于基因编辑技术领域。本发明通过设计靶向EE0.6序列的sgRNA和靶向NC_006127.4位点的sgRNA,设计oligo引物,将双链oligo与PX458质粒、PX461连接,获得不同的重组质粒,本发明还制备了双sgRNA敲除载体,并将不同的重组质粒导入DF‑1细胞中,获得了不同的EE0.6位点和NC_006127.4的敲除载体,并进行了敲除效率验证。结果表明,DF‑1细胞中EE0.6位点敲除载体以及NC_006127.4位点敲除载体构建成功,为DF‑1细胞外源靶基因高效整合奠定了基础。
-
公开(公告)号:CN115927661A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202211171244.7
申请日:2022-09-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种鉴别肉鸡黄皮肤性状的SNP分子标记及其在检测鸡黄色皮肤性状上的应用,所述分子标记位于鸡基因组的24号染色体上,核苷酸序列如SEQ 1所示;所述分子标记位于第‑104位点,突变碱基为C或G。应用包括以下步骤:步骤1)、提取鸡的基因组DNA;步骤2)、针对BCO2(G‑104C)设计特异性扩增引物BCO2‑F1和BCO2‑R1,再以步骤1)的DNA为模板进行PCR扩增反应,获得PCR产物;其中,BCO2‑F1序列如SEQ ID NO.2,BCO2‑R1序列如SEQ ID NO.3;步骤3)、将步骤2)得到的PCR产物进行基因序列测序,通过基因测序序列和峰图判定鸡肤色基因型。通过本发明,为有目的地对鸡黄皮肤性状进行选择提供科学依据,通过检测可完成育种群在目标鸡黄皮肤上的纯化。
-
公开(公告)号:CN113684281A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202110933694.4
申请日:2021-08-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种采用SNP分子标记技术鉴别润州凤头白鸭黑色喙性状的方法,所述分子标记位于润州凤头白鸭基因组的11号染色体上,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述分子标记位于第28397位点,突变碱基为A或T,同时利用该分子标记设计引物(SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3)进行PCR扩增检测。将所得扩增产物进行直接测序后判定受测个体基因型,可以确定润州凤头白鸭黑色喙这一性状,为有目的地对凤头白鸭喙色性状进行选择提供依据,提高润州凤头白鸭黑色喙的一致性。规范我国鸭遗传资源的生产经营,可以为润州凤头白鸭遗传资源保护提供有效保障,支持和引导鸭遗传资源监测评估。
-
公开(公告)号:CN110060739B
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN201910343281.3
申请日:2019-04-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种水禽PCM遗传多样性评价方法,该方法是通过对水禽(鸭/鹅)初生重(g)、成年体重(g)、72周龄产蛋量(个);1号染色体(%)、Z染色体(%)、W染色体(%)的相对长度;以及群体有效等位基因数、杂合度、多态信息含量进行测定,进一步采用主成分分析法对上述9个指标进行多指标综合评价,最终完成水禽遗传资源的多样性综合评价。相对于现有技术,本发明方法有效解决了单一指标难以评估水禽遗传多样性的技术难题,全面展现了水禽遗传多样性的全貌,为水禽(鸭/鹅)合理保种和科学选育提供有效的技术支撑,具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN111850021A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010499241.0
申请日:2020-06-04
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种缩短浙东白鹅就巢周期的方法,包括以下步骤:(1)从鹅的卵巢组织提取总RNA,并扩增出鹅AMH基因CDS区序列,构建原核表达载体;(2)将上述载体转化重组产物,构建重组表达质粒;(3)将上述重组表达质粒转化到大肠杆菌中培养,诱导,收集菌体,采用超声波破碎后,离心得含有蛋白的包涵体;(4)从上述包涵体中分离纯化蛋白,得重组融合蛋白;(5)将纯化的重组融合蛋白制成疫苗,免疫产蛋鹅。相对于现有技术,本发明方法能够有效缩短浙东白鹅的就巢周期,技术操作方便,使用效果稳定,为提高种鹅的产蛋性能提供新解决方案,具有良好的潜在大规模应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-