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公开(公告)号：CN119709671A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411935983.8
申请日：2024-12-26
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了香草醇氧化酶突变体及其制备方法和应用，野生型香草醇氧化酶来自简青霉Penicillium simplicissimum，使用定向进化的手段对其活性中心进行改造，得到了具有较高活性、顺反选择性和顺式异丁香酚产率的香草醇氧化酶突变体，所述突变为S106L、L316F或I468L中的至少一种。本发明实现了由廉价4‑丙基愈创木酚向顺式异丁香酚的高效合成，有利于顺式异丁香酚的工业化合成与应用。
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公开(公告)号：CN119220511A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411446057.4
申请日：2024-10-16
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种还原型辅酶NADH氧化酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第156位、第158位、第294位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第156位甘氨酸Gly突变为丙氨酸Ala，第158位异亮氨酸Ile突变为组氨酸His，第294位异亮氨酸Ile突变为苯丙氨酸Phe。本发明通过NADH氧化酶的活性位点进行突变，最终获得的突变体提高了还原型辅酶NADH还原为氧化型辅酶NAD+的再生效率。
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公开(公告)号：CN119193516A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411254901.3
申请日：2024-09-09
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了耐热葡萄糖脱氢酶突变体及其制备方法，具体包括5种葡萄糖脱氢酶突变体，分别为E96I、I183V、D255M、E96I/I183V和E96I/D255M。酶活性测定的结果显示，本发明提供的葡萄糖脱氢酶突变体具有良好的耐热性，在高温处理后，与原始酶相比仍具备较高酶活；本发明提供的葡萄糖脱氢酶突变体适用于高温条件下建立NADH和NADPH再生体系，为工业生物催化和制药应用提供了高效、低成本的新选择。
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公开(公告)号：CN119082063A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411383113.4
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的异丙醇脱氢酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第18位、第91位、第143位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第18位异亮氨酸Ile突变为亮氨酸Leu，第91位丙氨酸Ala突变为甘氨酸Gly，第143位异亮氨酸Ile突变为丙氨酸Ala。与野生型的异丙醇脱氢酶相比，本发明提供的异丙醇脱氢酶突变体以廉价的异丙醇作为底物，可以还原氧化型辅酶NAD+为还原型辅酶NADH，实现辅酶的高效循环再生，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN119876079A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510046363.7
申请日：2025-01-13
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了多聚磷酸激酶突变体及其制备方法和应用，野生型多聚磷酸激酶来自铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa PAO1，使用定向进化的手段对其活性位点进行突变，得到了催化合成ATP活性高的多聚磷酸激酶突变体，其对底物ADP或AMP的相对活性远高于野生型，所述突变为D307M、W408A、Y431P中的至少一种，或E304V、P331S、Y431P中的至少一种。本发明实现了由廉价底物向高价值产物的高效合成，有助于ATP的工业生产，在医药等领域中具有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119709670A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411935971.5
申请日：2024-12-26
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了4‑丙基愈创木酚氧化酶突变体及其制备方法和应用，野生型4‑丙基愈创木酚氧化酶来自简青霉Penicillium simplicissimum，使用定向进化的手段对其活性中心进行改造，得到了具有较高活性、顺反选择性和反式异丁香酚产率的4‑丙基愈创木酚氧化酶突变体D170E、S426T、S50Q/D170E、D170E/L411V和D170E/L411V/S106C，实现了由廉价4‑丙基愈创木酚向高价值的反式异丁香酚的高效合成，有利于反式异丁香酚的工业化合成与应用。
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公开(公告)号：CN119162149A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411388871.5
申请日：2024-10-08
Applicant: 南京大学
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12P7/18 , C02F3/34 , C12N11/00 , C12R1/19 , C02F101/34 , C02F101/36
Abstract: 本发明公开了高效降解环氧氯丙烷的环氧化物水解酶突变体及其应用，野生型环氧化物水解酶来自放射性土壤杆菌（Agrobacterium radiobacter AD1），使用定向进化的手段对其进行改造，筛选出高效降解环氧氯丙烷的环氧化物水解酶突变体，所述突变包括D131N、Q134M、C248M中的至少一种。本发明提供的环氧化物水解酶突变体能够对环氧氯丙烷进行高效精准降解，并产生高附加值产物3‑氯‑1,2‑丙二醇，突变体D131N/Q134M/C248M的降解效率可达50%，是野生型的2倍；本发明提供的环氧化物水解酶突变体在水相常温下即可高效降解环氧氯丙烷，无需外加温控设备，具有高效率、低能耗、高选择性的特点，具备绿色低碳、经济便捷的产业应用优势，有利于污染物的进一步降解和资源化利用。
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公开(公告)号：CN118995650A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411254902.8
申请日：2024-09-09
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了高pH耐受能力的葡萄糖脱氢酶突变体及其应用，具体包括4种葡萄糖脱氢酶突变体，分别为G28V/A55N、G28V/A55M、V72L/L122M和L122V。酶活性测定的结果显示，本发明提供的4种葡萄糖脱氢酶突变体具有高pH耐受能力，突变体G28V/A55N、G28V/A55M和V72L/L122M在碱性溶液中的酶活优于原始酶，G28V/A55M和L122V在酸性溶液中的酶活性优于原始酶；本发明提供的葡萄糖脱氢酶突变体能够提高D‑葡萄糖酸和NADH的生产效率和产品质量，可应用于食品工业、制药行业等诸多领域，并且有助于新技术和新方法的开发。
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公开(公告)号：CN119391663A
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202411298449.0
申请日：2024-09-18
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高产诺卡酮的醇脱氢酶突变体及其制备方法，对来源于益智（Alpinia oxyphylla）的醇脱氢酶进行定点突变，所述突变为S197V、M144C、L196A中的至少一种。本发明提供的醇脱氢酶突变体具有高催化活性，突变体M144C/L196A/S197V催化诺卡醇制备诺卡酮的产率可达99%，是原始酶的4.32倍；所述醇脱氢酶突变体催化合成诺卡酮所需的生产工艺简单、反应条件温和、生产过程环保，有利于诺卡酮的工业化生产，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN119242600A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411383853.8
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM3突变体及其在高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第171位、第87位、第307位、第437位这四个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第171位组氨酸His突变为亮氨酸Leu，第87位苯丙氨酸Phe突变为丙氨酸Ala，第307位谷氨酰胺Gln突变为组氨酸His，第437位亮氨酸Leu突变为缬氨酸Val；通过对细胞色素P450BM3的活性位点进行突变，最终获得了具有高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素的P450BM3突变体。
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