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公开(公告)号：CN118440939A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410523410.8
申请日：2024-04-28
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学 , 国药赛诺根生物科学(北京)有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/30 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开一种启动子突变体及其应用。本发明基于启动子PsrfA，通过对其核心区域以及两核心区域的间隔序列进行突变，获得了诱导表达活性较野生型提高的PsrfA启动子突变体，同时还提供了含所述启动子突变体的载体。利用本发明所述启动子突变体或所述载体，可提高所表达的蛋白的表达量，在蛋白表达领域具有广阔应用前景。同时，在所述启动子突变体的基础上，本发明还提供了一种NADH焦磷酸酶表达量提高的重组质粒和重组菌，可将其用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物催化反应中，有利于还原型烟酰胺单核苷酸的大规模高效生产。
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公开(公告)号：CN118931864A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202410065678.1
申请日：2024-01-16
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学 , 国药赛诺根生物科学(北京)有限公司
Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用。本发明以烟酰胺磷酸核糖转移酶野生型为亲本，通过对其第75位氨基酸或第83位氨基酸进行点突变，获得了活性较野生型显著提高的突变体以及用于表达所述突变体的重组酿酒酵母。相较于野生型，利用本发明所述突变体，可以显著提高NMN产量。其中，对第75位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了4.3倍，对第83位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了5.3倍。本发明不仅为进一步提高NMN产量提供了理论基础，也有利于NMN的规模化生产，促进NMN产业的发展。
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公开(公告)号：CN119709792A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202311280337.8
申请日：2023-09-28
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产烟酰胺单核苷酸的重组菌及其制备方法和应用。本发明通过对编码烟酰胺腺苷酸转移酶的基因序列进行改造、构建重组质粒并转入宿主菌中，获得了可利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的重组菌。在此基础上，本发明通过插入与烟酰胺单核苷酸合成相关酶的编码基因，敲除宿主菌中与5‑磷酸核糖‑1‑焦磷酸竞争旁路途径、碳流竞争旁路途径、烟酰胺单核苷酸下游代谢分解途径相关的基因以及优化催化体系条件，进一步提高了所构建的重组菌利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的效率，使其全细胞催化产量高达760mg/L。本发明不仅有助于烟酰胺单核苷酸的工业化生产，还具有操作简单、成本低等优点。
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公开(公告)号：CN118599804A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410410268.6
申请日：2024-04-07
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺核糖激酶突变体在大肠杆菌中的高效异源表达及其应用。本发明提供了一种能够在大肠杆菌中异源表达的烟酰胺核糖激酶及其突变体，所述突变体的烟酰胺核糖激酶活性较亲本有了明显提升。在所述烟酰胺核糖激酶及其突变体的基础上，本发明还提供了一种高效异源表达所述烟酰胺核糖激酶的方法，即在构建重组质粒时，通过在质粒中引入核糖体结合位点、插入特定的启动子序列等，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活力较对照更高。此外，本发明还提供了培养表达所述烟酰胺核糖激酶的重组菌的方法，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活最高为208.3U/mL。本发明有利于β‑烟酰胺单核苷酸的高效生物合成，适合工业化生产和应用。
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公开(公告)号：CN116286725A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310296032.X
申请日：2023-03-23
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体及其应用。本发明提供了一种优化的NADH焦磷酸酶，其催化性能较优化前得到了提高。在此基础上，本发明通过定点突变，还提供了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体。此外，本发明还提供了进一步提高所提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体的催化性能的方法，在构建其重组质粒时，通过在质粒中插入特定的启动子序列和核糖体结合位点等，可以使诱导表达所得的NADH焦磷酸酶的催化性能较亲本更高。本发明提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体不仅催化性能高，还具有良好的热稳定性，可用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物合成，适合于工业化生产和应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118995554A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411257100.2
申请日：2024-09-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/67 , C12N15/70 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N9/78 , C12N9/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌整合表达体系及其在酶高效表达中的应用。本发明从3个方面系统地优化了大肠杆菌的整合表达系统。首先，从大肠杆菌基因组ORI区域的18个位点中筛选出表达活性最高的整合位点slmA；其次，鉴定了大肠杆菌中的16个内源启动子并将其与T7启动子相结合构建多启动子；随后，在底盘细胞水平上优化了T7RNA聚合酶的表达。得到的组成型高效整合表达体系与质粒型重组表达方式相比，GFP表达量提升至2倍左右。最后，将其应用于腈水解酶和透明质酸酶的整合表达，实现了稳定高效的酶表达，酶活与质粒水平相当。总之，本发明提供了一种稳定高效的基因表达方法，无需抗生素和诱导剂，使其成为合成生物学、酶工程和相关应用的有力工具。
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公开(公告)号：CN117866931A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410031472.7
申请日：2024-01-09
Applicant: 江南大学 , 山东焦点福瑞达生物股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种胞外分泌表达的透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于链球菌噬菌体的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在枯草芽孢杆菌体系实现了重组表达，经过信号肽替换后胞外酶活为1.86×104U/mL，蛋白分子量为39.5kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为6，最适反应温度为40℃，多种金属离子对其具有促进作用。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性。本发明利用优化的培养基，在20‑L发酵罐中进行产酶发酵，重组菌胞外产透明质酸裂解酶的最高活性在40h可达1.07×105U/mL，这是目前为止文献中有关透明质酸裂解酶胞外分泌表达的首次报道。
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公开(公告)号：CN117562249A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311564126.7
申请日：2023-11-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改善溃疡性结肠炎的发酵物及其制备方法和应用，本发酵物是以含乳蛋白水解物为发酵底物，以植物乳杆菌为发酵菌发酵得到；所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BHR4，已于2023年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存地址为北京市北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.26686。本发明通过实验发现以植物乳杆菌BHR4为发酵菌发酵含乳蛋白水解物得到的发酵物具有高抗氧化活性；可保护肠道上皮的屏障功能，且显著改善肠道微生物β多样性，并显著改善溃疡性结肠炎，维护肠道健康。可应用于制备预防或改善溃疡性结肠炎的药物、食品或保健品。
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公开(公告)号：CN115232669B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210628316.X
申请日：2022-08-11
Applicant: 贵州山茶产业综合开发有限公司 , 清华大学无锡应用技术研究院 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种含角鲨烯的茶油制备方法。本发明所述的方法包括油茶籽粉酶解，乳状液层酶解，乳状液层破乳，油茶籽粕的萃取步骤；通过粒径不超过40目的油茶籽粉与水混合，以及特定酶制剂A进行油茶籽粉酶解，然后对乳状液层利用特定酶制剂B进一步酶解，冷冻破乳，再合并油层，利用茶油原液对油茶籽粕进行萃取。本方法可充分释放油茶籽细胞内的及提取所得乳状液层中的油相组分，同时以提取所得的茶油原液作为萃取剂，充分萃取茶籽籽粕中的角鲨烯，相较于现有水酶法在不使用额外有机溶剂的前提下，获得了更高的角鲨烯含量和更高茶油提取率的茶油，本工艺过程简单、环保，获得的茶油无
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公开(公告)号：CN116286764B
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310217653.4
申请日：2023-03-08
Applicant: 江南大学 , 山东焦点福瑞达生物股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于弗氏柠檬酸杆菌的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在大肠杆菌体系实现了重组表达，经过启动子优4化后酶活为2.64×10 U/mL，蛋白分子量为87kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为5.5，最适反应温度为37℃。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性与耐盐性，可以耐受1.5M的氯化钠溶液。该酶对透明质酸有着较高的底物特异性。本发明利用优化的培养基，在5‑L发酵罐中，重组菌产透明质酸裂解酶的最高活性在14h6可达2.65×10U/mL。
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