-
公开(公告)号：CN118440939A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410523410.8
申请日：2024-04-28
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学 , 国药赛诺根生物科学(北京)有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/30 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开一种启动子突变体及其应用。本发明基于启动子PsrfA，通过对其核心区域以及两核心区域的间隔序列进行突变，获得了诱导表达活性较野生型提高的PsrfA启动子突变体，同时还提供了含所述启动子突变体的载体。利用本发明所述启动子突变体或所述载体，可提高所表达的蛋白的表达量，在蛋白表达领域具有广阔应用前景。同时，在所述启动子突变体的基础上，本发明还提供了一种NADH焦磷酸酶表达量提高的重组质粒和重组菌，可将其用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物催化反应中，有利于还原型烟酰胺单核苷酸的大规模高效生产。
-
公开(公告)号：CN118931864A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202410065678.1
申请日：2024-01-16
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学 , 国药赛诺根生物科学(北京)有限公司
Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用。本发明以烟酰胺磷酸核糖转移酶野生型为亲本，通过对其第75位氨基酸或第83位氨基酸进行点突变，获得了活性较野生型显著提高的突变体以及用于表达所述突变体的重组酿酒酵母。相较于野生型，利用本发明所述突变体，可以显著提高NMN产量。其中，对第75位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了4.3倍，对第83位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了5.3倍。本发明不仅为进一步提高NMN产量提供了理论基础，也有利于NMN的规模化生产，促进NMN产业的发展。
-
公开(公告)号：CN118599804A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410410268.6
申请日：2024-04-07
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺核糖激酶突变体在大肠杆菌中的高效异源表达及其应用。本发明提供了一种能够在大肠杆菌中异源表达的烟酰胺核糖激酶及其突变体，所述突变体的烟酰胺核糖激酶活性较亲本有了明显提升。在所述烟酰胺核糖激酶及其突变体的基础上，本发明还提供了一种高效异源表达所述烟酰胺核糖激酶的方法，即在构建重组质粒时，通过在质粒中引入核糖体结合位点、插入特定的启动子序列等，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活力较对照更高。此外，本发明还提供了培养表达所述烟酰胺核糖激酶的重组菌的方法，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活最高为208.3U/mL。本发明有利于β‑烟酰胺单核苷酸的高效生物合成，适合工业化生产和应用。
-
公开(公告)号：CN119709792A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202311280337.8
申请日：2023-09-28
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产烟酰胺单核苷酸的重组菌及其制备方法和应用。本发明通过对编码烟酰胺腺苷酸转移酶的基因序列进行改造、构建重组质粒并转入宿主菌中，获得了可利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的重组菌。在此基础上，本发明通过插入与烟酰胺单核苷酸合成相关酶的编码基因，敲除宿主菌中与5‑磷酸核糖‑1‑焦磷酸竞争旁路途径、碳流竞争旁路途径、烟酰胺单核苷酸下游代谢分解途径相关的基因以及优化催化体系条件，进一步提高了所构建的重组菌利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的效率，使其全细胞催化产量高达760mg/L。本发明不仅有助于烟酰胺单核苷酸的工业化生产，还具有操作简单、成本低等优点。
-
公开(公告)号：CN116286725A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310296032.X
申请日：2023-03-23
Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体及其应用。本发明提供了一种优化的NADH焦磷酸酶，其催化性能较优化前得到了提高。在此基础上，本发明通过定点突变，还提供了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体。此外，本发明还提供了进一步提高所提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体的催化性能的方法，在构建其重组质粒时，通过在质粒中插入特定的启动子序列和核糖体结合位点等，可以使诱导表达所得的NADH焦磷酸酶的催化性能较亲本更高。本发明提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体不仅催化性能高，还具有良好的热稳定性，可用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物合成，适合于工业化生产和应用。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116179386B
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202310247280.5
申请日：2023-03-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达右旋糖酐酶的毕赤酵母重组菌株及其应用。本发明通过系统改造启动子、信号肽及共表达分子伴侣，成功实现了高水平胞外表达右旋糖酐酶，胞外酶活达到159.68U/mL，相较于未改造的出发菌株，酶活提高了2.1倍。进一步通过5L罐上放大发酵，酶活力达到了3257.23U/mL。
-
公开(公告)号：CN116286764A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310217653.4
申请日：2023-03-08
Applicant: 江南大学 , 山东焦点福瑞达生物股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种透明质酸裂解酶及其重组菌与应用。本发明提供了一种来源于弗氏柠檬酸杆菌的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在大肠杆菌体系实现了重组表达，经过启动子优化后酶活为2.64×104U/mL，蛋白分子量为87kDa。酶学性质表征实验表明其为内切酶，能够在pH 5‑8范围内发挥透明质酸降解作用，最适反应pH为5.5，最适反应温度为37℃。该酶具有良好的热稳定性，pH稳定性与耐盐性，可以耐受1.5M的氯化钠溶液。该酶对透明质酸有着较高的底物特异性。本发明利用优化的培养基，在5‑L发酵罐中，重组菌产透明质酸裂解酶的最高活性在14h可达2.65×106U/mL。
-
公开(公告)号：CN114574469B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202210298614.7
申请日：2022-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于定向进化改造的角蛋白酶突变体及其应用，本发明提供了一种基于易错PCR技术，定向进化获得高酶活突变体的方法。本发明共获得了9个酶活提高的突变体，其中突变体T8(R72S/F107Y/N291S/N295D)的酶活水平最高，为2382U/mL，是对照菌酶活的2.1倍。采用培养基组分优化及7L发酵罐扩大培养的发酵研究策略，实现了突变菌产酶量的提升，角蛋白酶活力可达8448U/mL，本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效的策略。采用角蛋白酶与胰蛋白酶复配降解角蛋白废弃物，探究酶解法的最佳条件，为实际生产中高效利用羽毛、提高蛋白利用率提供了理论基础。
-
公开(公告)号：CN111763676B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202010700315.2
申请日：2018-08-16
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/50 , C12R1/125 , C12R1/085 , C12R1/10 , C12R1/11 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种提高角蛋白酶异源表达酶活的启动子及其应用，属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌，其中7种能够提高角蛋白酶表达量，PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高，达到2605U/mL，相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL，是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平，能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法，进行大量文库筛选，工作量大、周期长、成本高，该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量，提高了高表达效率。
-
公开(公告)号：CN114920826A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210685024.X
申请日：2022-06-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种III型类人胶原蛋白及其编码基因、表达载体和重组酵母菌，本发明在保持人源Ⅲ型胶原蛋白的Gly‑X‑Y基本骨架基础上对其进行改造，提供一种亲水性较好的Ⅲ型类人胶原蛋白(hlCOLⅢ)，该Ⅲ型类人胶原蛋白能够在毕赤酵母中可溶性分泌表达，并进一步通过启动子改造、高拷贝菌株筛选、发酵优化及高密度发酵等技术实现hlCOLⅢ的高产。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
65
records
(took 0.165 seconds)
