公开(公告)号：CN118440939A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410523410.8

申请日：2024-04-28

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学 ,  国药赛诺根生物科学(北京)有限公司

Inventor： 史劲松 ,  李雪媛 ,  乔治·马歇尔 ,  龚劲松 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒 ,  徐国强

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/30 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开一种启动子突变体及其应用。本发明基于启动子PsrfA，通过对其核心区域以及两核心区域的间隔序列进行突变，获得了诱导表达活性较野生型提高的PsrfA启动子突变体，同时还提供了含所述启动子突变体的载体。利用本发明所述启动子突变体或所述载体，可提高所表达的蛋白的表达量，在蛋白表达领域具有广阔应用前景。同时，在所述启动子突变体的基础上，本发明还提供了一种NADH焦磷酸酶表达量提高的重组质粒和重组菌，可将其用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物催化反应中，有利于还原型烟酰胺单核苷酸的大规模高效生产。

公开(公告)号：CN116286725A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310296032.X

申请日：2023-03-23

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  刘烨 ,  乔治·马歇尔 ,  许正宏 ,  史劲松 ,  徐国强 ,  苏畅 ,  李恒

IPC: C12N9/14 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体及其应用。本发明提供了一种优化的NADH焦磷酸酶，其催化性能较优化前得到了提高。在此基础上，本发明通过定点突变，还提供了一种催化性能提高的NADH焦磷酸酶突变体。此外，本发明还提供了进一步提高所提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体的催化性能的方法，在构建其重组质粒时，通过在质粒中插入特定的启动子序列和核糖体结合位点等，可以使诱导表达所得的NADH焦磷酸酶的催化性能较亲本更高。本发明提供的优化的NADH焦磷酸酶及其突变体不仅催化性能高，还具有良好的热稳定性，可用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物合成，适合于工业化生产和应用。

公开(公告)号：CN119709792A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202311280337.8

申请日：2023-09-28

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学

Inventor： 史劲松 ,  程琳 ,  乔治·马歇尔 ,  许正宏 ,  龚劲松 ,  徐国强 ,  苏畅 ,  李恒

IPC: C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12N15/55 ,  C12N15/61 ,  C12N15/70 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产烟酰胺单核苷酸的重组菌及其制备方法和应用。本发明通过对编码烟酰胺腺苷酸转移酶的基因序列进行改造、构建重组质粒并转入宿主菌中，获得了可利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的重组菌。在此基础上，本发明通过插入与烟酰胺单核苷酸合成相关酶的编码基因，敲除宿主菌中与5‑磷酸核糖‑1‑焦磷酸竞争旁路途径、碳流竞争旁路途径、烟酰胺单核苷酸下游代谢分解途径相关的基因以及优化催化体系条件，进一步提高了所构建的重组菌利用烟酰胺和木糖产烟酰胺单核苷酸的效率，使其全细胞催化产量高达760mg/L。本发明不仅有助于烟酰胺单核苷酸的工业化生产，还具有操作简单、成本低等优点。

公开(公告)号：CN118931864A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202410065678.1

申请日：2024-01-16

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学 ,  国药赛诺根生物科学(北京)有限公司

Inventor： 徐国强 ,  惠小寒 ,  乔治·马歇尔 ,  许正宏 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  李恒

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/30 ,  C12P19/18 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺磷酸核糖转移酶突变体及其应用。本发明以烟酰胺磷酸核糖转移酶野生型为亲本，通过对其第75位氨基酸或第83位氨基酸进行点突变，获得了活性较野生型显著提高的突变体以及用于表达所述突变体的重组酿酒酵母。相较于野生型，利用本发明所述突变体，可以显著提高NMN产量。其中，对第75位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了4.3倍，对第83位氨基酸进行突变所得突变体的NMN产量最高比野生型提高了5.3倍。本发明不仅为进一步提高NMN产量提供了理论基础，也有利于NMN的规模化生产，促进NMN产业的发展。

公开(公告)号：CN118599804A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410410268.6

申请日：2024-04-07

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  毛歆安 ,  乔治·马歇尔 ,  史劲松 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒 ,  徐国强

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺核糖激酶突变体在大肠杆菌中的高效异源表达及其应用。本发明提供了一种能够在大肠杆菌中异源表达的烟酰胺核糖激酶及其突变体，所述突变体的烟酰胺核糖激酶活性较亲本有了明显提升。在所述烟酰胺核糖激酶及其突变体的基础上，本发明还提供了一种高效异源表达所述烟酰胺核糖激酶的方法，即在构建重组质粒时，通过在质粒中引入核糖体结合位点、插入特定的启动子序列等，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活力较对照更高。此外，本发明还提供了培养表达所述烟酰胺核糖激酶的重组菌的方法，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活最高为208.3U/mL。本发明有利于β‑烟酰胺单核苷酸的高效生物合成，适合工业化生产和应用。