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公开(公告)号：CN114634992B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202210306494.0
申请日：2022-03-25
Applicant: 西南交通大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明首次发现以该Indel标记引物与探针为核心的qPCR方法能够特异性鉴定暗紫贝母，仅有暗紫贝母在出现扩增曲线，呈现阳性结果，其它贝母品种显示为阴性结果。可用于暗紫贝母基原植物与药材的特异性分子鉴定。本发明具有以下优点：特异性好，仅有暗紫贝母在出现扩增曲线，呈现阳性结果；灵敏度高，qPCR的最低检测浓度(DNA)为0.1543ng/μL；步骤少、检测周期短：操作时间仅需1.5‑2.5小时；重现性好：已经进行了10次以上的生物学重复，重现性达到100％。
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公开(公告)号：CN112359135B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202011465322.5
申请日：2020-12-14
Applicant: 西南交通大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种快速鉴定太白贝母的Indel标记引物、方法及用途，属中药材来源品种鉴定技术领域。本发明首次发现以该Indel标记引物为核心的PCR方法能够特异性鉴定太白贝母，仅有太白贝母在302bp位置显示阳性结果，其它贝母品种显示为阴性结果。可用于太白贝母基原植物与药材的特异性分子鉴定。本发明具有以下优点：①特异性好，仅有太白贝母在302bp位置显示出阳性结果；②灵敏度高，PCR的最低检测浓度(DNA)为0.239ng/μL；③步骤少、检测周期短：操作时间仅需2‑3小时；④重现性好：已经进行了10次以上的生物学重复，重现性达到100％。
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公开(公告)号：CN110760489A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201911124598.4
申请日：2019-11-18
Applicant: 西南交通大学
Abstract: 本发明提供一种川芎咖啡酸-O-甲基转移酶突变体及其用途，属于生物工程技术领域。突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示；突变体的获得是基于发现318位氨基酸是影响活性的一个关键位点并用定点突变将其318位的异亮氨酸残基(I)突变成苏氨酸残基(T)；利用生物工程技术将突变体重组蛋白表达纯化分离出来。转移酶突变体的应用会明显提高作为催化剂时的咖啡酸甲酯转化效率，在酶法合成阿魏酸甲酯的方法中具有较好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106906202A
公开(公告)日：2017-06-30
申请号：CN201710151216.1
申请日：2017-03-14
Applicant: 西南交通大学
Abstract: 本发明公开了一种生产阿魏酸的固定化基因工程酶的制备方法，将海藻酸钠于50～85℃水中搅拌溶解，使其质量分数为0.5％～4.5％，冷却至室温后加入100μg重组化川芎咖啡酸‑3‑O‑甲基转移酶，在4℃层析冷柜中用磁力搅拌器搅拌混合均匀，用5mL注射器从10cm左右高度滴入2.5～40g/L CaCl2溶液中，4℃固定化0.5～10h后，用蒸馏水洗涤2～3次并抽滤掉表面水分，放于4℃冰箱保存。本发明的固定化酶具有不溶于水，易与产物分离，稳定性好。与游离酶相比，相对酶活力为75.43％，连续使用12次，酶活力仍保留34.10％。为工业化生产阿魏酸打下良好的基础，同时也降低了酶的使用成本。
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公开(公告)号：CN119799664A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411911736.4
申请日：2024-12-24
Applicant: 西南交通大学
Abstract: 本发明公开了一种黄连双加氧酶基因、应用、表达载体和宿主菌，以苄基异喹啉类生物碱（包括小檗碱、表小檗碱、黄连碱、非洲防己碱、巴马汀）为底物，进行双羟化修饰的催化方法。本发明涉及的双加氧酶基因序列来源于传统中药黄连，是黄连中苄基异喹啉类生物碱生物合成路径上的关键基因之一。基于该基因显著的底物和反应杂泛性，本发明为黄连育种和黄连药用成分的工业化生产提供重要理论依据，为修饰复杂的有机化合物或天然产物提供重要参考。
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公开(公告)号：CN112359135A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011465322.5
申请日：2020-12-14
Applicant: 西南交通大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种快速鉴定太白贝母的Indel标记引物、方法及用途，属中药材来源品种鉴定技术领域。本发明首次发现以该Indel标记引物为核心的PCR方法能够特异性鉴定太白贝母，仅有太白贝母在302bp位置显示阳性结果，其它贝母品种显示为阴性结果。可用于太白贝母基原植物与药材的特异性分子鉴定。本发明具有以下优点：①特异性好，仅有太白贝母在302bp位置显示出阳性结果；②灵敏度高，PCR的最低检测浓度(DNA)为0.239ng/μL；③步骤少、检测周期短：操作时间仅需2‑3小时；④重现性好：已经进行了10次以上的生物学重复，重现性达到100％。
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公开(公告)号：CN110760489B
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN201911124598.4
申请日：2019-11-18
Applicant: 西南交通大学
Abstract: 本发明提供一种川芎咖啡酸‑O‑甲基转移酶突变体及其用途，属于生物工程技术领域。突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示；突变体的获得是基于发现318位氨基酸是影响活性的一个关键位点并用定点突变将其318位的异亮氨酸残基(I)突变成苏氨酸残基(T)；利用生物工程技术将突变体重组蛋白表达纯化分离出来。转移酶突变体的应用会明显提高作为催化剂时的咖啡酸甲酯转化效率，在酶法合成阿魏酸甲酯的方法中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114634992A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210306494.0
申请日：2022-03-25
Applicant: 西南交通大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明首次发现以该Indel标记引物与探针为核心的qPCR方法能够特异性鉴定暗紫贝母，仅有暗紫贝母在出现扩增曲线，呈现阳性结果，其它贝母品种显示为阴性结果。可用于暗紫贝母基原植物与药材的特异性分子鉴定。本发明具有以下优点：特异性好，仅有暗紫贝母在出现扩增曲线，呈现阳性结果；灵敏度高，qPCR的最低检测浓度(DNA)为0.1543ng/μL；步骤少、检测周期短：操作时间仅需1.5‑2.5小时；重现性好：已经进行了10次以上的生物学重复，重现性达到100％。
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