公开(公告)号：CN106047892B

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201610552488.8

申请日：2016-07-14

Applicant: 西南交通大学

Inventor： 廖海 ,  周嘉裕 ,  俞继华 ,  李洋洋 ,  向缅 ,  朱建全

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/70 ,  C07K14/81

Abstract: 本发明公开了一种川芎α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂基因SEQ ID NO.1及其编码的蛋白SEQ ID NO.2，以及表达产物的纯化方法。与水稻(Oryza sativa(L.)Genbank:P29421)α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂的相似性为31.60％。LASI重组蛋白不仅能够有效抑制小菜蛾的α‑淀粉酶的活性，抑制率33％，还能够抑制枯草杆菌蛋白酶的活性，抑制率为56.28％。本发明揭示了川芎根茎中一段新的α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂基因序列，这为抗虫/抗菌植物基因工程提供了有效的候选基因。

公开(公告)号：CN106047892A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610552488.8

申请日：2016-07-14

Applicant: 西南交通大学

Inventor： 廖海 ,  周嘉裕 ,  俞继华 ,  李洋洋 ,  向缅 ,  朱建全

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/70 ,  C07K14/81

CPC classification number: C07K14/81 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101

Abstract: 本发明公开了一种川芎α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂基因SEQ ID NO.1及其编码的蛋白SEQ ID NO.2，以及表达产物的纯化方法。与水稻(Oryza sativa(L.)Genbank:P29421)α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂的相似性为31.60％。LASI重组蛋白不仅能够有效抑制小菜蛾的α‑淀粉酶的活性，抑制率33％，还能够抑制枯草杆菌蛋白酶的活性，抑制率为56.28％。本发明揭示了川芎根茎中一段新的α‑淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂基因序列，这为抗虫/抗菌植物基因工程提供了有效的候选基因。

公开(公告)号：CN106906202A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710151216.1

申请日：2017-03-14

Applicant: 西南交通大学

Inventor： 廖海 ,  周嘉裕 ,  朱建全 ,  向缅 ,  李洋洋 ,  俞继华 ,  邓银 ,  张娴 ,  吴微波

IPC: C12N11/10 ,  C12N11/04 ,  C12P7/42

Abstract: 本发明公开了一种生产阿魏酸的固定化基因工程酶的制备方法，将海藻酸钠于50～85℃水中搅拌溶解，使其质量分数为0.5％～4.5％，冷却至室温后加入100μg重组化川芎咖啡酸‑3‑O‑甲基转移酶，在4℃层析冷柜中用磁力搅拌器搅拌混合均匀，用5mL注射器从10cm左右高度滴入2.5～40g/L CaCl2溶液中，4℃固定化0.5～10h后，用蒸馏水洗涤2～3次并抽滤掉表面水分，放于4℃冰箱保存。本发明的固定化酶具有不溶于水，易与产物分离，稳定性好。与游离酶相比，相对酶活力为75.43％，连续使用12次，酶活力仍保留34.10％。为工业化生产阿魏酸打下良好的基础，同时也降低了酶的使用成本。