公开(公告)号：CN106906202A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710151216.1

申请日：2017-03-14

Applicant: 西南交通大学

Inventor： 廖海 ,  周嘉裕 ,  朱建全 ,  向缅 ,  李洋洋 ,  俞继华 ,  邓银 ,  张娴 ,  吴微波

IPC: C12N11/10 ,  C12N11/04 ,  C12P7/42

Abstract: 本发明公开了一种生产阿魏酸的固定化基因工程酶的制备方法，将海藻酸钠于50～85℃水中搅拌溶解，使其质量分数为0.5％～4.5％，冷却至室温后加入100μg重组化川芎咖啡酸‑3‑O‑甲基转移酶，在4℃层析冷柜中用磁力搅拌器搅拌混合均匀，用5mL注射器从10cm左右高度滴入2.5～40g/L CaCl2溶液中，4℃固定化0.5～10h后，用蒸馏水洗涤2～3次并抽滤掉表面水分，放于4℃冰箱保存。本发明的固定化酶具有不溶于水，易与产物分离，稳定性好。与游离酶相比，相对酶活力为75.43％，连续使用12次，酶活力仍保留34.10％。为工业化生产阿魏酸打下良好的基础，同时也降低了酶的使用成本。