公开(公告)号：CN119932017A

公开(公告)日：2025-05-06

申请号：CN202411930816.4

申请日：2024-12-25

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ,  佛山大学

Inventor： 任红艳 ,  朱向星 ,  赵无迪 ,  唐冬生 ,  顾浩 ,  毕延震

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/78 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供了一种双串联碱基编辑器及其制备方法和应用，属于基因编辑技术领域。本发明所述双串联碱基编辑器由gRNA1‑tRNA‑gRNA2单元组件和腺嘌呤碱基编辑器重组得到；所述gRNA1针对靶基因1设计，包括靶基因1的gRNA靶特异性间隔区和gRNA骨架；所述gRNA2针对靶基因2设计，包括靶基因2的gRNA靶特异性间隔区和gRNA骨架。本发明提供的双串联碱基编辑器只需改变其中20bp的gRNA就可以靶向不同基因位点，实现在大型动物细胞上的多基因编辑，在不引入双链断裂的情况下实现精准安全的多基因编辑，且突变效率高于多质粒共转的碱基编辑器。

公开(公告)号：CN118956911A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411128147.9

申请日：2024-08-16

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 顾浩 ,  于钊 ,  吴桐 ,  毕延震 ,  任红艳 ,  陈矾 ,  周昌繁 ,  曾威

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种提高猪细胞多不饱和脂肪酸含量的方法，通过在猪细胞中过表达FADS2基因实现，具体为：采用本发明提供的FADS2基因过表达载体，利用电转法将其转染至猪细胞（如猪肾成纤维细胞），使用G418药物进行筛选，获得稳定高表达FADS2的单克隆细胞系。实验数据表明，本发明获得的猪单克隆细胞系，甘油三酯含量极显著下调，总脂肪酸含量极显著升高，多不饱和脂肪酸中ω‑3 PUFA、ω‑6 PUFA含量均极显著升高，ω‑3/ω‑6比值极显著提高，并显著上调了EPA、DHA、DPA、DGLA等的表达。本发明首次明确了FADS2基因在猪中的应用，为通过FADS2改良猪肉脂肪酸组成提供了理论基础和数据支撑。

公开(公告)号：CN113667674B

公开(公告)日：2024-02-27

申请号：CN202111002995.1

申请日：2021-08-30

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 张立苹 ,  毕延震 ,  华再东 ,  任红艳 ,  朱喆 ,  顾浩 ,  陈矾

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  A01K67/0276 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程的技术领域，具体涉及一种靶向切除猪CD164基因编码区DNA的成对编辑位点、使用方法及其应用，所述编辑位点包括T1和T2两个编辑位点，所述T1和T2两个编辑位点位于猪1号染色体CD164基因编码区的2外显子区域；其中T1编辑位点染色体坐标为75441814‑75441833，编码区坐标为246‑265；T2编辑位点染色体坐标为75442009‑75442028，编码区坐标为441‑460。本发明的两个能基于CRISPR技术有效编辑猪CD164基因的靶位点，可用于Cas9介导的猪CD164基因打靶，为研究CD164

公开(公告)号：CN116083481A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202210874272.9

申请日：2022-07-22

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 毕延震 ,  陈矾 ,  顾浩 ,  任红艳

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C07K14/495 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了ACVR2B在调控猪产肉性能中的应用及改良猪产肉性能的方法，属于基因干扰和基因敲除技术领域。本发明首次提出ACVR2B具有调控猪骨骼肌卫星细胞增殖分化的作用，采用本发明提供的siRNA干扰骨骼肌卫星细胞24h，ACVR2B的mRNA丰度显著下降，肌细胞增殖发育相关基因MyoD和MyoG的mRNA丰度显著上升；干扰48h后，ACVR2B的蛋白表达水平显著下降，MyoD和MyoG的蛋白表达水平显著上调。采用本发明构建的CRISPR/Cas9系统能够成功靶向敲除猪ACVR2B基因，在转录水平上，敲除后的单克隆细胞相较于对照组ACVR2B的mRNA丰度显著下降。

公开(公告)号：CN106086031B

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201610431774.9

申请日：2016-06-17

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 毕延震 ,  刘西梅 ,  华文君 ,  华再东 ,  任红艳 ,  李莉 ,  肖红卫 ,  张立苹 ,  郭冬 ,  郑新民

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了猪基因组中猪肌抑素基因编辑位点及其应用，属于生物技术和生物医学工程领域。本发明从猪肌抑素基因编码区中分离出1个基因编辑靶位点，其序列为5’‑GGCTGTGTAATGCATGTATGTGG‑3’，位于MSTN编码区1号外显子。该位点能被Cas9核酸内切酶特异性识别，从而介导双链断裂，然后和打靶载体发生同源重组，将突变基因或选择性标记基因等整合至受体细胞基因组的预定位点。统计结果表明，该位点打靶效率为80.5％。本发明提供的猪肌抑素基因编辑位点，为对该基因进行精确编辑提供了有效的靶标，为研制高瘦肉率的生猪新品种提供了新策略，也为探明肌抑素的分子机制和信号通路提供了可靠的手段和素材。

公开(公告)号：CN107603983A

公开(公告)日：2018-01-19

申请号：CN201710796222.2

申请日：2017-09-06

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 任红艳 ,  毕延震 ,  李莉 ,  华再东 ,  郑新民 ,  徐振宇 ,  刘西梅 ,  肖红卫 ,  华文君 ,  张立苹

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N15/89

Abstract: 本发明公开了一种小鼠RBM10基因编辑位点及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，以pDR274载体为骨架构建插入有小鼠RBM10基因编辑靶位点T1、T2的Cas9 gRNA表达载体，可高效敲除小鼠RBM10基因的编辑位点T1、T2。这两个编辑位点可用于Cas9介导的小鼠RBM10基因打靶，制备RBM10基因修饰小鼠本发明鉴定小鼠RBM10基因的高效编辑位点，并分析其打靶效率，为构建RBM10基因内源性敲除或定点敲入外源基因的转基因小鼠提供新途径。

公开(公告)号：CN105853021A

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201610152282.6

申请日：2016-03-17

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 郑新民 ,  肖红卫 ,  刘西梅 ,  毕延震 ,  张立苹 ,  华再东 ,  任红艳 ,  李莉 ,  华文君

IPC: A61D19/02

CPC classification number: A61D19/021

Abstract: 本发明涉及一种微型采精设备及其采集方法，适于动物繁殖中使用。本发明的微型采精设备在包括采精管、控温器、集精管、导管、真空泵、节律器，本发明的真空泵、节律器通过导管连接集精管。通过真空泵、节律器模拟雌性动物体内的搏动，通过导管传递真空泵产生的负压到集精管，通过真空泵模拟雌性动物体内的负压，解决了对小型动物采精的难题。本发明操作简单，不损伤动物，且采集速度较快。

公开(公告)号：CN103382442A

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201310289740.7

申请日：2013-07-11

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 肖红卫 ,  郑新民 ,  刘西梅 ,  魏庆信 ,  李莉 ,  华文君 ,  张立苹 ,  毕延震 ,  华再东 ,  任红艳 ,  吴艳 ,  赵娜 ,  丛银峰 ,  董方圆 ,  魏金涛

IPC: C12M1/42

Abstract: 本发明涉及克隆哺乳动物用的半固定半移动电融合电极，适于克隆哺乳动物中重构卵融合用。本发明通过转动调节柄调节移动电极的角度和移动电极把重构的细胞在固定电极和移动电极的前端之间进行微调，使重构的细胞排列方向垂直于固定电极以及移动电极的前端。本发明大大减少了克隆胚的体外操作时间并提高了其电融合效率，从而在电融合环节上提高了细胞核移植的成功率，而且操作简便快捷，电极的制作方便简单。

公开(公告)号：CN118652836A

公开(公告)日：2024-09-17

申请号：CN202410820667.X

申请日：2024-06-24

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 陈矾 ,  郑丽香 ,  罗安凤 ,  毕延震 ,  任红艳 ,  顾浩 ,  周昌繁 ,  曾威

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明公开了三丁酸甘油酯作为胚胎体外发育培养液添加剂的用途，属于动物生殖生物学技术领域。本发明首次将三丁酸甘油酯作为添加剂应用于鼠胚胎体外发育培养液，该三丁酸甘油酯能显著提高囊胚率，并且减少胚胎内ROS含量、改善胚胎内线粒体膜电位、提高胚胎内ATP水平及抗氧化基因的表达，改善胚胎内DNA甲基化和组蛋白修饰水平，促进胚胎体外发育；并且三丁酸甘油酯作为天然抗氧化剂和表观药物，安全无毒副作用、价格便宜易获取，在整个发育培养过程中无需更换培养液，操作简单；该三丁酸甘油酯为人类辅助生殖技术的胚胎高效发育、哺乳动物受精胚胎、孤雌胚胎和体细胞克隆胚胎等体外胚胎工程技术均提供了有力支持，应用前景良好。

公开(公告)号：CN117025598A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202310893929.0

申请日：2023-07-18

Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 任红艳 ,  毕延震 ,  张燕迪 ,  周昌繁 ,  华再东

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N15/67

Abstract: 本发明提供了一种猪精子特异性高效表达的启动子及其应用，属于分子生物学和基因工程技术领域。本发明提供了一种猪精子特异性高效表达启动子SP‑10，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。通过双荧光素酶报告系统和红色荧光蛋白表达系统检测发现SP‑10启动子在猪睾丸支持细胞和成纤维细胞、猪肾细胞中无活性，但在猪精子中表达活性与CMV启动子相当。启动子SP‑10在猪精子中表达具有特异性，且特异性较高。进一步，所述启动子SP‑10可显著提高外源基因在猪精子中的表达效率，对基因工程的应用具有重要意义。