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公开(公告)号：CN110184233B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN201910406941.8
申请日：2019-05-15
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明提供一种卵母细胞体外成熟培养液添加剂及其应用，所述添加剂为亚甲基蓝，且所述亚甲基蓝的添加浓度为10～200nmol/L。本发明还提供了所述卵母细胞体外成熟培养液添加剂在提高体外卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育中的应用；在提高卵母细胞成熟质量中的应用，以及在提高卵母细胞的抗氧化能力中的应用。本发明提供的添加剂添加到卵母细胞体外成熟培养液中，用于体外培养卵母细胞和早期胚胎，可提高动物卵母细胞体外成熟率，早期胚胎卵裂率、囊胚率。提高体外卵母细胞的成熟质量，提高卵母细胞的抗氧化能力。
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公开(公告)号：CN113234758B
公开(公告)日：2022-11-15
申请号：CN202110517953.5
申请日：2021-05-12
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/877 , C12N15/12 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，特别是涉及利用PiggyBac转座酶系统构建无痕工程动物的方法。本发明利用受体基因组天然的“TTAA”四联体序列，以及修复模板上携带的PiggyBac转座酶的识别序列，将基因打靶过程中引入的选择标记基因删除，实现无残留的基因编辑，从而彻底消除生物安全隐患。由此可见，采用本发明所述PiggyBac转座酶系统能实现“无痕”打靶，解决了现有技术无法克服的瓶颈。而且本发明将CRISPR/Cas9和PiggyBac两个技术联合使用能够实现保真度100％的基因突变和无残留基因编辑，是目前生物安全技术水平最高的方法。
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公开(公告)号：CN111778252A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010690620.8
申请日：2020-07-17
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9系统和应用，属于基因敲除技术领域。本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA，包括SST sgRNA1和SST sgRNA2，还提供了包含所述sgRNA的CRISPR/Cas9系统。将所述CRISPR/Cas9系统转染至猪肾成纤维细胞中，筛选得到的阳性细胞，取得较高的基因删除效率，同时CRISPR/Cas9系统通过对猪SST基因进行完全性基因敲除，可以提高猪的生长速度，从而提高养猪业的经济效益，同时所述CRISPR/Cas9系统对进一步研究SST基因的功能及其与某些疾病的相互关联具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN110184233A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910406941.8
申请日：2019-05-15
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明提供一种卵母细胞体外成熟培养液添加剂及其应用，所述添加剂为亚甲基蓝，且所述亚甲基蓝的添加浓度为10～200nmol/L。本发明还提供了所述卵母细胞体外成熟培养液添加剂在提高体外卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育中的应用；在提高卵母细胞成熟质量中的应用，以及在提高卵母细胞的抗氧化能力中的应用。本发明提供的添加剂添加到卵母细胞体外成熟培养液中，用于体外培养卵母细胞和早期胚胎，可提高动物卵母细胞体外成熟率，早期胚胎卵裂率、囊胚率。提高体外卵母细胞的成熟质量，提高卵母细胞的抗氧化能力。
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公开(公告)号：CN111778252B
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN202010690620.8
申请日：2020-07-17
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9系统和应用，属于基因敲除技术领域。本发明提供了一种靶向敲除SST基因的sgRNA，包括SST sgRNA1和SST sgRNA2，还提供了包含所述sgRNA的CRISPR/Cas9系统。将所述CRISPR/Cas9系统转染至猪肾成纤维细胞中，筛选得到的阳性细胞，取得较高的基因删除效率，同时CRISPR/Cas9系统通过对猪SST基因进行完全性基因敲除，可以提高猪的生长速度，从而提高养猪业的经济效益，同时所述CRISPR/Cas9系统对进一步研究SST基因的功能及其与某些疾病的相互关联具有十分重要的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113667674A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202111002995.1
申请日：2021-08-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程的技术领域，具体涉及一种靶向切除猪CD164基因编码区DNA的成对编辑位点、使用方法及其应用，所述编辑位点包括T1和T2两个编辑位点，所述T1和T2两个编辑位点位于猪1号染色体CD164基因编码区的2外显子区域；其中T1编辑位点染色体坐标为75441814‑75441833，编码区坐标为246‑265；T2编辑位点染色体坐标为75442009‑75442028，编码区坐标为441‑460。本发明的两个能基于CRISPR技术有效编辑猪CD164基因的靶位点，可用于Cas9介导的猪CD164基因打靶，为研究CD164基因在猪抗病育种中提供实验材料。
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公开(公告)号：CN113234758A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110517953.5
申请日：2021-05-12
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/877 , C12N15/12 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，特别是涉及利用PiggyBac转座酶系统构建无痕工程动物的方法。本发明利用受体基因组天然的“TTAA”四联体序列，以及修复模板上携带的PiggyBac转座酶的识别序列，将基因打靶过程中引入的选择标记基因删除，实现无残留的基因编辑，从而彻底消除生物安全隐患。由此可见，采用本发明所述PiggyBac转座酶系统能实现“无痕”打靶，解决了现有技术无法克服的瓶颈。而且本发明将CRISPR/Cas9和PiggyBac两个技术联合使用能够实现保真度100％的基因突变和无残留基因编辑，是目前生物安全技术水平最高的方法。
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公开(公告)号：CN112089503B
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202011052831.5
申请日：2020-09-29
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 武汉纽利特生物技术有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种体外克隆胚胎移植代孕母猪的方法，每头母猪每天定点喂食同期发情剂，连续喂食18天后，间隔5天后肌肉注射PG600，再间隔1天后，选取发情正常的个体进行体外克隆胚胎移植。本发明通过同期发情剂和PG600的喂食或注射，为代孕母猪移植克隆胚胎后为其提供了合适的微环境，控制了代孕母猪的发情、排卵与胚胎移植时间的同步性，大大增加了克隆胚胎着床的成功率及代孕母猪怀孕率，从而实现克隆猪批量化成产，为规模化生产克隆猪奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113827368A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111241903.5
申请日：2021-10-25
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 武汉纽利特生物技术有限公司
IPC: A61D19/04
Abstract: 本发明公开了一种活体采集猪体内1、2、4、8细胞期胚胎的收集方法，该方法主要包括以下流程：母猪发情鉴定、人工输精、手术冲胚、挑胚及体外胚胎培养等步骤。本发明方法提出了一种活体收集猪体内1‑细胞、2‑细胞、4‑细胞、8‑细胞期胚胎的收集方法及专用设备，该方法能从供体母猪输卵管内获得不同发育阶段的胚胎，供胚胎发育、基因原核注射、嵌合体动物制备等研究，有效解决了体外授精胚胎质量差、移植受孕率低的问题，从而提高转基因或基因编辑猪的生产效率。
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公开(公告)号：CN112089503A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202011052831.5
申请日：2020-09-29
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 武汉纽利特生物技术有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种体外克隆胚胎移植代孕母猪的方法，每头母猪每天定点喂食同期发情剂，连续喂食18天后，间隔5天后肌肉注射PG600，再间隔1天后，选取发情正常的个体进行体外克隆胚胎移植。本发明通过同期发情剂和PG600的喂食或注射，为代孕母猪移植克隆胚胎后为其提供了合适的微环境，控制了代孕母猪的发情、排卵与胚胎移植时间的同步性，大大增加了克隆胚胎着床的成功率及代孕母猪怀孕率，从而实现克隆猪批量化成产，为规模化生产克隆猪奠定了基础。
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