一种猪单胚胎体外培养方法

    公开(公告)号:CN108707578B

    公开(公告)日:2021-01-22

    申请号:CN201810426299.5

    申请日:2018-05-07

    Abstract: 本发明公开了一种猪单胚胎体外培养方法。属于农业‑畜牧兽医领域。具体为采用饲养层细胞微滴与单个胚胎进行共培养,获得了较好的发育结果,单胚胎培养与传统所用的多胚胎培养发育进程是一致的,而且,带透明带附着或去透明带的单胚胎7天均可获得猪孤雌发育囊胚。本发明中提供的饲养层细胞微滴制备简单,按照本发明中提供的方法能够为研究单个胚胎的发育提供可靠的原始材料,完全可以满足对猪单个胚胎发育进程跟踪观察及进一步研究的需要。本发明中提供的单胚胎培养方法可广泛应用于多种物种的单胚胎培养中。

    猪肌抑素基因编辑位点及其应用

    公开(公告)号:CN106086031B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201610431774.9

    申请日:2016-06-17

    Abstract: 本发明公开了猪基因组中猪肌抑素基因编辑位点及其应用,属于生物技术和生物医学工程领域。本发明从猪肌抑素基因编码区中分离出1个基因编辑靶位点,其序列为5’‑GGCTGTGTAATGCATGTATGTGG‑3’,位于MSTN编码区1号外显子。该位点能被Cas9核酸内切酶特异性识别,从而介导双链断裂,然后和打靶载体发生同源重组,将突变基因或选择性标记基因等整合至受体细胞基因组的预定位点。统计结果表明,该位点打靶效率为80.5%。本发明提供的猪肌抑素基因编辑位点,为对该基因进行精确编辑提供了有效的靶标,为研制高瘦肉率的生猪新品种提供了新策略,也为探明肌抑素的分子机制和信号通路提供了可靠的手段和素材。

    一种无缝基因克隆方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102080075A

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN201010582369.X

    申请日:2010-12-10

    Abstract: 本发明公开了一种不含有人工碱基的无缝基因克隆方法,步骤有:i)根据目的基因和目标载体的序列,设计、合成嵌合体引物;ii)实施一步二元式搭桥耦联长距离PCR,获得融合线性片段;iii)DpnI消化PCR产物,去除带甲基化的模板质粒DNA;iv)转化大肠杆菌菌株DH5α;v)挑取单克隆菌落测序鉴定;vi)酶切确认重组质粒的整合情况。该方法不需要特殊的限制性内切酶和连接酶以及碱性磷酸酶,而且可以将任意目的基因融入任意目标载体的任意位置。该方法原理简单,操作简便,位点精确可控,阳性率高,适用范围广。

    一种与肉牛生长性状相关的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN119061161A

    公开(公告)日:2024-12-03

    申请号:CN202411469135.2

    申请日:2024-10-21

    Abstract: 本发明属于肉牛分子标记辅助选择技术领域,特别是涉及一种与肉牛生长性状相关的分子标记及其应用。所述分子标记位于参考基因组(GCF_002263795.1_ARS‑UCD1.2_genomic.fna)中ACOX1基因第三内含子中,所述SNP分子标记位点为g.55675384C>T、g.55676112A>G、g.55680392G>A、g.55681592A>G和g.55683268C>G。分子标记位点g.55675384在SEQ ID NO.1所示序列中的第81bp处存在C>T碱基突变、g.55676112在SEQ ID NO.2所示序列中的第66bp处存在A>G碱基突变、g.55680392在SEQ ID NO.3所示序列中的第90bp处存在G>A碱基突变、g.55681592在SEQ ID NO.4所示序列中的第85bp处存在A>G碱基突变、g.55683268在SEQ ID NO.5所示序列中的第101bp处存在C>G碱基突变。本发明的5处SNP位点突变可显著影响肉牛生长和背膘厚性状,为肉牛生长性状检测或分子标记辅助育种提供一种新的分子标记。

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