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公开(公告)号：CN103249835B
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201180031562.7
申请日：2011-07-06
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
CPC classification number: A01K67/0275 , C07K14/475 , C12N15/8509
Abstract: 提供了一种猪肌抑素基因座位及其应用。还提供了一种表达盒，由启动子、外源基因和终止子组成：所述启动子为如下1）--3）中任一项所述的DNA分子：1）序列表的序列1自5’末端第2642-3778位核苷酸；2）序列表的序列1所示的核苷酸；3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子。本发明的猪肌抑素基因座位为在该位点处进行基因打靶、转入并表达外源基因提供了有价值的基因资源。
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公开(公告)号：CN103382442B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201310289740.7
申请日：2013-07-11
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12M1/42
Abstract: 本发明涉及克隆哺乳动物用的半固定半移动电融合电极，适于克隆哺乳动物中重构卵融合用。本发明通过转动调节柄调节移动电极的角度和移动电极把重构的细胞在固定电极和移动电极的前端之间进行微调，使重构的细胞排列方向垂直于固定电极以及移动电极的前端。本发明大大减少了克隆胚的体外操作时间并提高了其电融合效率，从而在电融合环节上提高了细胞核移植的成功率，而且操作简便快捷，电极的制作方便简单。
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公开(公告)号：CN103382442A
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201310289740.7
申请日：2013-07-11
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12M1/42
Abstract: 本发明涉及克隆哺乳动物用的半固定半移动电融合电极，适于克隆哺乳动物中重构卵融合用。本发明通过转动调节柄调节移动电极的角度和移动电极把重构的细胞在固定电极和移动电极的前端之间进行微调，使重构的细胞排列方向垂直于固定电极以及移动电极的前端。本发明大大减少了克隆胚的体外操作时间并提高了其电融合效率，从而在电融合环节上提高了细胞核移植的成功率，而且操作简便快捷，电极的制作方便简单。
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公开(公告)号：CN102796736A
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201210276350.1
申请日：2012-08-03
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪基因组假attP位点及其应用，属于生物技术和生物医学工程领域。本发明从猪基因组中分离到1个假attP位点，与野生型attP位点有40%的序列相似度，具有回文序列特征。该位点能被链霉菌噬菌体фC31整合酶所识别，从而介导含attB位点的外源基因以较高的效率整合于此位点。经蛋白含量测定，该位点维持EGFP基因的表达水平是无外源基因组的50倍。本发明为猪转基因的定点整合与高效表达提供了新的技术方案，为猪功能基因组研究提供了新策略，因此具有重要的科学价值和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102080075A
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN201010582369.X
申请日：2010-12-10
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种不含有人工碱基的无缝基因克隆方法，步骤有:i)根据目的基因和目标载体的序列，设计、合成嵌合体引物；ii)实施一步二元式搭桥耦联长距离PCR,获得融合线性片段；iii)DpnI消化PCR产物,去除带甲基化的模板质粒DNA;iv)转化大肠杆菌菌株DH5α；v)挑取单克隆菌落测序鉴定；vi)酶切确认重组质粒的整合情况。该方法不需要特殊的限制性内切酶和连接酶以及碱性磷酸酶，而且可以将任意目的基因融入任意目标载体的任意位置。该方法原理简单，操作简便，位点精确可控，阳性率高，适用范围广。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101642389A
公开(公告)日：2010-02-10
申请号：CN200910063747.0
申请日：2009-08-28
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: A61D19/04
Abstract: 本发明涉及一种猪胚胎的移植器械及其移植方法，器械包括移卵管、输卵管移植用外套管或子宫角移植用外套管，移卵管在各外套管内部，各外套管均是长65-70mm、管腔直径3-4mm、管壁厚0.1-0.2mm的硬质、有弹性的塑料细管，输卵管移植用外套管两端磨平滑；子宫角移植用外套管一端剪成15°-20°斜面，另一端磨平滑。进行胚胎移植时，首先将外套管插入受体母猪输卵管的壶腹部，或插入受体母猪子宫角的合适部位；然后将吸有胚胎的移卵管，通过外套管插入受体母猪输卵管的壶腹部或子宫角的合适部位，再实施移植。本发明克服了已有猪胚胎移植技术的三点缺陷，显著提高了猪胚胎移植的成功率和效率。
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公开(公告)号：CN103249835A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201180031562.7
申请日：2011-07-06
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
CPC classification number: A01K67/0275 , C07K14/475 , C12N15/8509
Abstract: 提供了一种猪肌抑素基因座位及其应用。还提供了一种表达盒，由启动子、外源基因和终止子组成：所述启动子为如下1）--3）中任一项所述的DNA分子：1）序列表的序列1自5’末端第2642-3778位核苷酸；2）序列表的序列1所示的核苷酸；3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子。本发明的猪肌抑素基因座位为在该位点处进行基因打靶、转入并表达外源基因提供了有价值的基因资源。
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公开(公告)号：CN102094037B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010583675.5
申请日：2010-12-13
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种内参内置型双荧光素酶报告载体及其应用。萤火虫荧光素酶基因融合到pRL-TK载体的海肾荧光素酶基因和氨苄青霉素抗性基因之间，两种荧光素酶处于同一个载体上，萤火虫荧光素酶基因作为内参。利用一步式二元搭桥耦联长距离PCR及大肠杆菌体内同源重组方法,将萤火虫荧光素酶基因和海肾荧光素酶基因置于同一个载体上,同时在海肾荧光素酶基因的3’非翻译区引入单克隆位点以方便目的片段的克隆,由此构建成内参内置型的双荧光素酶报告载体。本发明具有重复性高,复孔变异小,操作简便,定量准确的优点。本发明适用于微小RNA靶分子的筛选、鉴定和确认,也适用于在细胞水平定量分析微小RNA的活性变化。
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公开(公告)号：CN101711513A
公开(公告)日：2010-05-26
申请号：CN200910272961.7
申请日：2009-11-27
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: A01K67/02 , A61K38/24 , A61K31/5575 , A61P15/08
Abstract: 本发明涉及一种提高母猪排卵数的方法及其注射剂，属于农业生物制品技术领域。采用发情前同时注射PG(氯前列醇钠)和PMSG(血清性促性腺激素)，或者注射PG和PMSG的合剂，发情时注射HCG(绒毛膜促性腺激素)或LHRH-A3(促黄体素释放激素A3)方法，达到促进青年母猪或经产母猪排卵数达到正常排卵量2-3倍效果，从而提高母猪的繁殖性能，使母猪产子数明显增加，本方法技术稳定，效果明显；不诱发卵巢囊肿，对于后备母猪，在性成熟前的任何时候，用上述方法，亦可达到同样超数排卵效果。
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公开(公告)号：CN102796736B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210276350.1
申请日：2012-08-03
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪基因组假attP位点及其应用，属于生物技术和生物医学工程领域。本发明从猪基因组中分离到1个假attP位点，与野生型attP位点有40%的序列相似度，具有回文序列特征。该位点能被链霉菌噬菌体фC31整合酶所识别，从而介导含attB位点的外源基因以较高的效率整合于此位点。经蛋白含量测定，该位点维持EGFP基因的表达水平是无外源基因组的50倍。本发明为猪转基因的定点整合与高效表达提供了新的技术方案，为猪功能基因组研究提供了新策略，因此具有重要的科学价值和广阔的应用前景。
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