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公开(公告)号:CN118652836A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410820667.X
申请日:2024-06-24
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了三丁酸甘油酯作为胚胎体外发育培养液添加剂的用途,属于动物生殖生物学技术领域。本发明首次将三丁酸甘油酯作为添加剂应用于鼠胚胎体外发育培养液,该三丁酸甘油酯能显著提高囊胚率,并且减少胚胎内ROS含量、改善胚胎内线粒体膜电位、提高胚胎内ATP水平及抗氧化基因的表达,改善胚胎内DNA甲基化和组蛋白修饰水平,促进胚胎体外发育;并且三丁酸甘油酯作为天然抗氧化剂和表观药物,安全无毒副作用、价格便宜易获取,在整个发育培养过程中无需更换培养液,操作简单;该三丁酸甘油酯为人类辅助生殖技术的胚胎高效发育、哺乳动物受精胚胎、孤雌胚胎和体细胞克隆胚胎等体外胚胎工程技术均提供了有力支持,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN119372306A
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202411769412.1
申请日:2024-12-04
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了LYZ溶菌酶mRNA表达量在作为猪传染性胃肠炎诊断标志物中的应用,涉及分子生物学技术领域。同时还公开了检测猪传染性胃肠炎诊断标志物LYZ溶菌酶mRNA的引物,所述引物包括上游引物sus‑LYZ‑F:5’‑ACTAGGCGTTAAAGCATGGGTG‑3’和下游引物sus‑LYZ‑R:5’‑AGAGACAAGGTGAGCTGAAGAA‑3’。本发明通过猪传染性胃肠炎病毒TGEV感染猪回肠上皮细胞细胞系IPI‑2I,进行转录组测序,筛选差异表达mRNA,其中LYZ溶菌酶mRNA在TGEV感染组显著高于Mock组,因此可以用了检测猪传染性胃肠炎感染的标记基因。该检测方法省时、省力、易于检测、结果准确。
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公开(公告)号:CN118956911A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411128147.9
申请日:2024-08-16
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种提高猪细胞多不饱和脂肪酸含量的方法,通过在猪细胞中过表达FADS2基因实现,具体为:采用本发明提供的FADS2基因过表达载体,利用电转法将其转染至猪细胞(如猪肾成纤维细胞),使用G418药物进行筛选,获得稳定高表达FADS2的单克隆细胞系。实验数据表明,本发明获得的猪单克隆细胞系,甘油三酯含量极显著下调,总脂肪酸含量极显著升高,多不饱和脂肪酸中ω‑3 PUFA、ω‑6 PUFA含量均极显著升高,ω‑3/ω‑6比值极显著提高,并显著上调了EPA、DHA、DPA、DGLA等的表达。本发明首次明确了FADS2基因在猪中的应用,为通过FADS2改良猪肉脂肪酸组成提供了理论基础和数据支撑。
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公开(公告)号:CN117050996A
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202311037673.X
申请日:2023-08-16
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , G01N33/68 , C12Q1/6876
Abstract: 本发明提供了一种干扰PLIN2表达的siRNA与应用,属于基因工程技术领域。所述siRNA包括siRNA‑1、siRNA‑2或siRNA‑3,为了检测siRNA干扰CPT1C是否会影响到PLIN2的表达,利用上述siRNA分别检测CPT1C和PLIN2的表达情况,结果发现PLIN2的表达随着siRNA干扰CPT1C干扰效率的降低而升高。本发明利用上述siRNA,首次发现了PLIN2与CPT1C之间的相互作用关系—PLIN2与CPT1C互作调控脂滴的大小。本发明为在个体水平揭示PLIN2调控脂滴大小的分子机制提供素材,并为改良猪的产肉性状提供理论依据。
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公开(公告)号:CN118652836B
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202410820667.X
申请日:2024-06-24
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了三丁酸甘油酯作为胚胎体外发育培养液添加剂的用途,属于动物生殖生物学技术领域。本发明首次将三丁酸甘油酯作为添加剂应用于鼠胚胎体外发育培养液,该三丁酸甘油酯能显著提高囊胚率,并且减少胚胎内ROS含量、改善胚胎内线粒体膜电位、提高胚胎内ATP水平及抗氧化基因的表达,改善胚胎内DNA甲基化和组蛋白修饰水平,促进胚胎体外发育;并且三丁酸甘油酯作为天然抗氧化剂和表观药物,安全无毒副作用、价格便宜易获取,在整个发育培养过程中无需更换培养液,操作简单;该三丁酸甘油酯为人类辅助生殖技术的胚胎高效发育、哺乳动物受精胚胎、孤雌胚胎和体细胞克隆胚胎等体外胚胎工程技术均提供了有力支持,应用前景良好。
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公开(公告)号:CN119570784A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411665414.6
申请日:2024-11-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA、sgRNA组合物、载体及应用,属于生物技术领域。该sgRNA为sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6中的任一种。本发明针对猪ATP11C基因靶点,设计特异性靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA,从而高效、精准对猪ATP11C基因进行特异性敲除,并且得到稳定敲除ATP11C基因的猪肾成纤维细胞,并且,敲除ATP11C基因后显著抑制猪肾成纤维细胞的增殖,这为通过体细胞克隆技术生产具有相关疾病模型特征的克隆猪奠定了坚实基础,进而为与ATP11C相关的疾病治疗等研究提供了有利的实验材料。
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公开(公告)号:CN119432850A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202411532090.9
申请日:2024-10-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统敲除猪E4F1基因的方法,属于基因编辑技术领域;该方法利用特异性靶向猪E4F1基因的sgRNA组合物(一对sgRNA),构建包含上述sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体,再利用上述载体进行猪E4F1基因敲除。本发明方法能够实现猪E4F1基因的高效率敲除,进而显著提高E4F1基因敲除细胞和E4F1基因敲除猪的构建效率,为猪E4F1基因的功能研究及其应用提供了有效方法和基础。
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公开(公告)号:CN118240823A
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202410322073.6
申请日:2024-03-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 湖南楚沩香农牧股份有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于敲除猪CD163、MSTN基因的sgRNA组合物、载体及其应用,属于生物医学技术领域。本发明通过分别对猪CD163、MSTN基因设计基因编辑双靶位点,该靶位点均能被Cas9核酸内切酶特异性识别,从而介导双链断裂,在自我修复系统的作用下通过非同源末端连接的方式使基因发生突变,然后设计sgRNA组合物,并且以tRNA‑sgRNA‑sgRNA scaffold为最小重复单元,利用PTG/Cas9策略构建Cas9‑CD163‑MSTN多顺反子载体,从而实现了高效、精准地敲除靶基因,因此,在猪种质改良中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119286862A
公开(公告)日:2025-01-10
申请号:CN202411502198.3
申请日:2024-10-25
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N5/10 , C12P7/56
Abstract: 本发明公开了一种猪环状RNA、猪circLDHC、过表达载体及其构建方法和应用,涉及家畜分子生物学技术领域。所述猪环状RNA由LDHC基因第3‑6外显子环化形成,猪环状RNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述猪circLDHC由猪环状RNA经逆转录所得。本发明针对circLDHC设计特异性扩增引物,经PCR扩增、测序及RNase R酶消化验证所述的circLDHC的真实存在。荧光定量PCR分析发现circLDHC在猪性成熟睾丸组织中高表达,其表达水平与睾丸的成熟相关,同时在75日龄梅山公猪睾丸中表达量极显著高于同日龄杜洛克公猪(p
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公开(公告)号:CN118360238A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410467486.3
申请日:2024-04-17
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/077 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种单克隆细胞的制备方法及应用,属于细胞生物学技术领域。本发明提供了一种单克隆细胞的制备方法,利用原代成纤维细胞进行培养,选取对数生长期的细胞进行转染,并对转染后的细胞进行抗生素筛选,直到有细胞单克隆的出现,挑选单克隆细胞。利用本发明所述制备方法制备得到的单克隆细胞,效率高且挑选的单克隆较为单一,挑选时细胞始终处于液体中,细胞的成活率高。本发明得到的所述单克隆细胞可作为动物体细胞核移植的供体细胞,用于转基因克隆动物的制备。
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