公开(公告)号：CN114805494A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210496763.4

申请日：2022-05-09

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 马孙婷 ,  欧阳伟 ,  王晓丽 ,  徐彬 ,  吕立新 ,  王永山 ,  钱晶 ,  毕振威 ,  夏兴霞 ,  诸玉梅 ,  王晶宇

IPC: C07K7/08 ,  C12N15/85 ,  C12N15/62 ,  C40B30/04 ,  A61K39/385 ,  A61K47/42 ,  C12N15/87

Abstract: 一种鸡DEC‑205受体亲和肽DL及其制备方法和应用，涉及生物医药领域，该鸡DEC‑205受体亲和肽DL，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该鸡DEC‑205受体亲和肽DL能特异性结合鸡DEC‑205(CTLD‑4、CTLD‑5、CTLD‑6)重组蛋白，可与鸡骨髓源DCs细胞结合；该鸡DEC‑205受体亲和肽DL相对分子质量小，易于合成、表达和结构修饰；该鸡DEC‑205受体亲和肽DL，可与多种药物输送载体联合使用，可作为药物先导分子和基因导向载体，还可与疫苗联合使用，提高免疫效果，可为细胞特异性小分子治疗奠定基础，对家禽的新型DCs靶向性疫苗的研制与开发提供新思路。

公开(公告)号：CN107937619A

公开(公告)日：2018-04-20

申请号：CN201711497886.5

申请日：2017-12-29

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 肖琦 ,  何孔旺 ,  茅爱华 ,  汪伟 ,  俞正玉 ,  郭佳慧 ,  温立斌 ,  胡屹屹 ,  朱雪蛟 ,  李彬 ,  郭容利 ,  范宝超 ,  周萍 ,  曲梦 ,  倪艳秀 ,  周俊明 ,  祝昊丹 ,  王丹丹 ,  张雪寒 ,  张碧成 ,  吕立新 ,  沈江萍

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物及其应用，涉及生物技术领域。用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供以非诊断为目的的检测猪圆环病毒3型的方法，以待检样品中提取的总DNA为模板，采用权利要求1-3之一所述引物组合物进行PCR扩增，从而确定待检样品中是否存在猪圆环病毒3型。采用本发明引物组合物及检测方法，能够快速、准确、灵敏的检测出样品中是否存PCV3。

公开(公告)号：CN105400881A

公开(公告)日：2016-03-16

申请号：CN201510925222.9

申请日：2015-12-14

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 倪艳秀 ,  何孔旺 ,  周俊明 ,  祝昊丹 ,  孙学飞 ,  吕立新 ,  俞正玉 ,  茅爱华 ,  张雪寒 ,  温立斌 ,  李彬 ,  郭容利 ,  王小敏 ,  汪伟 ,  胡屹屹

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q2600/158

Abstract: 本发明提供了胸膜肺炎放线杆菌血清4型PCR检测用引物及其试剂盒，属于生物技术领域。以基因组DNA为模板，利用所提供引物进行PCR扩增，反应结束后根据扩增片段的数量和分子量大小判定结果。本发明的引物特异性好，检测方法快速简单，灵敏度高，不仅可从细菌培养液，也能直接从病料中检测胸膜肺炎放线杆菌血清4型，可用于胸膜肺炎放线杆菌血清4型的分子流行病学调查、疫病诊断及疫苗菌株的筛选。

公开(公告)号：CN102206607A

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN201110087699.6

申请日：2011-04-08

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  张雪寒 ,  卢维彩 ,  赵攀登 ,  叶青 ,  温立斌 ,  郭容利 ,  李彬 ,  王小敏 ,  倪艳秀 ,  吕立新 ,  周俊明 ,  俞正玉 ,  茅爱华 ,  周萍 ,  沈江萍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A61K39/108 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7三基因缺失菌株，属于生物技术领域。①抗性诱导，获得具有链霉素抗性的EHECO157:H7菌株。②缺失株构建，首先EHECO157:H7（△hly），而后依次构建EHECO157:H7（△hly△stx）和EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）。EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）致病性和小鼠体内定植能力较亲本菌株有明显降低而免疫原性良好。本发明构建了EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），并明确了致病性和定植特性。本发明构建的缺失菌株EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），可用于研制EHEC基因缺失活疫苗，免疫接种动物以减少EHECO157:H7在肠道内的定植，进而降低人类感染EHECO157:H7的机会，保障人类身心健康。

公开(公告)号：CN101289658A

公开(公告)日：2008-10-22

申请号：CN200810024644.9

申请日：2008-03-28

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  潘群兴 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  倪艳秀 ,  俞正玉 ,  郭容利 ,  吕立新 ,  茅爱华 ,  肖琦 ,  黄克和

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  A61K39/12 ,  A61P31/12

Abstract: 本发明涉及表达2型猪圆环病毒核衣壳蛋白Cap基因的重组病毒样粒子的构建及应用，属于基因工程疫苗领域。将猪细小病毒(PPV)VP2基因的C端基因片段克隆于人5型腺病毒穿梭载体，获得重组腺病毒rAd－ΔVP2，ΔVP2蛋白成功的高效表达，并能自我装配成病毒样粒子[PPV:VLPs]。以PPV VP2病毒样粒子作为抗原转运载体，将2型猪圆环病毒(PCV2)核衣壳蛋白(Cap)的165－200位氨基酸(ΔCap)基因嵌合在PPV VP2的N端(ΔVP2)，获得重组腺病毒rAd－ΔCap－ΔVP2。嵌合的VP2(ΔCap－ΔVP2)蛋白成功的高效表达，并能自我装配成病毒样粒子[PPV:VLP(PCV2)]。本发明还涉及该重组病毒及其表达Cap基因的重组PPV VP2病毒样粒子在疫苗免疫等方面的应用。

公开(公告)号：CN101173243A

公开(公告)日：2008-05-07

申请号：CN200710134465.6

申请日：2007-10-23

Applicant: 江苏省农业科学院 ,  南京天邦生物科技有限公司

Inventor： 张雪寒 ,  何孔旺 ,  刘亚彬 ,  周俊明 ,  俞正玉 ,  倪艳秀 ,  郭容利 ,  吕立新 ,  周萍 ,  沈江萍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/09 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)猪链球菌2型(S52)缺失株，属于生物技术领域。包括设计引物，获取impdh基因上下游序列(IN和IC)和氯霉素(cat)基因完整表达盒，基因经串联并克隆入simple pMD18－T载体，串联片段经测序后再经酶切后克隆入温敏质粒pSET4s载体，构建重组基因敲除质粒pSET4s－IN－cat－IC，转化入SS2。IMPDHm培养特性、生化特性和致病性较亲本菌株SS2有明显的不同。本发明构建了IMPDH缺失菌株(IMPDHm)，可用于研制SS2的基因缺失灭活疫苗，为更加安全而有效的防控猪链球菌病提供技术方法。

公开(公告)号：CN114716516B

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202210501605.3

申请日：2022-05-10

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 马孙婷 ,  王晓丽 ,  欧阳伟 ,  吕立新 ,  徐彬 ,  钱晶 ,  王永山 ,  毕振威 ,  诸玉梅 ,  夏兴霞 ,  王晶宇

IPC: C07K7/08 ,  C12N15/12 ,  C07K19/00 ,  C12N15/10 ,  C12N15/85 ,  A61K39/39 ,  A61K47/42 ,  A61P37/04

Abstract: 鸡DEC‑205特异性结合的噬菌体展示多肽VS及其用途，涉及生物医药领域，其氨基酸序列为ValSerProAlaTrpAspAlaArgThrArgSerAla。该鸡DEC‑205特异性结合的噬菌体展示多肽VS，相对分子质量小，其合成、表达及修饰等易于实现。该多肽VS能够特异性结合鸡DEC‑205重组蛋白；且该多肽VS与表达鸡DEC‑205重组蛋白的293t细胞的结合能力较强；该多肽VS能与鸡骨髓源DCs较好的结合。本发明所筛选的鸡DEC‑205特异性结合的噬菌体展示多肽VS，可与多种药物输送载体联合使用，同时可作为疫苗佐剂制备鸡骨髓源DCs靶向性疫苗，可提高鸡骨髓源DCs靶向性疫苗免疫效果。

公开(公告)号：CN104498623B

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201410696032.X

申请日：2014-11-26

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 倪艳秀 ,  何孔旺 ,  郭容利 ,  李彬 ,  俞正玉 ,  茅爱华 ,  吕立新 ,  祝昊丹 ,  周俊明 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  王小敏 ,  汪伟 ,  胡屹屹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株鉴别诊断用引物及其检测试剂盒，属于生物技术领域。以总RNA为模板，利用鉴别诊断猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株的检测引物进行RT-PCR扩增，反应结束后根据扩增片段的数量和分子量大小判定结果。本发明的引物特异性好，检测方法快速简单，准确性高，为猪流行性腹泻病毒强毒株和弱毒株的鉴别诊断提供了保证。

公开(公告)号：CN105420161A

公开(公告)日：2016-03-23

申请号：CN201510964760.9

申请日：2015-12-21

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 周俊明 ,  祝昊丹 ,  倪艳秀 ,  何孔旺 ,  俞正玉 ,  茅爱华 ,  吕立新 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  李彬 ,  郭容利 ,  王小敏 ,  汪伟 ,  周萍 ,  沈江萍

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12N1/20 ,  A61K39/0208 ,  A61K2039/52 ,  A61K2039/543

Abstract: 本发明涉及一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗，属生物技术领域。体外以铁离子限制的培养基培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株，经离心、0.22μm过滤处理后获取无细胞培养上清，继而超速离心制备出细菌释放的外膜囊泡，经过透射电镜观察可见大部分外膜囊泡直径50nm~100nm之间，以外膜囊泡作为亚单位疫苗二次鼻内免疫小鼠，外膜囊泡免疫小鼠长期增重及肺脏眼观形态与PBS免疫组无显著差异。同时实验表明外膜囊泡是一种高效免疫刺激物，不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG，而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA，有效的刺激了小鼠肺脏的黏膜免疫，显现出外膜囊泡作为亚单位疫苗较好的应用前景。

公开(公告)号：CN103275912B

公开(公告)日：2016-03-02

申请号：CN201310099542.4

申请日：2013-03-10

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 张雪寒 ,  何孔旺 ,  叶青 ,  栾晓婷 ,  倪艳秀 ,  温立斌 ,  郭容利 ,  李彬 ,  周俊明 ,  王小敏 ,  吕立新 ,  俞正玉 ,  茅爱华

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12P21/02 ,  A61K39/108 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7多价fliC-hcpA-tir-eae重组菌及疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的H7鞭毛(fliC)基因、菌毛(hcpA)基因、转位紧密素受体(tir)基因和紧密素(eae)基因，依次串联，克隆入表达载体pCold I中，获得重组质粒pCold-fliC-hcpA-tir-eae，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。