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公开(公告)号：CN107937619B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201711497886.5
申请日：2017-12-29
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 肖琦 , 何孔旺 , 茅爱华 , 汪伟 , 俞正玉 , 郭佳慧 , 温立斌 , 胡屹屹 , 朱雪蛟 , 李彬 , 郭容利 , 范宝超 , 周萍 , 曲梦 , 倪艳秀 , 周俊明 , 祝昊丹 , 王丹丹 , 张雪寒 , 张碧成 , 吕立新 , 沈江萍
Abstract: 本发明提供一种用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物及其应用，涉及生物技术领域。用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供以非诊断为目的的检测猪圆环病毒3型的方法，以待检样品中提取的总DNA为模板，采用权利要求1‑3之一所述引物组合物进行PCR扩增，从而确定待检样品中是否存在猪圆环病毒3型。采用本发明引物组合物及检测方法，能够快速、准确、灵敏的检测出样品中是否存PCV3。
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公开(公告)号：CN105061602B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201510481575.4
申请日：2015-08-03
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供用于检测抗猪产肠毒素性大肠杆菌抗体的融合蛋白、制备方法及应用，属于生物技术领域。所述融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。制备融合蛋白的方法，包括：将所述融合蛋白的编码基因插入pCold I质粒，得到重组载体；将所述重组载体转化宿主细胞，获得阳性重组菌；诱导所述阳性重组菌表达融合蛋白，纯化后得到所述融合蛋白。本发明融合蛋白，免疫反应性良好，产量较高，可以用于同时检测抗F4和F5型猪产肠毒素性大肠杆菌抗体。本发明试剂盒方面，检测准确、操作简便，特异性、敏感性、重复性均良好，适合于在临床应用中进行推广，为抗ETEC抗体的快速检测提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN104730246A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510048127.5
申请日：2015-01-29
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56916
Abstract: 本发明公开了检测大肠杆菌O157:H7的双抗ELISA试剂盒，包括酶标板、单抗、酶标试剂、底物显色液、终止液、阳性标准抗原、阴性标准品、10×洗涤液，酶标板为包被有大肠杆菌O157:H7全菌抗原的兔抗血清的96孔板，单抗为EO06。本发明试剂盒通过制备紧密素多肽抗原，免疫获得高滴度和高亲和力的单克隆抗体，用于研制夹心ELISA方法，提高检测敏感性和特异性。
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公开(公告)号：CN103255171A
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201310072085.X
申请日：2013-03-07
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/866 , A61K48/00 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒（PCV）2型密码子优化的ORF2基因重组杆状病毒病毒样粒子，属于生物制药领域。将所有PCV2ORF2序列进行比对分析，得到人工合成的密码子优化的PCV2ORF2序列，命名为YHsfORF2。将YHsfORF2克隆、转染，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF2。密码子优化的ORF2基因能够在重组病毒中高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物免疫保护试验表明该重组病毒灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，有效抑制PCV2在动物体内的复制，对PCV2感染有较好的免疫预防保护作用。
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公开(公告)号：CN101948792B
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201010118490.7
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C07K14/245 , A61K39/108 , A61K39/116 , A61P31/04
CPC classification number: Y02A50/472
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7增强粘膜免疫多价融合型重组菌、重组蛋白制备方法及基因工程疫苗，属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的志贺毒素1和2的B亚基(Stx1B和Stx2B)、转位紧密素受体(Tir)，依次串联，克隆入表达载体pGEX-4T-1中，而后将霍乱弧菌封闭小带毒素(zot)串联其后，即获得重组质粒pGEX-4T-1-2b-tir-1b-zot，在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好，所获得目标蛋白纯度较高，动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答，免疫预防保护和治疗作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105420161B
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201510964760.9
申请日：2015-12-21
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗,属生物技术领域。体外以铁离子限制的培养基培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株,经离心、0.22µm过滤处理后获取无细胞培养上清,继而超速离心制备出细菌释放的外膜囊泡,经过透射电镜观察可见大部分外膜囊泡直径50nm~100nm之间,以外膜囊泡作为亚单位疫苗二次鼻内免疫小鼠,外膜囊泡免疫小鼠长期增重及肺脏眼观形态与PBS免疫组无显著差异。同时实验表明外膜囊泡是种高效免疫刺激物,不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG,而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA,有效的刺激了小鼠肺脏的黏膜免疫,显现出外膜囊泡作为亚单位疫苗较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108220463A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810208789.8
申请日：2018-03-14
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供一种检测松鼠葡萄球菌的PCR引物、试剂盒及检测方法，涉及松鼠葡萄球菌检测技术领域。该松鼠葡萄球菌PCR检测引物，包括序列如SEQ ID NO.2所示的上游引物和如SEQ ID NO.3所示的下游引物。本发明还提供一种检测松鼠葡萄球菌的试剂盒及检测方法。该试剂盒包括所述松鼠葡萄球菌PCR检测引物。所述检测方法，包括如下步骤：以待检测样品DNA为模板，以所述引物进行PCR扩增，仅获得一个大小为214bp的目的片段，则待检测样品含有松鼠葡萄球菌。本发明检测引物、试剂盒及检测方法，用于检测松鼠葡萄球菌，特异性强、灵敏度高、成本低、耗时短。
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公开(公告)号：CN103275937A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310072686.0
申请日：2013-03-07
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒，属于生物制药领域。人工合成密码子优化的PCV2ORF1和ORF2基因，命名为YHsfORF1-2。将YHsfORF1-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacHTA中，即获得重组质粒pFBHYHsfORF1-2。而后将重组质粒转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2。在重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2中，ORF1和ORF2蛋白能够成功的高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物试验证明由该重组病毒所制的灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，对PCV2有较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN102206607B
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201110087699.6
申请日：2011-04-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 何孔旺 , 张雪寒 , 卢维彩 , 赵攀登 , 叶青 , 温立斌 , 郭容利 , 李彬 , 王小敏 , 倪艳秀 , 吕立新 , 周俊明 , 俞正玉 , 茅爱华 , 周萍 , 沈江萍
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7三基因缺失菌株，属于生物技术领域。①抗性诱导，获得具有链霉素抗性的EHECO157:H7菌株。②缺失株构建，首先EHECO157:H7（△hly），而后依次构建EHECO157:H7（△hly△stx）和EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）。EHECO157:H7（△hly△stx△toxB）致病性和小鼠体内定植能力较亲本菌株有明显降低而免疫原性良好。本发明构建了EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），并明确了致病性和定植特性。本发明构建的缺失菌株EHECO157:H7（△hly△stx△toxB），可用于研制EHEC基因缺失活疫苗，免疫接种动物以减少EHECO157:H7在肠道内的定植，进而降低人类感染EHECO157:H7的机会，保障人类身心健康。
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公开(公告)号：CN102928605A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210436636.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 何孔旺 , 文世富 , 温立斌 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及一种用于检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒。属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pET-28a(+)原核表达载体，构建的表达类猪圆环病毒P1Cap衣壳蛋白C端部分氨基酸序列的3个重复的基因工程菌BLpET-28a-3pCap,并将表达的重组蛋白纯化后的Cap蛋白。该方法用于检测猪血清中类猪圆环病毒P1的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于类猪圆环病毒P1血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的检测方法。目前该方法是国际上首次利用P1衣壳蛋白建立检测猪群中P1抗体的ELISA。
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