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公开(公告)号:CN117535362A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311488717.0
申请日:2023-11-09
申请人: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
IPC分类号: C12P19/26 , C12N1/21 , C12N15/56 , C12N15/55 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12R1/19
摘要: 本发明公开了一种基于蛋白组装支架合成乳酰‑N‑新四糖的方法,属于代谢工程技术领域。本发明基于合成乳酰‑N‑新四糖中关键酶在空间上分布分散,造成中间体扩散,最终导致胞内酶促反应速率降低的问题,使用质粒异源表达了含有融合小肽SH3lig的β‑1,3‑N‑乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶lgtA和含有融合小肽PDZlig的β‑1,4‑半乳糖基转移酶lgtB,同时融合表达蛋白组装支架PDZ和SH3,构建了一种基于蛋白组装支架合成乳酰‑N‑新四糖的重组大肠杆菌,使得关键酶基因在大肠杆菌中高效催化,最终乳酰‑N‑新四糖在摇瓶中的产量达到1699mg/L,为乳酰‑N‑新四糖的高效合成和进一步的产业化奠定了基础。
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公开(公告)号:CN116064261A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202210820757.X
申请日:2022-07-13
申请人: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
摘要: 本发明公开了一种L‑薄荷醇产量提高的酿酒酵母菌株,通过在tLimS和IDI、tLimS和L3H的C端添加RIDD‑RIAD短肽进行酶组装,拉近两个酶之间的距离,提高薄荷醇的产量。本发明tLimS‑IDI系列菌株中,添加完整RIDD‑RIAD互作短肽后,菌株yLDIA产量相比菌株yLI提高了32.73%,达40.01mg/L;tLimS‑L3H系列菌株中,同时添加RIDD‑RIAD互作短肽后,菌株薄荷醇产量提高了46.84%,达到44.26mg/L。
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公开(公告)号:CN117402804A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202311420604.7
申请日:2023-10-30
申请人: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
摘要: 本发明公开了一种α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体及产2'‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌,属于生物技术领域。本发明借助生物信息学等方法,基于蛋白序列比对、丙氨酸扫描半理性选取多个氨基酸残基作为改造靶点,针对性地对α‑1,2岩藻糖基转移酶构建“小而精”的高质量突变体文库,对特定靶点进行组合突变等半理性改造方法,获得了高活性的α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体用于大肠杆菌中2'‑FL的合成,为富含2'‑岩藻糖基乳糖的食品开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN115710557A
公开(公告)日:2023-02-24
申请号:CN202210820746.1
申请日:2022-07-13
申请人: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
摘要: 本发明公开了一种生产D‑柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法,本发明在前期构建的菌株MKL8的基础上继续优化前体乙酰辅酶A和NADPH辅因子水平,为胞内柠檬烯合成创造了较优条件,并增加胞内柠檬烯合酶拷贝数由2个至8个,摇瓶发酵实现产量由原来的657mg/L,提升至1248mg/L,比原产量提高1.90倍。再运用区室化工程将柠檬烯合成全途径酶定位至线粒体,实现重组酿酒酵母菌株柠檬烯在线粒体内的同步高效合成。综合运用细胞质与线粒体双重调控使柠檬烯的产量得到进一步的提升至1392mg/L,最终实现柠檬烯在酿酒酵母中的高效合成,重组酵母菌株相对于原菌株具有较好的生长速率,具有较大的应用推广价值。
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公开(公告)号:CN117844784B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202311730029.0
申请日:2023-12-14
申请人: 江南大学
IPC分类号: C12N9/50 , C12N15/75 , C12N15/57 , C12N1/21 , A23K20/189 , C14C1/06 , A61K8/66 , A61Q19/00 , C12R1/125
摘要: 本发明公开了一种具有底物选择性的角蛋白酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明采用PCR扩增对角蛋白酶KerZ1进行定点饱和突变,构建筛选得到角蛋白酶变体KerZ1/N61H和KerZ1/M221Q。酶活测定结果显示角蛋白酶变体KerZ1/N61H与KerZ1/M221Q分别保留了KerZ1 90%、75%的角蛋白水解活性且无胶原蛋白水解活性,说明其能在高效去除皮肤角质的同时不伤害皮肤胶原蛋白,在化妆品方面具有很大应用价值。
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公开(公告)号:CN118703345A
公开(公告)日:2024-09-27
申请号:CN202410846650.1
申请日:2024-06-27
申请人: 江南大学
IPC分类号: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/02 , C12N9/12 , C12N9/10 , C12P33/02 , C12R1/865
摘要: 本发明公开了一种促进酿酒酵母合成7‑脱氢胆固醇的方法。本发明通过对磷酸甲戊酸激酶ERG8和鲨烯合酶ERG9进行突变,并分别或同时整合进酿酒酵母基因组中,得到了几株7‑脱氢胆固醇产量明显提升的突变菌株,其中,磷酸甲戊酸激酶ERG8涉及75、187、192、205、206、314、322、349等一个或多个位点的突变,鲨烯合酶ERG9涉及96、108、146、208、209、251、252、258、286、345、355、388、389、404、426、434等一个或多个位点的突变。本发明提供的酿酒酵母突变体可实现7‑DHC的生产,为代谢工程改造酿酒酵母促进7‑DHC合成奠定了基础。本发明提供的酿酒酵母突变体构建方法简单,便于使用,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118675614A
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410603695.6
申请日:2024-05-15
申请人: 江南大学
摘要: 本发明涉及基于隐马尔可夫模型预测N‑端编码序列调控基因表达水平的方法,属于生物信息技术领域。本发明统计提高基因表达水平高的天然N‑端编码序列,建立相应的文库,通过隐马尔可夫模型建立文库中氨基酸转移概率矩阵,通过计算一阶或二阶氨基酸转移概率,将所述氨基酸转移概率矩阵用于N‑端编码序列的评估,并应用该方法成功设计得到了能够应用于降低酿酒酵母无义调节的mRNA降解效应的N‑端编码序列,在该效应存在的情况下提高了基因表达的水平。
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公开(公告)号:CN115960874B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202310111425.9
申请日:2023-02-14
申请人: 山东润德生物科技有限公司 , 江南大学
摘要: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌内源GlcNAc6P磷酸酶及提高GlcNAc产量的方法,具体涉及采用重组谷氨酸棒杆菌进行发酵生产,该重组谷氨酸棒杆菌过表达了如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列,该蛋白编码GlcNAc6P磷酸酶,能将GlcNAc6P去磷酸化为GlcNAc。本发明通过机器学习的方式鉴定了谷氨酸棒杆菌内源GlcNAc胞内转运蛋白以及内源GlcNAc6P磷酸酶的编码基因,并根据筛选结果对菌株进行改造,显著提高了GlcNAc的产量。
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公开(公告)号:CN118638674A
公开(公告)日:2024-09-13
申请号:CN202410677822.7
申请日:2024-05-29
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了微生物制剂及水果固体废物的综合利用方法,属于农业废物资源化技术领域。本发明提供了一种微生物制剂,所述微生物制剂含有暹罗芽孢杆菌BNCC341566、枯草芽孢杆菌B211和解淀粉芽孢杆菌Z3,所述微生物制剂能够用于转化水果废物,且具备转化时间短,转化效率高的优点,转化产物均可返回农田,用作土壤改良剂,补充土壤有机质、大量元素和中微量元素,改善土壤保水保肥能力及化肥利用率,实现固体废物、土壤及农业面源污染的协同共治。
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公开(公告)号:CN117417934B
公开(公告)日:2024-09-13
申请号:CN202311415902.7
申请日:2023-10-27
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了跨菌种启动子、多菌种穿梭质粒及其应用,尤其是设计了一种大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母通用的启动子,该启动子可以在上述宿主内具有活性并且启动目的基因的转录。本发明有效解决了合成生物学和代谢工程中对目的基因进行不同宿主表达验证、最优底盘细胞的构建没有足够通用的启动子工具的问题。通过利用本发明构建的跨菌种启动子和多菌种穿梭质粒,可以在不同宿主细胞内快速对目的基因表达情况进行筛选,获得最佳表达宿主,并有效扩充了合成生物学工具箱,为复杂基因电路构建提供了良好的基础元件。
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