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公开(公告)号：CN107365782A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710757239.7
申请日：2017-08-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/2408 , C12N9/90 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/24 , C12Y302/01141 , C12Y504/99015
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种基因工程菌及其应用。本发明所述基因工程菌能够在同一株菌中同时表达MTSase和MTHase，并且在翻译水平调控两种酶的表达，实现了两种酶的不同水平的高效表达。本发明所述基因工程菌可以同时发酵制备MTSase和MTHase两种酶，只需要一套设备就能满足生产要求。并且MTSase和MTHase两种酶表达量配比固定，生产更稳定。本发明通过分子生物学手段调节所述基因工程菌的MTSase和MTHase酶的表达水平，使得两种酶获得最佳配比，协同作用强，在最短的时间获得最高的转化率。实验表明利用本发明所述基因工程菌表达获得的产物生产海藻糖，海藻糖的转化率最高达到87％。
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公开(公告)号：CN106701649A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611250325.0
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/0008 , C12N9/93 , C12P13/14 , C12Y102/04002 , C12Y604/01001
Abstract: 本发明涉及食品工业技术领域，尤其涉及生产L‑谷氨酰胺的菌株和生产L‑谷氨酰胺的方法。本发明研究表明，单独pyc改造不能提高谷氨酸棒杆菌积累谷氨酰胺的能力，但pyc改造与odhA弱化改造配合，则可以大幅提高谷棒产谷氨酰胺的水平。说明，pyc高表达与odhA弱化表达，对合成谷氨酰胺具有协同促进作用。本发明以保藏编号为CGMCC No.13404的谷氨酸棒杆菌为出发，通过弱化odhA及增强pyc的表达水平，构建得到L‑谷氨酰胺基因工程改造菌。该菌株能够实现发酵过程中L‑谷氨酰胺的高效积累，L‑谷氨酰胺可达28.9g/L。
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公开(公告)号：CN106520655A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201611250330.1
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/1096 , C12N9/1022 , C12P13/08 , C12Y202/01006
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，特别涉及重组菌株及其制备方法和生产L-缬氨酸的方法。该重组菌株以棒状杆菌为出发菌株进行改造，其改造包括：将ilvN基因进行点突变和敲除avtA基因。本发明对缬氨酸代谢路径中的ilvN进行点突变，将编码转氨酶的avtA基因敲除，得到重组菌株，经发酵培养，L-缬氨酸的产量可达到12.2g/L，且大大减少了副产物丙氨酸的生成。
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公开(公告)号：CN106701649B
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201611250325.0
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及食品工业技术领域，尤其涉及生产L‑谷氨酰胺的菌株和生产L‑谷氨酰胺的方法。本发明研究表明，单独pyc改造不能提高谷氨酸棒杆菌积累谷氨酰胺的能力，但pyc改造与odhA弱化改造配合，则可以大幅提高谷棒产谷氨酰胺的水平。说明，pyc高表达与odhA弱化表达，对合成谷氨酰胺具有协同促进作用。本发明以保藏编号为CGMCC No.13404的谷氨酸棒杆菌为出发，通过弱化odhA及增强pyc的表达水平，构建得到L‑谷氨酰胺基因工程改造菌。该菌株能够实现发酵过程中L‑谷氨酰胺的高效积累，L‑谷氨酰胺可达28.9g/L。
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公开(公告)号：CN108250278A
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201611248605.8
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及食品工业技术领域，尤其涉及生产L‑谷氨酸的菌株和生产L‑谷氨酸的方法。本发明发现了谷氨酸外运蛋白编码基因yggB发生3种不同的突变，将这三种突变导入野生型ATCC13032中，结果表明，YggB蛋白变为激活状态，从而提高了L‑谷氨酸的产量。在失活odhA基因的ATCC13032中引入yggB突变，L‑谷氨酸的产量得到了进一步的提升。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106754807A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611248621.7
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/1025 , C12N9/1022 , C12P13/06 , C12Y202/01006 , C12Y203/03013
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及生产L‑亮氨酸菌株和生产L‑亮氨酸的方法。本发明以紫外线和亚硝基胍对谷氨酸棒杆菌进行诱变，获得了两个有利于L‑亮氨酸产生的关键突变leuAG561D和ilvBG235S，研究表明，leuAG561D和/或ilvBG235S突变条件下，L‑亮氨酸的合成途径中的反馈抑制被解除，L‑亮氨酸的产量得到大幅提高，获得了能够大量产生L‑亮氨酸的菌株，保藏编号为CGMCC NO.13408，该菌株能够实现发酵过程中L‑亮氨酸的高效积累，L‑亮氨酸可达4.7g/L。
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公开(公告)号：CN105695383A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610119402.2
申请日：2016-03-02
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C07K14/34 , C12N9/0008 , C12N9/0016 , C12N9/1025 , C12N15/74 , C12N2800/101 , C12P13/14 , C12Y102/04002 , C12Y104/01002 , C12Y104/01003 , C12Y104/01004 , C12Y203/03003
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别涉及重组菌株及其应用。实验结果表明，野生型谷氨酸棒杆菌ATCC 13869在未经改造前基本不产谷氨酸，本发明提供的菌株MHZ-0112-1谷氨酸的产量为4.7g/L；MHZ-0112-2谷氨酸的产量为18.5g/L；菌株MHZ-0112-4和MHZ-0112-5谷氨酸的产量分别为23.4g/L和26.4g/L。在单独利用强启动子Psod表达gdh基因，谷氨酸产量提高约1.8倍，单独利用Ptuf启动子表达gltA基因将CS酶活增加了4倍，谷氨酸产量提高至30.8g/L；将两个基因同时进行过表达后，谷氨酸产量继续提高至35.5g/L，转化率达到约59％。
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公开(公告)号：CN108250278B
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201611248605.8
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及食品工业技术领域，尤其涉及生产L‑谷氨酸的菌株和生产L‑谷氨酸的方法。本发明发现了谷氨酸外运蛋白编码基因yggB发生3种不同的突变，将这三种突变导入野生型ATCC13032中，结果表明，YggB蛋白变为激活状态，从而提高了L‑谷氨酸的产量。在失活odhA基因的ATCC13032中引入yggB突变，L‑谷氨酸的产量得到了进一步的提升。
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公开(公告)号：CN105734004B
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201610119394.1
申请日：2016-03-02
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及重组菌株及其制备方法、应用。本发明所构建的L‑赖氨酸基因工程菌能够实现发酵过程中L‑赖氨酸的有效积累，且具有较高的糖酸转化率。本发明从头构建的基因工程菌株，避免了随机突变带来的副作用，有利于实现高产酸和高转化率，具有广泛的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN106635946A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611250313.8
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/1241 , C12N9/80 , C12P13/14 , C12Y305/01002
Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及一种谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述谷氨酸棒杆菌，具有L‑谷氨酰胺生产能力并且其细胞内腺苷酰基转移酶和谷氨酰胺酶活性同时降低或丧失。本发明所述谷氨酸棒杆菌解除了对谷氨酰胺合成酶的腺苷酰化修饰作用从而增加L‑谷氨酰胺的产量，同时减少L‑谷氨酰胺的分解，使培养基中L‑谷氨酰胺的量增多，进而提高菌株发酵产L‑谷氨酰胺的能力。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑谷氨酰胺高产菌株，能有效积累L‑谷氨酰胺，提高L‑谷氨酰胺的产量，为L‑谷氨酰胺的工业化生产奠定了基础。
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