-
公开(公告)号：CN114836467B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210572591.4
申请日：2022-05-25
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种植物高效遗传转化和筛选体系及其方法与应用，属于植物转基因工程技术领域，所述植物高效遗传转化和筛选体系包括双元载体pCWBG和双元载体pBOE/pBC，所述双元载体pCWBG至少包含第一筛选标记基因、Bbm蛋白编码基因、Wus2蛋白编码基因和CRE蛋白编码基因的表达盒。本发明通过构建玉米Bbm和Wus2表达盒切除载体，建立了双元载体共转、双标记筛选和早期Bbm和Wus2基因切除的高效遗传转化方法，提高了玉米转化效率，显著降低了转化苗和转化植株畸形不育率，节约了转化成本，可在玉米转基因和基因编辑育种上广泛开发应用。
-
公开(公告)号：CN106434699A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610560872.2
申请日：2016-07-15
Applicant: 安徽农业大学
CPC classification number: C07K14/395 , C07K2319/21 , C12N9/60 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/22
Abstract: 本发明公开了一种SUMO和SUMO蛋白酶基因及其编码蛋白和应用。本发明的一种酿酒酵母基因sumo(S)，其由序列表SEQ ID No.1的核苷酸序列定义。本发明的一种酿酒酵母基因sumo(S)的编码蛋白，其由序列表SEQ ID No.2的氨基酸序列定义。本发明的一种SUMO蛋白酶基因ulp(S)，其由序列表SEQ ID No.3的核苷酸序列定义。本发明的一种SUMO蛋白酶基因ulp(S)的编码蛋白，其由序列表SEQ ID No.4的氨基酸序列定义。本发明能够实现酿酒酵母sumo基因和SUMO蛋白酶ulp基因在大肠杆菌中的高表达，具体的说是实现在大肠杆菌常用的表达菌株BL21(DE3)中实现高表达，并保证功能不受影响。
-
公开(公告)号：CN101928719A
公开(公告)日：2010-12-29
申请号：CN201010204681.5
申请日：2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种蛋白定向进化领域中对水溶性/折叠强的蛋白突变体进行筛选的一种高通量、灵敏度高、方便筛选的T载体及其构建方法和应用，本发明的T载体为在出发载体pMAL-c2x中引入6个组氨酸(His)标签、多克隆位点序列(MCS)和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。本发明所构建的用于筛选蛋白可溶性表达的T载体，带有强的Ptac启动子，可以对PCR产物直接用于克隆、表达、纯化；特别地，可以对水溶性强/超折叠的蛋白突变体进行方便地筛选。
-
公开(公告)号：CN101864407B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201010204707.6
申请日：2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种TEV蛋白酶突变体，与原始TEV蛋白酶相比，第17位由丝氨酸(Ser)取代苏氨酸(Thr)，第56位由缬氨酸(Val)取代亮氨酸(Leu)，第68位由天冬氨酸(Asp)取代天冬酰胺(Asn)，第77位由缬氨酸(Val)取代异亮氨酸(Ile)，第135位由甘氨酸(Gly)取代丝氨酸(Ser)。本发明还提供了突变体的编码基因及其含有编码基因的表达载体和宿主细胞以及突变体在大肠杆菌中进行蛋白重组表达的应用。采用定点突变技术改造TEV蛋白酶基因，特异性的改变TEV蛋白酶中的五个氨基酸残基，获得的TEV蛋白酶的突变体可溶性和酶活性均得到显著的提高。
-
公开(公告)号：CN104711277A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510121979.2
申请日：2015-03-19
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用玉米丝氨酸消旋酶基因作为筛选标记在南抗杨转化体系中的应用。本发明以玉米自交系B73三叶期的cDNA为模板克隆得到的一段基因序列(ZmSR)，将该基因替换双元表达载体pCAMBIA1301上的GUS标记基因，将该载体命名为pBI1301-ZmSR。以南抗杨组培苗的叶片为对象，通过农杆菌介导的遗传转化，将pBI1301-ZmSR载体导入到南抗杨中，并以南抗杨的叶片和不定芽分别进行D-丝氨酸的抗性筛选，从而获得转基因南抗杨植株。与传统筛选标记相比，丝氨酸消旋酶为一种无抗性选择标记基因，对转化植物中的D-丝氨酸具有解毒作用，对生态环境不会造成污染，是一种安全的筛选标记基因。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101864407A
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN201010204707.6
申请日：2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种TEV蛋白酶突变体，与原始TEV蛋白酶相比，第17位由丝氨酸(Ser)取代苏氨酸(Thr)，第56位由缬氨酸(Val)取代亮氨酸(Leu)，第68位由天冬氨酸(Asp)取代天冬酰胺(Asn)，第77位由缬氨酸(Val)取代异亮氨酸(Ile)，第135位由甘氨酸(Gly)取代丝氨酸(Ser)。本发明还提供了突变体的编码基因及其含有编码基因的表达载体和宿主细胞以及突变体在大肠杆菌中进行蛋白重组表达的应用。采用定点突变技术改造TEV蛋白酶基因，特异性的改变TEV蛋白酶中的五个氨基酸残基，获得的TEV蛋白酶的突变体可溶性和酶活性均得到显著的提高。
-
公开(公告)号：CN116004705A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210788910.5
申请日：2022-07-06
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种无基因型限制的玉米基因编辑诱导系的创制方法及其应用，属于基因工程和转基因技术领域，本发明通过将颜色或荧光筛选标记性状和单倍体诱导性状导入具有高效遗传转化能力的自交系中，利用分子标记、颜色或荧光标记及单倍体诱导率的测定进行筛选，获得含有颜色或荧光筛选标记、具有单倍体诱导特性、且能高效遗传转化的单倍体诱导系，为无基因型限制的玉米基因编辑诱导系。利用该无基因型限制的玉米基因编辑诱导系进行基因编辑育种，可以突破基因编辑育种转化难、周期长和带有非编辑基因型遗传累赘的弊端，大大提高基因编辑育种的效率，节约育种成本，对实现各种优良自交系高效基因编辑育种具有极大的应用价值。
-
公开(公告)号：CN104711276A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510121857.3
申请日：2015-03-19
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型筛选标记玉米丝氨酸消旋酶基因应用于烟草转化技术。本发明以玉米自交系B73三叶期的cDNA为模板克隆得到玉米丝氨酸消旋酶基因序列(ZmSR)，将该基因替换双元表达载体pCAMBIA1301上的GUS标记基因，将该载体命名为pBI1301-ZmSR。本研究利用玉米丝氨酸消旋酶基因，通过农杆菌介导法对烟草叶片及愈伤组织进行遗传转化，同时用含有GUS基因的pBI121载体导入烟草中作为对照，对比ZmSR和GUS基因在叶片及愈伤组织的转化效果，为ZmSR作为新型无抗性筛选标记奠定基础。
-
公开(公告)号：CN102286524B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201110225220.0
申请日：2011-08-08
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明提供一种植物转化载体及其构建方法和应用，该载体用红色荧光蛋白UPMT和抗性筛选alad基因作为转染植物的报告基因及选择标记。两者功能类似并优于如抗生素和绿色荧光蛋白融合标记在水稻叶绿体转化中既用于筛选，又用于亚细胞器定位。由此，这两种基因作为转基因植物的筛选标记，不仅可以指示靶基因的细胞学及组织特异性的定位，也可以促进植物光合作用效率及营养物质累积。在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用背景，有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。
-
公开(公告)号：CN103224950A
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201310182865.X
申请日：2013-05-16
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明构建了一种适合于黄曲霉菌遗传转化的表达载体，它包括以下两个步骤：一）含筛选标记基因和红色荧光报告基因的融合基因表达盒的供体质粒的构建：1）选择合适的供体骨架载体，2）设计引物，3）基因融合，4）构建含融合基因表达盒的供体载体；二）将融合基因表达盒克隆到双元表达载体上：1）双元表达载体的改造，2）将融合基因表达盒插入改造后的双元表达载体。本发明的载体转化黄曲霉菌后，可同时进行抗性和红色荧光筛选重组菌，提高筛选效率；还可利用红色荧光监测黄曲霉菌对农作物、食品的侵染，为这一危害人类健康的产毒真菌的防治提供依据。亦可用于其它丝状真菌的转基因研究，在转基因真菌研究中具有潜在的应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
17
records
(took 0.023 seconds)
