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公开(公告)号:CN102286524A
公开(公告)日:2011-12-21
申请号:CN201110225220.0
申请日:2011-08-08
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明提供一种植物转化载体及其构建方法和应用,该载体用红色荧光蛋白UPMT和抗性筛选alad基因作为转染植物的报告基因及选择标记。两者功能类似并优于如抗生素和绿色荧光蛋白融合标记在水稻叶绿体转化中既用于筛选,又用于亚细胞器定位。由此,这两种基因作为转基因植物的筛选标记,不仅可以指示靶基因的细胞学及组织特异性的定位,也可以促进植物光合作用效率及营养物质累积。在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用背景,有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。
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公开(公告)号:CN101928719B
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201010204681.5
申请日:2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种蛋白定向进化领域中对水溶性/折叠强的蛋白突变体进行筛选的一种高通量、灵敏度高、方便筛选的T载体及其构建方法和应用,本发明的T载体为在出发载体pMAL-c2x中引入6个组氨酸(His)标签、多克隆位点序列(MCS)和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。本发明所构建的用于筛选蛋白可溶性表达的T载体,带有强的Ptac启动子,可以对PCR产物直接用于克隆、表达、纯化;特别地,可以对水溶性强/超折叠的蛋白突变体进行方便地筛选。
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公开(公告)号:CN102286524B
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201110225220.0
申请日:2011-08-08
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明提供一种植物转化载体及其构建方法和应用,该载体用红色荧光蛋白UPMT和抗性筛选alad基因作为转染植物的报告基因及选择标记。两者功能类似并优于如抗生素和绿色荧光蛋白融合标记在水稻叶绿体转化中既用于筛选,又用于亚细胞器定位。由此,这两种基因作为转基因植物的筛选标记,不仅可以指示靶基因的细胞学及组织特异性的定位,也可以促进植物光合作用效率及营养物质累积。在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用背景,有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。
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公开(公告)号:CN102080094A
公开(公告)日:2011-06-01
申请号:CN201010204691.9
申请日:2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光T载体以及其的构建方法,还涉及该荧光T载体在基因克隆中的应用,其中荧光T载体为在出发载体pMD18-TSimple Vector中引入增强子序列和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。该荧光T载体灵敏度高,在唯一保守位点插入一个碱基就可导致红色荧光蛋白(UPMT)荧光的丧失,从而克服了常规T载体通过蓝白斑对小片段插入重组子筛选时假阳性偏高的现象。同时,该T载体克隆PCR产物通过有无荧光对重组子进行筛选,不需要添加额外的底物和诱导剂如:X-gal and IPTG,成本低,操作步骤少,灵敏度又高。
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公开(公告)号:CN101928719A
公开(公告)日:2010-12-29
申请号:CN201010204681.5
申请日:2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种蛋白定向进化领域中对水溶性/折叠强的蛋白突变体进行筛选的一种高通量、灵敏度高、方便筛选的T载体及其构建方法和应用,本发明的T载体为在出发载体pMAL-c2x中引入6个组氨酸(His)标签、多克隆位点序列(MCS)和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。本发明所构建的用于筛选蛋白可溶性表达的T载体,带有强的Ptac启动子,可以对PCR产物直接用于克隆、表达、纯化;特别地,可以对水溶性强/超折叠的蛋白突变体进行方便地筛选。
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