公开(公告)号：CN101864407B

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201010204707.6

申请日：2010-06-18

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 范军 ,  亓振国

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种TEV蛋白酶突变体，与原始TEV蛋白酶相比，第17位由丝氨酸(Ser)取代苏氨酸(Thr)，第56位由缬氨酸(Val)取代亮氨酸(Leu)，第68位由天冬氨酸(Asp)取代天冬酰胺(Asn)，第77位由缬氨酸(Val)取代异亮氨酸(Ile)，第135位由甘氨酸(Gly)取代丝氨酸(Ser)。本发明还提供了突变体的编码基因及其含有编码基因的表达载体和宿主细胞以及突变体在大肠杆菌中进行蛋白重组表达的应用。采用定点突变技术改造TEV蛋白酶基因，特异性的改变TEV蛋白酶中的五个氨基酸残基，获得的TEV蛋白酶的突变体可溶性和酶活性均得到显著的提高。

公开(公告)号：CN101864407A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN201010204707.6

申请日：2010-06-18

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 范军 ,  亓振国

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种TEV蛋白酶突变体，与原始TEV蛋白酶相比，第17位由丝氨酸(Ser)取代苏氨酸(Thr)，第56位由缬氨酸(Val)取代亮氨酸(Leu)，第68位由天冬氨酸(Asp)取代天冬酰胺(Asn)，第77位由缬氨酸(Val)取代异亮氨酸(Ile)，第135位由甘氨酸(Gly)取代丝氨酸(Ser)。本发明还提供了突变体的编码基因及其含有编码基因的表达载体和宿主细胞以及突变体在大肠杆菌中进行蛋白重组表达的应用。采用定点突变技术改造TEV蛋白酶基因，特异性的改变TEV蛋白酶中的五个氨基酸残基，获得的TEV蛋白酶的突变体可溶性和酶活性均得到显著的提高。