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公开(公告)号:CN1632132A
公开(公告)日:2005-06-29
申请号:CN200310122647.3
申请日:2003-12-22
Applicant: 华东理工大学 , 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种探针及其在关联检测基因多态性位点中的应用。本发明所采取的方法是对探针进行改造以及用不同浓度的PCR引物和LDR探针来解决LDR反应特异性不高和探针影响PCR反应的问题。本发明可以提高LDR反应的特异性,提高多态性位点检测的准确度,降低了LDR探针对其后PCR反应的影响,减少了非特异性扩增产物,简化了LDR和PCR关联进行基因多态性位点检测的程序,省去了对LDR残余探针进行消化的过程。
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公开(公告)号:CN118620812A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410724433.5
申请日:2024-06-05
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/31 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/60 , C12N15/55 , C12P13/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种具有耐酸能力、生产L‑高丝氨酸的大肠杆菌工程菌株及其构建方法和应用,通过将大肠杆菌的耐酸系统调控因子编码基因gadE和分子伴侣蛋白编码基因hdeB整合到载体质粒中构建一种耐酸系统质粒,然后将其转入大肠杆菌底盘菌株,即可获得一种具有耐酸能力的大肠杆菌工程菌株。本发明以改造后的耐酸性大肠杆菌为出发菌株,改造L‑高丝氨酸合成与降解途径,改造葡萄糖转运系统,增强草酰乙酸和L‑天冬氨酸的供应,优化NADPH水平,增强L‑高丝氨酸的外排,最终得到一株具有耐酸能力、高效生产L‑高丝氨酸的大肠杆菌工程菌株。该方法的发酵工艺简单、有利于降低生产成本、无需添加诱导剂,具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN118308280A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410550038.X
申请日:2024-05-06
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开一种可用于酶法制备甾体药物中间体的工程菌及其应用。所述工程菌以链霉菌为微生物底盘,分别异源表达3‑甾酮‑Δ4(5α)‑脱氢酶RjKst4D、3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶ReKstD3或组合表达3‑甾酮‑Δ4(5α)‑脱氢酶RjKst4D和3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶MnKstD2基因构建而成,RjKst4D、ReKstD3、MnKstD2基因的核苷酸序列分别如SEQ ID:No.1‑3所示。根据本发明提供的工程菌及方法,可将廉价的剑麻皂素“变废为宝”作为甾体药物生产的新资源,实现4‑PD、1‑PD、1,4‑PD的制备,为甾体药物的工业生产提供了新的原料资源,推动了甾体制药工业的经济可持续发展。
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公开(公告)号:CN118109432A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410236948.0
申请日:2024-03-01
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N9/06 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N15/64 , C12N9/04 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12P17/12 , C12P17/10 , C12P17/00 , C12P41/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种胺脱氢酶突变体、单质粒双酶共表达系统及其在手性胺合成中的应用,所述胺脱氢酶突变体为:以SEQ ID No.2所示氨基酸序列的胺脱氢酶TvAmDH为模板,第294位点的缬氨酸替换为丙氨酸,第208位点的天冬酰胺替换为赖氨酸,所形成的突变体V294A/N208K,其氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。本发明通过合理的设计获得了一种催化活性增强的胺脱氢酶突变体,对多种芳香族羰基化合物均具有不对称还原胺化的活力,同时对辅酶NADH的催化活性也大幅提高。所述胺脱氢酶突变体在催化芳香族羰基化合物不对称还原胺化制备相应手性胺中具有良好的应用前景,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN113969269B
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202110475247.9
申请日:2021-04-29
Applicant: 永农生物科学有限公司 , 华东理工大学 , 宁夏永农生物科学有限公司
Abstract: 本申请涉及D‑氨基酸氧化酶突变体及其在制备L‑草铵膦中的应用。所述D‑氨基酸氧化酶突变体当与包含SEQ ID NO.1所示序列的D‑氨基酸氧化酶的氨基酸序列比对时,所述D‑氨基酸氧化酶突变体的氨基酸序列包含对应于第62位和/或第226位的氨基酸残基的替换,所述第62位和第226位是参照SEQ ID NO.1限定的,并且所述D‑氨基酸氧化酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.1所示序列具有至少90%的同一性。
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公开(公告)号:CN114214261B
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202111589724.0
申请日:2021-12-23
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstS基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(S)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。同时,本发明首次实现利用酯酶EstS拆分制备(S)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸。
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公开(公告)号:CN114149956B
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202111588413.2
申请日:2021-12-23
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstR基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(R)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。
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公开(公告)号:CN115252558B
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202211078734.2
申请日:2022-09-05
Applicant: 华东理工大学 , 江苏灵鹊生物科技有限公司
IPC: A61K9/127 , A61K47/24 , A61K47/28 , A61K45/06 , A61K31/683 , A61K31/4745 , A61K31/337 , A61P35/00
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公开(公告)号:CN114075516B
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202111385456.0
申请日:2021-11-22
Applicant: 华东理工大学 , 广东蓝宝制药有限公司
Abstract: 本发明提供一种高产麦考酚酸的基因工程菌,以短密青霉为宿主细胞,一个表达氧化裂解酶的MpaB基因与pPK2质粒形成的重组质粒pPKCMH,由经过截短的Pgpd启动子(PgpdT)启动MpaB基因的表达,所述的重组质粒经根癌农杆菌GV3101介导转移。本发明还提供了相应的基因工程菌的构建方法和应用。本发明的高产麦考酚酸的基因工程菌,可以显著提升麦考酚酸合成基因簇中MpaB基因表达量,并积极提高麦考酚酸的产量。并且,本发明提供的构建方法中,基于分子构建,无需繁琐操作,显著提升产量,具有良好的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN114717173B
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202210281670.X
申请日:2022-03-21
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种用于生产甾醇侧链不完全降解产物的基因工程菌株及其构建方法以及应用,构建方法包括:针对可降解转化甾醇的微生物中igr操纵子中的基因进行失活敲除,以及对甾醇代谢途径中的关键基因进行删除或/和过表达,从而获得一种基因工程菌株。采用这些菌株可选择性制备PDC、PDC‑M、△1‑PDC、△1‑PDC‑M、9α‑OHPDC、9α‑OHPDC‑M,进而用于肾上腺皮质激素等甾体药物的生产。本发明可大大提升甾体药物的生产效率和产品品质,有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、简化生产步骤、提高药物前体的利用率,从而降低生产成本,整体反应条件温和、环境友好,具有较高的经济价值和社会价值。
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