一种可用于酶法制备甾体药物中间体的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN118308280A

    公开(公告)日:2024-07-09

    申请号:CN202410550038.X

    申请日:2024-05-06

    Abstract: 本发明公开一种可用于酶法制备甾体药物中间体的工程菌及其应用。所述工程菌以链霉菌为微生物底盘,分别异源表达3‑甾酮‑Δ4(5α)‑脱氢酶RjKst4D、3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶ReKstD3或组合表达3‑甾酮‑Δ4(5α)‑脱氢酶RjKst4D和3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶MnKstD2基因构建而成,RjKst4D、ReKstD3、MnKstD2基因的核苷酸序列分别如SEQ ID:No.1‑3所示。根据本发明提供的工程菌及方法,可将廉价的剑麻皂素“变废为宝”作为甾体药物生产的新资源,实现4‑PD、1‑PD、1,4‑PD的制备,为甾体药物的工业生产提供了新的原料资源,推动了甾体制药工业的经济可持续发展。

    一种表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN114214261B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202111589724.0

    申请日:2021-12-23

    Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstS基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(S)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstS的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。同时,本发明首次实现利用酯酶EstS拆分制备(S)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸。

    一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN114149956B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202111588413.2

    申请日:2021-12-23

    Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstR基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(R)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。

    高产麦考酚酸的基因工程菌、构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN114075516B

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202111385456.0

    申请日:2021-11-22

    Abstract: 本发明提供一种高产麦考酚酸的基因工程菌,以短密青霉为宿主细胞,一个表达氧化裂解酶的MpaB基因与pPK2质粒形成的重组质粒pPKCMH,由经过截短的Pgpd启动子(PgpdT)启动MpaB基因的表达,所述的重组质粒经根癌农杆菌GV3101介导转移。本发明还提供了相应的基因工程菌的构建方法和应用。本发明的高产麦考酚酸的基因工程菌,可以显著提升麦考酚酸合成基因簇中MpaB基因表达量,并积极提高麦考酚酸的产量。并且,本发明提供的构建方法中,基于分子构建,无需繁琐操作,显著提升产量,具有良好的工业应用价值。

    一种用于生产甾醇侧链不完全降解产物的基因工程菌株及其构建方法以及应用

    公开(公告)号:CN114717173B

    公开(公告)日:2023-10-10

    申请号:CN202210281670.X

    申请日:2022-03-21

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产甾醇侧链不完全降解产物的基因工程菌株及其构建方法以及应用,构建方法包括:针对可降解转化甾醇的微生物中igr操纵子中的基因进行失活敲除,以及对甾醇代谢途径中的关键基因进行删除或/和过表达,从而获得一种基因工程菌株。采用这些菌株可选择性制备PDC、PDC‑M、△1‑PDC、△1‑PDC‑M、9α‑OHPDC、9α‑OHPDC‑M,进而用于肾上腺皮质激素等甾体药物的生产。本发明可大大提升甾体药物的生产效率和产品品质,有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、简化生产步骤、提高药物前体的利用率,从而降低生产成本,整体反应条件温和、环境友好,具有较高的经济价值和社会价值。

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