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公开(公告)号:CN1632132A
公开(公告)日:2005-06-29
申请号:CN200310122647.3
申请日:2003-12-22
Applicant: 华东理工大学 , 中国科学院上海微系统与信息技术研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种探针及其在关联检测基因多态性位点中的应用。本发明所采取的方法是对探针进行改造以及用不同浓度的PCR引物和LDR探针来解决LDR反应特异性不高和探针影响PCR反应的问题。本发明可以提高LDR反应的特异性,提高多态性位点检测的准确度,降低了LDR探针对其后PCR反应的影响,减少了非特异性扩增产物,简化了LDR和PCR关联进行基因多态性位点检测的程序,省去了对LDR残余探针进行消化的过程。
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公开(公告)号:CN1563377A
公开(公告)日:2005-01-12
申请号:CN200410017218.4
申请日:2004-03-25
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造,在其3’末端引入oligo(dT)序列,然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列,并与载体结合,转化到大肠杆菌感受态细胞中,促使其高表达,提取大肠杆菌的总RNA,然后用oligo(dT)纤维素进行分离纯化,获得所需的目的mRNA。本发明提供的方法,可以方便地获得高纯度的所需的mRNA片段,用于相关基因PCR检测试剂盒的开发。
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公开(公告)号:CN100355887C
公开(公告)日:2007-12-19
申请号:CN200410017218.4
申请日:2004-03-25
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造,在其3’末端引入oligo(dT)序列,然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列,并与载体结合,转化到大肠杆菌感受态细胞中,促使其高表达,提取大肠杆菌的总RNA,然后用oligo(dT)纤维素进行分离纯化,获得所需的目的mRNA。本发明提供的方法,可以方便地获得高纯度的所需的mRNA片段,用于相关基因PCR检测试剂盒的开发。
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公开(公告)号:CN1560276A
公开(公告)日:2005-01-05
申请号:CN200410016703.X
申请日:2004-03-03
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一组用于扩增基因片段的引物,该组引物包括两对引物,两对引物或者是引物对中的上下游引物和模板完全配对;或者是引物对的上游引物或者下游引物之一和模板DNA完全配对,而另外一条和模板DNA不完全配对。如此设计而成的引物可通过巢式PCR对任意待测基因片段进行扩增后形成限制性内切酶Hind III、EcoR I或Bam HI的识别序列,并与RFLP相关联,以限制性内切酶Hind III、EcoR I或Bam HI对扩增片段进行酶切反应,最后根据酶切片段片段大小对SNP进行检定。
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