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公开(公告)号:CN109939225B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN201910284652.5
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株重组鹦鹉热衣原体(Cps)外膜蛋白MOMP基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因的重组布鲁氏菌RA343‑MOMP株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对鹦鹉热衣原体MOMP抗体,从而实现对鹦鹉热衣原体的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和鹦鹉热衣原体的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN106749562B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201611077399.9
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑1及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为489054867的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将BLSJ‑1抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN108484757A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810377114.6
申请日:2018-04-25
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种伪狂犬病病病毒抗血清及其制备方法。本发明旨在为伪狂犬病诊断技术、诊断试剂以及猪伪狂犬病疫苗质量监控提供满足要求的伪狂犬病病毒阳性血清。本发明所涉及的伪狂犬病病毒阳性血清特异性高,且中和效价高达1:2000倍以上,可满足伪狂犬病活疫苗的外源病毒检验和鉴别检验;另外,该发明中免疫动物采用不含有猪源常见病原体的健康山羊,在试验动物的纯净度上容易控制,免疫原为伪狂犬病灭活疫苗和活疫苗,容易获得且避免使用伪狂犬病病毒强毒进行免疫,降低了生物安全风险;仅经过五次免疫就能够获得高效价的抗血清,方法简便易行,适合大规模制备。
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公开(公告)号:CN104845916B
公开(公告)日:2017-12-12
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN106749562A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611077399.9
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑1及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为489054867的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将BLSJ‑1抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN106556701A
公开(公告)日:2017-04-05
申请号:CN201611023727.7
申请日:2016-11-14
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/577 , G01N33/535 , G01N33/56911
Abstract: 本发明涉及羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本发明将提纯的布鲁氏菌脂多糖(LPS)经定量后包被96孔酶标板,以人工免疫健康绵羊制备阳性血清,以健康非免疫绵羊血清作阴性血清,以HRP标记兔抗羊Fc端抗体、底物溶液、终止液、样品稀释液、HRP标记兔抗羊IgG稀释液及20×洗涤液等组分组装而成,用于检测羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。本发明在常规提取LPS中,增加了蛋白酶K消化和苯酚抽提步骤,有效提高了LPS纯度;筛选了对山羊和绵羊均具有良好亲和力的单克隆抗体作为酶标二抗。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,有效控制试剂盒的反应背景,缩短了高通量检测所需的时间。
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公开(公告)号:CN106353496A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610987091.1
申请日:2016-11-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及布鲁氏菌荧光偏振(FPA)检测试剂盒。本发明使用了异硫氰酸荧光素(FITC)标记光滑型布鲁氏菌O链脂多糖小分子片段(OPS),作为抗原。基于FPA的实验原理,该试剂盒能对多种动物进行布病检测,同时能检测血清中的IgG和IgM类抗体,因此该试剂盒在敏感性方面具有更明显的优势;本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,特别是对阳性血清的效价进行了精确标定,有效提高了试剂盒的敏感性和特异性,敏感性、重复性、保存期、操作方便性等问题,大大缩短了高通量检测所需的时间,本发明为我国布鲁氏菌病诊断提供了新型高效的检测方法。
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公开(公告)号:CN104845916A
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN104004697A
公开(公告)日:2014-08-27
申请号:CN201410241278.8
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌2308株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果,该重组牛种布鲁氏菌被命名为布鲁氏菌r2308-ΔWboA株(CGMCC No.8885)。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN102288771B
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201110119635.X
申请日:2011-05-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/96
Abstract: 本发明涉及一种牛布鲁氏菌病阳性血清国家标准品。本发明所涉及的牛布鲁氏菌病阳性血清国家标准品是利用由我国田间自然感染牛布鲁氏菌病的阳性血清作为候选物,通过效价筛选、分装、冻干等工艺过程制备牛布鲁氏菌病阳性血清,并以VLA获得的牛布鲁氏菌病阳性血清国际标准品为参比进行补体结合试验、试管凝集试验和虎红平板凝集试验测定其效价,经过均一性检验、稳定性试验、协作标定和数据统计,保证效价定值准确而制备出牛布鲁氏菌病阳性血清国家标准品。
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